大连市科技计划项目(2008E11SF170)
- 作品数：15 被引量：80H指数：7
- 相关作者：郑学仿唐乾曹洪玉张涛安良梅更多>>
- 相关机构：大连大学辽宁省生物有机化学重点实验室大连帝恩生物工程有限公司更多>>
- 发文基金：大连市科技计划项目国家自然科学基金辽宁省高校创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：理学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 光谱法研究高铁肌红蛋白活性中心与咪唑的配位反应被引量：8
- 2011年
- 采用紫外-可见(UV-Vis)、常规荧光、同步荧光等光谱法研究了高铁肌红蛋白(metMb)与咪唑的轴向配位反应的光谱性质。结果表明,metMb-咪唑配位体系的形成使得metMb的Soret带和Q带均发生红移;并对7位和14位2个Trp残基微环境极性的影响是不同的;同时还引起metMb活性中心铁卟啉597 nm处荧光增强,并且体系荧光强度与加入咪唑的浓度成线性关系,由此计算了不同温度下反应的配位数、结合常数及热力学参数;metMb与咪唑配体之间的配位反应是按物质的量比1∶1进行的;温度升高不利于配位反应的进行;热力学参数表明,此配位反应是自发进行的,焓变是整个配位反应的主要动力。
- 周华伟曹洪玉唐乾李进京郑学仿
- 关键词：高铁肌红蛋白咪唑配位反应热力学参数
- 可见光谱法研究肌红蛋白血红素铁与金属离子相互作用(Ⅰ)被引量：7
- 2009年
- 肌红蛋白(Myoglobin,Mb)是哺乳动物细胞主要是肌细胞贮存和分配氧的蛋白质,由一条多肽链和一个血红素辅基构成,其血红素铁在氧气的传递和运输中起到关键作用。文章利用紫外-可见光谱法对肌红蛋白的血红素铁和外加金属离子M(Ⅱ)[Cu(Ⅱ),Zn(Ⅱ)和Co(Ⅱ)]的直接相互作用进行了研究。结果发现,金属离子M(Ⅱ)与肌红蛋白活性中心的Fe(Ⅱ)发生了直接相互作用,外加金属离子将铁离子从肌红蛋白中"拖拽"出来,形成部分空位肌红蛋白衍生物。同时研究了外界条件,如离子浓度对这种相互作用的影响,发现随着外加金属离子量的增加这种相互作用逐渐增强,其作用强度依次为Co(Ⅱ)>Zn(Ⅱ)>Cu(Ⅱ)。研究证实了肌红蛋白的血红素铁与金属离子之间存在直接相互作用,并且离子浓度对这种相互作用有影响。
- 唐乾郑学仿王静云刘媛媛袁玉莲
- 关键词：紫外-可见光谱金属离子肌红蛋白相互作用
- 3-溴丙酮酸与人血清白蛋白相互作用的光谱学研究被引量：22
- 2010年
- 运用荧光光谱、紫外可见吸收光谱和圆二色光谱法研究了抗肿瘤药物3-溴丙酮酸(3-Brom opyruvic acid,3-BrPA)与人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)的相互作用。3-BrPA对HSA的猝灭机制属于静态猝灭,并发生分子间非辐射能量转移。热力学数据显示,二者之间的作用力主要为静电作用;同步荧光光谱表明,3-BrPA与蛋白质中接近色氨酸残基的区域发生了相互作用;荧光光谱研究发现,Zn2+存在时3-BrPA对HSA的猝灭程度进一步增强;圆二色光谱法研究蛋白二级结构结果显示,3-BrPA对HSA的结构影响非常小。
- 裴明砚郑学仿曹洪玉唐乾
- 关键词：紫外可见光谱圆二色光谱
- 截短胰高血糖素样肽-1的构象研究被引量：8
- 2010年
- 截短胰高血糖素样肽-1(sGLP-1)不仅具备刺激胰岛β细胞增生和降低血糖的功能,而且半衰期较长,具有非常好的新药开发前景.为了阐明sGLP-1的功能,本文运用圆二色光谱和荧光光谱探究了sGLP-1在不同条件下的构象,结果表明,sGLP-1在磷酸盐缓冲液中主要呈无规则构象,螺旋含量很低;在含十二烷基硫酸钠或三氟乙醇的磷酸盐缓冲液中主要呈螺旋构象.溶液pH值和温度变化对sGLP-1的构象影响显著.sGLP-1保留了结合并激活受体的关键残基,在受体的诱导下,在体内形成正确构象,从而结合并激活受体,发挥它的功能.研究结果表明,适当缩短GLP-1C端片段,能获得作用时间长、效力高的GLP-1类似物.
- 聂新华张涛李元郑学仿曹洪玉唐乾
- 关键词：圆二色光谱荧光光谱构象
- 光诱导高铁肌红蛋白还原的光谱法研究被引量：10
- 2011年
- 采用紫外-可见吸收、荧光及圆二色(CD)等光谱法为主要分析手段,对光诱导高铁肌红蛋白(metmyoglobin,metMb)还原及其引起的蛋白结构变化进行了研究.采用氙灯430 nm的单色光和紫外灯对高铁肌红蛋白溶液进行光照实验,实验结果显示,在metMb的Q吸收带545 nm和580 nm附近吸收峰强度显著增强.通过验证性实验,证明光照后metMb发生了还原反应.验证性实验包括:metMb中加入还原剂连二亚硫酸钠实验;光照后样品加入氧化剂铁氰化钾的可逆性实验;光照的同时通入CO实验.进一步讨论表明,采用氙灯430 nm的单色光诱导metMb还原的机理为光诱导的分子内电子转移.此外,对光还原反应后的样品进行同步荧光和CD光谱分析,发现蛋白质色氨酸残基微环境极性增加,α-螺旋的含量由63%下降到57%,而β-折叠的含量增加了7%.
- 周华伟曹洪玉唐乾安良梅郑学仿
- 关键词：高铁肌红蛋白光还原激发态
- 基于光谱法研究盐酸胍诱导的人血红蛋白去折叠过程
- 2012年
- 借助于紫外-可见吸收光谱法、荧光光谱法以及停流-荧光光谱法研究了盐酸胍(GdmHcl)诱导人血红蛋白的去折叠过程。实验发现,盐酸胍诱导的血红蛋白去折叠有两个不同的过程,即随着GdmHcl浓度增加到1.0mol·L-1左右时,血红蛋白亚基发生解聚,形成中间态;持续增加其浓度时,各亚基发生内部去折叠,最终导致血红素发生崩解。加入还原剂(β-巯基乙醇)对血红蛋白亚基解聚、血红素崩解有协同作用且直接引起亚基和全分子同步变构。血红蛋白去折叠过程从"三态模型"转变为"二态模型"。
- 李进京唐乾曹洪玉张玉姣张涛郑学仿
- 关键词：光谱法盐酸胍去折叠中间态
- 不同类型表面活性剂与高铁肌红蛋白相互作用被引量：5
- 2011年
- 通过UV-Vis吸收光谱、同步荧光光谱、圆二色(CD)光谱等方法对阴离子型表面活性剂——琥珀酸二辛酯磺酸钠(AOT)和十二烷基苯磺酸钠(SDBS)、阳离子型表面活性剂——十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)、两性离子型表面活性剂——3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸(CHAPS)与马心高铁肌红蛋白(metMb)的不同作用机理进行了探讨.结果显示:阴、阳离子型表面活性剂可以与蛋白发生较强烈的作用,且相互作用与表面活性剂的浓度密切相关.AOT和SDBS浓度的升高使得metMb的Soret带发生红移且出现两个新的Q带,伴随着配体金属电荷转移(LMCT)带的消失,蛋白从水合的六配位高自旋复合物(6-cHs)转化成六配位低自旋高铁血红素复合物(6-cLs),低浓度的AOT和SDBS对Tyr和Trp微环境均有影响,能使metMb的二级结构发生变化;而CTAB和DTAB在低浓度时对metMb的血红素中心影响不大,但是对Trp和Tyr的微环境影响很大,高浓度时主要通过静电吸引作用以聚合体形式直接作用于血红素中心,使Soret带发生蓝移,metMb形成五配位高自旋(5-cHs)复合物,血红素从疏水腔中释放出来,metMb的α螺旋含量减少.DTAB由于自身结构的特点,与CTAB作用于蛋白的过程有些区别,形成了一个中间态,但最终也导致血红素的暴露.两性离子型表面活性剂在测定浓度范围内不与metMb发生作用,原因是CHAPS整体呈电中性,其与metMb的阴离子性或者阳离子性位点作用的能力很弱,同时也说明metMb表面带相反电荷的位点相距较远.结果充分证明表面活性剂与蛋白相互作用的方式与表面活性剂的种类、结构及其浓度有关.
- 张莹莹曹洪玉唐乾郑学仿
- 关键词：阴离子型表面活性剂两性表面活性剂高铁肌红蛋白光谱法
- 药物与血清白蛋白相互作用中荧光光谱学的研究进展被引量：17
- 2009年
- 研究药物分子与蛋白质相互作用对阐明药物的运输和代谢以及了解蛋白质的结构与功能关系有着重要的意义。综述测定药物分子与血清白蛋白相互作用的荧光猝灭机制、结合常数、结合数、作用力类型以及药物分子对蛋白质构象的影响等基本原理和实验方法,并列举一些药物与血清白蛋白相互作用的实验结果,最后讨论其发展方向。
- 王芳裴明砚唐乾郑学仿
- 关键词：荧光光谱药物分子血清白蛋白相互作用
- 多肽结构与功能相互关系的研究进展被引量：3
- 2009年
- 多肽在生物体内具有多种重要的生理功能,涉及激素、神经和细胞因子、免疫和生殖等多个领域。多肽的构象决定其功能,针对多肽的构象与功能之间关系的研究日趋重要。多肽构象与功能相互关系的研究方法也成为研究的热点。
- 聂新华张涛李元唐乾郑学仿
- 关键词：多肽相互作用
- 停流光谱在蛋白质动力学反应中应用的研究进展被引量：1
- 2009年
- 介绍停流技术的原理,概述在线停流和圆二色谱、荧光光谱等仪器联用的现状,并讨论其在蛋白质与其它分子相互作用动力学过程及机理领域的应用。
- 赵维秋李宜雯曹洪玉唐乾郑学仿
- 关键词：蛋白质反应动力学
