国家转基因植物研究与产业化专项(J99-A-038)
- 作品数：5 被引量：72H指数：5
- 相关作者：肖守华王崇启焦自高郭兴启杨国栋更多>>
- 相关机构：山东省农业科学院山东农业大学中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：国家转基因植物研究与产业化专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一个光合组织特异表达强启动子的分离及功能分析被引量：23
- 2003年
- 用接头PCR技术克隆了长度为1415bp的PNZIP基因启动子,该启动子具有真核生物启动子的典型特征,引物延伸实验证明转录起始位点位于翻译起始位点上游122bp处。根据PNZIP基因启动子的序列特征,利用PCR技术对该启动子进行了有目的的缺失,将5个长度不同的启动子片段分别与报告基因GUS相连接,构建植物表达载体,转化烟草。荧光定量检测结果表明:5个不同长度的PNZIP启动子均能驱动GUS基因在光合组织中专一表达,它们的活性随着启动子5′端的逐步缺失而不断地下降;在叶片组织中长度为1415bp的PNZIP启动子活性比35S启动子高9倍;PNZIP启动子中存在2个可能与光合组织特异表达有关的新的顺式作用元件,即GAAATA和GATACT,GATACT元件可能决定基因的光合组织特异性表达,而GAAATA可能作为增强子提高基因在光合组织的表达强度。
- 杨予涛杨国栋刘石娟郭兴启郑成超
- 关键词：植物基因工程特异表达强启动子基因表达转基因植物
- 厚皮甜瓜高效再生体系的建立被引量：17
- 2007年
- 以优质厚皮甜瓜品种鲁厚甜2号和鲁厚甜4号为材料,系统研究了以子叶为外植体的厚皮甜瓜组培高效再生体系。结果表明:两个甜瓜品种在不定芽和愈伤组织诱导上存在着较大的差异,在MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L的分化培养基上,鲁厚甜2号不定芽诱导率最高达92.6%;而鲁厚甜4号在MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L中达94.3%;诱导出的不定芽丛的伸长以MS+KT 0.2 mg/L为最佳;两个甜瓜品种在1/2MS+IBA 0.4 mg/L中均获得良好的生根效果。另外,保持高温、高湿是甜瓜再生苗移栽成活的重要条件。
- 肖守华赵善仓王崇启董玉梅焦自高
- 关键词：厚皮甜瓜子叶不定芽
- 强MAR的分离及其体内外功能鉴定被引量：15
- 2002年
- 将MAR（matrix attachment region）构建到外源基因表达盒两侧可以促进外源基因的表达克服基因沉默.用PCR方法从烟草和拟南芥中分离到4个新的MAR序列（TM2,TM3,AM1和AM2）,以水稻悬浮细胞为材料,提取大量细胞核制备核基质,以已发表的MAR（TM1）为对照,对4个新MARs序列进行体外结合实验.结果表明TM2和TM3与核基质的结合能力强于已知MAR序列.将4个新MARs和对照分别顺向构建到表达载体pBI121 gus基因表达盒两侧,用农杆菌介导法转化烟草,获得转基因植株.对转基因植株体内GUS酶活性检测表明,TM1,TM2,TM3和AM1均能使外源基因表达增强,其中TM2增强5倍,TM1增强1.5倍,TM2增强效果强于对照TM1.表明分离到一个新的强MAR,可以用于高效表达载体的构建.对5个MARS的序列特征、体外结合能力及外源基因表达影响三者之间的关系进行了分析,并对获得的强MAR在植物基因工程中的应用进行了讨论.
- 张可伟王健美杨国栋郭兴启温孚江崔德才郑成超
- 关键词：体外结合外源基因表达高效表达载体植物基因工程
- 西瓜高效再生体系的建立被引量：9
- 2010年
- 以优质小果型西瓜品种西173和小麒麟为材料,系统研究了以子叶为外植体的西瓜组培高效再生体系。结果表明:2个西瓜品种在不定芽和愈伤组织诱导上存在着较大差异,在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1的分化培养基上,西173不定芽诱导率最高达到92.6%,在MS+6-BA2.0mg·L-1+IAA0.2mg·L-1培养基上小麒麟不定芽诱导率最高达到89.7%;诱导出的不定芽丛伸长以MS+KT0.2mg·L-1培养基最佳;2个西瓜品种不定芽在MS+IBA0.2mg·L-1培养基上均获得了较好的生根效果。组培苗移栽后保持高温、高湿是移栽成活的重要条件。西瓜高效再生体系的建立为应用基因工程技术改良西瓜品质和提高其抗逆、抗病性奠定了基础。
- 肖守华李国生焦自高王崇启董玉梅李圣辉
- 关键词：西瓜子叶不定芽植株再生
- 厚皮甜瓜(Cucumis melon)鲁厚甜2号香气成分的GC-MS分析被引量：10
- 2010年
- 采用顶空固相微萃取方法对厚皮甜瓜鲁厚甜2号香气进行富集,经GC-MS联机检索分析,得到107种挥发性组分,初步鉴定出79种,其中酯类有29种、醇类9种、醛类6种、酮类3种、酸类4种、烷烃类20种和其他8种化合物成分。鲁厚甜2号主要香气成分有乙酸苯甲酯、n-软脂酸、2-苯基乙酸乙酯、2-甲基乙酸-1-丁醇、硬脂酸、异丙氧基氨基甲酸乙酯和乙酸己酯等,它们占峰总量的46.72%,对甜瓜的整体香气有关键性影响。
- 肖守华王崇启乔卫华赵善仓刘成静焦自高
- 关键词：厚皮甜瓜顶空固相微萃取香气GC-MS分析
