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黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11531146)
作品数:
2
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相关作者:
雷蕾
申景岭
金连弘
单智焱
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相关机构:
哈尔滨医科大学
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发文基金:
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单智焱
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年份
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2008
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细胞外基质的程序性应用促进胚胎干细胞的神经分化
2008年
目的探讨细胞外基质(ECM)在胚胎干细胞(ESCs)诱导分化中特定时期的作用。方法将ESCs悬浮培养形成胚胎小体(Embryonic bodies,EBs),用高浓度维甲酸(RA)诱导,再将EBs接种在GL、FN、LPO基质上进行分化,利用免疫荧光方法比较这些基质对神经分化的影响;进一步检测LPO对神经突起生长的影响。结果高浓度RA启动并加速了nestin阳性的神经前体细胞的分化;FN对ESCs的神经分化具有剂量依赖性的促进作用,可提高神经元的分化率;LPO基质能够促进神经细胞的突起生长,进一步诱导神经细胞的成熟。结论不同基质在分化的特定阶段起到了不同作用,在诱导神经前体分化阶段应用FN以及在诱导神经细胞分化阶段应用LPO的联合作用对ESCs向神经细胞分化作用最显著。
单智焱
雷蕾
陈雅俊
金连弘
申景岭
关键词:
胚胎干细胞
细胞外基质
分化
神经细胞
绿色荧光蛋白基因转染小鼠胚胎干细胞及向神经细胞的分化
2008年
目的建立能够稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的小鼠胚胎干细胞(ESC),并诱导其向神经细胞分化,为临床移植治疗神经系统疾病提供方便追踪观察的神经细胞。方法分别用脂质体、电穿孔转染法转染小鼠胚胎干细胞系R1,检测48h转染效率;经G418筛选后,得到稳定高效表达GFP的ESC克隆,通过碱性磷酸酶(AKP)染色检测ESC的生物学特性;利用单层分化法诱导转染GFP的胚胎干细胞向神经细胞分化,通过免疫荧光检测神经细胞特异标记Tuj1。结果转染48h的GFP阳性细胞转染率脂质体组为65%,电穿孔组为79%,两组比较差异无统计学意义(Х^2=3.14,P〉0.05)。转染GFP的胚胎干细胞AKP染色阳性,并可诱导分化为Tuj1阳性的神经细胞。结论建立稳定表达GFP基因的胚胎干细胞克隆,获得的转染GFP的胚胎干细胞能够分化为神经细胞。
单智焱
申景岭
雷蕾
徐燕宁
金连弘
关键词:
胚胎干细胞
电穿孔
细胞分化
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