辽宁省自然科学基金(20102264)
- 作品数：6 被引量：28H指数：3
- 相关作者：李建军杨军李志伟杨晓晓贾晓宇更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国科学院金属研究所更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 调控脂肪间充质干细胞成软骨分化基因Sox-9和低氧诱导因子1α的表达被引量：6
- 2016年
- 背景:有学者采用基因转染的方法诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化,使种子细胞能够稳定合成和分泌特定的细胞因子,从而达到长期稳定刺激种子细胞增殖、分化和软骨形成的目的。目的:观察胰岛素样生长因子1基因转染对兔脂肪间充质干细胞低氧诱导因子1α和Sox-9表达的影响。方法:(1)取成年新西兰大耳白兔颈后部皮下脂肪组织,分离、培养兔脂肪间充质干细胞,免疫荧光法鉴定后在脂质体介导下应用pc DNA3.1-IGF-1基因转染脂肪间充质干细胞,G418筛选,获得稳定转染的细胞株;(2)实验分为3组:正常传代培养的脂肪间充质干细胞;转染pc DNA3.1的脂肪间充质干细胞;转染pc DNA3.1-IGF-1的脂肪间充质干细胞。(3)RT-PCR及Western blot法检测转染后细胞中胰岛素样生长因子1的表达,MTT法绘制细胞增殖曲线,Dil荧光染料标记后计数细胞增殖效率,免疫荧光法分析转染后细胞低氧诱导因子1α和Sox-9的表达情况,DMMB定量测定总糖胺聚糖含量。结果与结论:(1)成功构建稳定表达pcD NA3.1-IGF-1的细胞株,RT-PCR及Western blot检测证实转染后的细胞株在m RNA水平上获得胰岛素样生长因子1的表达,并且成功翻译为蛋白;(2)MTT提示转染后细胞增殖活性增强;(3)胰岛素样生长因子1基因转染显著提高Dil标记脂肪间充质干细胞的增殖效率;(4)转染后细胞的低氧诱导因子1α和Sox-9表达阳性;(5)胰岛素样生长因子1基因转染组糖胺聚糖含量明显高于其他2组(P<0.01)。(6)结果说明,胰岛素样生长因子1基因转染能够能够有效促进脂肪间充质干细胞增殖,促使阳性表达低氧诱导因子1α和成软骨分化调控基因Sox-9,并有效促进细胞分泌软骨细胞外基质糖胺聚糖。
- 张传辉李建军杨军
- 关键词：干细胞胰岛素样生长因子1脂肪间充质干细胞低氧诱导因子1
- 前内侧钢板支撑固定治疗胫骨平台后外侧塌陷骨折的临床研究被引量：6
- 2014年
- 目的研究前内侧钢板支撑固定胫骨平台后外侧塌陷骨折的手术效果。方法自2011-01—2013-03收治胫骨平台骨折存在外髁劈裂及后外侧塌陷者17例，均采用前内侧钢板支撑后外侧塌陷骨块并联合外侧钢板固定外侧平台劈裂骨折，植骨填补骨缺损，观察骨折固定情况、愈合情况和术后并发症。结果本组手术时间平均2．5h。17例均获得平均8（6～12）个月随访，骨折均解剖复位，下肢长度对线及旋转矫正满意，骨折愈合时间平均3（2—4）个月，无感染、关节僵硬等并发症发生。末次随访时膝关节功能按Rasmussen评分标准评定：优13例，良2例，可1例，差1例。结论前内侧钢板支撑胫骨平台后外侧塌陷骨折块可达到关节面的解剖复位，获得坚强固定，加快恢复膝关节的功能。
- 王阳李建军陈旭杨晓晓李志伟贾晓宇
- 关键词：胫骨平台骨折
- 动态压力联合胰岛素样生长因子1基因转染对壳聚糖/明胶支架中兔脂肪间充质干细胞成软骨分化的影响被引量：1
- 2021年
- 背景:应用生物反应器体外模拟人体内生物力学环境,联合应用基因转染技术体外构建组织工程软骨是目前组织工程研究领域的新思路。对于机械应力促进脂肪间充质干细胞成软骨分化的作用机制,目前国内外尚无定论。目的:研究动态压力与胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)基因转染对诱导负载于壳聚糖/明胶复合支架上的兔脂肪间充质干细胞成软骨分化的交互作用。方法:将壳聚糖/明胶复合支架材料置于6孔培养板中,分4组干预:A组滴加脂肪间充质干细胞悬液,孵育4 h后加入完全培养基培养9 d;B组滴加IGF-1转染的脂肪间充质干细胞悬液,孵育4 h后加入完全培养基培养9 d;C组滴加脂肪间充质干细胞悬液,孵育4 h后加入完全培养基培养2 d,随后进行动态压力培养(2%形变,频率1 Hz),加压20 min,间歇20 min,每天6个循环周期,继续培养7 d;D组滴加IGF-1转染的脂肪间充质干细胞悬液,孵育4 h后加入完全培养基培养2 d,随后进行动态压力培养,继续培养7 d。培养结束后,检测细胞-支架复合物中细胞的增殖速度、糖胺聚糖含量、钙离子含量及软骨相关基因表达(IGF-1、Sox-9、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖和X型胶原)。结果与结论:①各组细胞均具有较好的增殖能力,其中增殖速度由快至慢依次为D组、B组、C组、A组;②B、C、D组的糖胺聚糖、钙离子含量高于A组(P<0.01),D组高于B、C组(P<0.01),B组高于C组(P<0.01);③4组间X型胶原mRNA表达无差异(P﹥0.05);B、C、D组的IGF-1、Sox-9、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖mRNA表达高于A组(P<0.01),D组高于B、C组(P<0.01),B组高于C组(P<0.01);④结果表明,动态压力联合IGF-1基因转染协同诱导壳聚糖/明胶复合支架上脂肪间充质干细胞的成软骨分化。
- 张传辉李建军杨军
- 关键词：软骨干细胞胰岛素样生长因子1软骨细胞钙离子钙离子通道
- 锁定钢板内固定治疗青少年胫骨远端骨折累及骺板损伤的疗效观察被引量：10
- 2014年
- 目的探讨锁定钢板内固定治疗青少年胫骨远端骨折累及骺板损伤的临床疗效。方法自2010-03—2012-09,在C型臂X线机透视下采用有限切开复位锁定钢板内固定治疗青少年胫骨远端骨折伴骺板损伤18例,术前经X线片和CT检查明确骨骺损伤类型（根据Salter-Harris分型）,经踝关节前内侧弧形小切口将锁定钢板楔形尾端插入式固定骨折断端。结果 18例均获得随访8~10个月,平均9个月。末次随访时踝关节功能Helfet评分：优16例,良2例。骨折愈合良好,愈合时间平均3个月。患侧内外翻成角与生长长度与健侧比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论采用有限切开复位锁定钢板内固定治疗青少年累及骺板损伤的胫骨远端骨折具有较好的临床疗效。
- 李志伟李建军杨军杨晓晓贾晓宇陈旭王阳
- 关键词：胫骨远端骨折骺板损伤锁定钢板青少年内固定
- 镁锶合金修复兔桡骨骨缺损的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的研究Mg-Sr合金对兔桡骨骨缺损的修复效果。方法将30只新西兰大耳白兔随机分为Mg-Sr合金组和空白对照组两组,每组15只。手术制备双侧桡骨中段1.0cm骨缺损模型,镁锶合金组缺损部位植入Mg-Sr合金;空白对照组不植入任何材料作为对照。两组分别于术后4、8和12周各处死5只动物取材,行X线片、组织学检查及Micro-CT,观察各组对骨缺损的修复效果。结果 Mg-Sr合金组骨缺损得到了修复,空白对照组仅有少量新骨形成,但骨缺损未得到修复。结论 Mg-Sr合金对兔桡骨骨缺损有很好的修复效果。
- 葛野李世慧李建军谭丽丽万鹏韩君杰杨柯
- 关键词：骨缺损
- 动态压力对负载胰岛素样生长因子1基因兔脂肪间充质干细胞增殖能力和机械性能的影响被引量：2
- 2021年
- 背景:脂肪间充质干细胞是目前公认的较为优秀的组织工程软骨种子细胞,基因转染技术可以有效诱导其成软骨分化,应用生物反应器模拟体内力学环境,是目前广大学者探索体外构建组织工程软骨的新思路。目的:探讨周期性动态压应力联合胰岛素样生长因子1基因转染对种植于壳聚糖/明胶支架中的兔脂肪间充质干细胞增殖能力和弹性模量的影响。方法:在脂质体介导下应用pcDNA3.1-IGF-1基因转染兔脂肪间充质干细胞,G418筛选,获得稳定转染的细胞株;将负载或不负载胰岛素样生长因子1基因的脂肪间充质干细胞以5×10^10 L^-1的密度接种于壳聚糖/明胶支架中培养2 d,然后分别于动态压力(2%形变,1 Hz,4 h/d)环境中或静态培养条件下培养7 d;扫描电镜、Masson三色染色及阿尔新蓝染色观察细胞/支架复合物的形态学变化,MTT法绘制细胞增殖曲线,CM-Dil荧光染料标记细胞计数评估细胞增殖效率,DMMB定量测定软骨特异性细胞外基质糖胺聚糖含量,Real time PCR法检测软骨特异性基因Ⅱ型胶原的相对表达,应用BioDynamicTM mechanical tester测量各组细胞/支架复合物不同形变时的轴线压应力,计算对应的弹性模量。结果与结论:动态压力联合胰岛素样生长因子1转染可显著提高脂肪间充质干细胞的增殖能力,细胞分布更为均匀,软骨特异性细胞外基质糖胺聚糖及胶原分泌增多,上调Ⅱ型胶原基因的表达,机械性能显著改善。单纯胰岛素样生长因子1组的细胞增殖能力和弹性模量均优于单独动态压力组,但动态压力条件下细胞在支架中分布更为均匀。结果表明,动态压力与胰岛素样生长因子1基因转染均可显著提升兔脂肪间充质干细胞的增殖能力和机械性能,二者呈协同作用。
- 张传辉李建军杨军
- 关键词：干细胞脂肪间充质干细胞软骨细胞胰岛素样生长因子1弹性模量
