江苏省研究生培养创新工程项目(CX07B-1902)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：徐健祝树德刘琴谭永安姚远更多>>
- 相关机构：扬州大学江苏里下河地区农业科学研究所更多>>
- 发文基金：江苏省研究生培养创新工程项目国家重点实验室开放基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 粘虫颗粒体病毒对苏云金杆菌的增效特性及对Bt毒蛋白的降解活化作用被引量：8
- 2008年
- 以小菜蛾Plutella xylostella为试虫,采用生物测定方法测定了粘虫颗粒体病毒（Pseudaletia unipuncta granulosis virus,PuGV-Ps）对苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）的增效作用。结果表明：不同配伍PuGV-Ps和Bt间的共毒系数在105.3至195.0之间,PuGV-Ps对Bt毒力具有增强作用,其中以Bt∶PuGV-Ps为4∶1增效作用最明显,72hLC50为0.039mg/mL。不同温度和pH值都影响PuGV-Ps对Bt的增效作用,16℃-20℃增效程度明显高于24℃-32℃,而碱性条件下（pH8-9）增效作用更显著。PuGV-Ps对Bt的增效作用因小菜蛾龄期不同而变化,2、3龄幼虫死亡率较单独使用Bt分别提高了50%和30.31%,而作用于低龄（1龄）和高龄（4龄）幼虫时对Bt的增效作用不显著。PuGV-Ps饲喂2h后再接毒Bt,小菜蛾死亡率明显提高,48h死亡率达66.67%,较直接饲喂Bt＋PuGV-Ps处理死亡率提高了53.87%,差异极显著。SDS-PAGE表明PuGV-Ps具有碱性蛋白酶的活性,离体条件下能促进δ-内毒素酶解为47kD,60kD和61kD的毒性肽。
- 徐健刘琴谭永安祝树德
- 关键词：粘虫颗粒体病毒苏云金杆菌BT毒蛋白小菜蛾
- 粘虫颗粒体病毒对苏云金杆菌δ-内毒素的酶解活化作用被引量：2
- 2008年
- 粘虫颗粒体病毒（Psedualetia unipuncta granulovirus，PuGV-Ps）对苏云金杆菌（Bacillusthuring．iensis，Bt）具有增效作用。为明确其增效机制，采用SDS．PAGE方法研究PuGV．Ps对Btδ-内毒素的降解活化作用。结果表明，碱性条件下晶体蛋白和PuGV-Ps共同孵育，130kD的δ-内毒素被进一步酶解为分子量为110、87、61、47kD等多种不同的肽链，其酶解活化程度随缓冲液pH的升高不断加深，在pH值10．7的0．1mol／LNa2CO2缓冲液中，δ-内毒素完全降解，并产生具有一定抗蛋白酶继续降解的分子量为47、60和61kD的活性片段。用氨苯磺胺偶氮酪蛋白为底物测定PuGV．Ps中总蛋白酶活性的结果表明，PuGV—Ps在pH值为7．38～10．38时均具有蛋白酶活性，且蛋白酶活性随pH升高而显著提高。4种蛋白酶抑制剂均可抑制PuGV-Ps的蛋白酶活性，且以STI的抑制作用最强。SDS—PAGE试验同样显示了STI可以抑制PuGV-Ps对δ-内毒素的酶解活化。
- 徐健刘琴姚远王明明祝树德
- 关键词：粘虫颗粒体病毒苏云金杆菌
- PuGV-Ps对甜菜夜蛾中肠液酶解δ-内毒素的影响被引量：1
- 2008年
- 粘虫颗粒体病毒（PuGV-Ps）总蛋白酶活力测定表明,PuGV-Ps在pH7.38～10.38范围内均具有蛋白酶活性,且酶活力随pH的升高而显著提高。4种蛋白酶抑制剂均能抑制PuGV-Ps的蛋白酶活力,以大豆胰蛋白酶抑制剂的抑制作用最强,表明PuGV-Ps的蛋白酶活性是以胰蛋白酶为主要活力的多种蛋白酶的活性特征。PuGV-Ps对甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）中肠酶液离体蛋白酶活力及取食PuGV-Ps后总蛋白酶活力的影响测定表明,在中肠液酶适宜pH（9.38～10.38）范围内,PuGV-Ps在一定程度上抑制了中肠酶液的总蛋白酶活力。SDS-PAGE试验表明,PuGV-Ps影响甜菜夜蛾中肠酶液对苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis）δ-内毒素的降解活化作用,表现在对130ku的δ-内毒素酶解活化成60～87ku的活性多肽影响不大,但对其进一步降解具有抑制作用。不同缓冲液同样影响甜菜夜蛾中肠酶液对δ-内毒素的降解,Na2CO3是影响降解程度的重要因子。
- 徐健刘琴祝树德
- 关键词：甜菜夜蛾粘虫颗粒体病毒
