浙江省自然科学基金(Y210435)
- 作品数：6 被引量：41H指数：4
- 相关作者：陈公英王洁周翔葛珂李鸽更多>>
- 相关机构：浙江中医药大学杭州师范大学宣汉县人民医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金杭州市医药卫生科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阿德福韦酯单药治疗的慢乙肝患者聚合酶RT区变异位点及临床意义被引量：4
- 2014年
- 目的 通过对慢性乙型肝炎（CHB）患者血清HBV聚合酶逆转录（RT）区基因序列分析,探讨阿德福韦酯（ADV）单药抗病毒治疗失败,聚合酶RT区变异位点特点及临床意义.方法 采用回顾性分析方法,对接受阿德福韦单药抗病毒治疗出现病毒学突破,经聚合酶RT基因测序,证实存在基因突变的44例患者的聚合酶RT区变异位点、临床特点及随访资料进行分析.结果 44例阿德福韦酯单药治疗患者,至出现RT区变异最短治疗时间8个月,最长5年,平均（32.2＆#177;6.7）个月.出现病毒学突破后,病毒水平波动在103拷贝/ml～108拷贝/ml之间；变异位点A181T 11例（25.0％）、A181V 8例（18.2％）、A181T/N236T 10例（22.7％）、A181V/N236T 6例（13.6％）、N236T9例（20.4％）；出现生化学突破40例（90.9％）,ALT指标波动在37 IU/L～ 946 IU/L;挽救治疗采用联合拉米夫定23例、联合恩替卡韦6例,联合替比夫定1例,改单药拉米夫定4例,改单药恩替卡韦10例.预后出现疾病重症化3例,经挽救治疗病情得到恢复41例.结论 ①阿德福韦单药耐药RT区A181T（A181T/N236T）变异约占半数（47.7％）,随访2年,其肝癌发生率呈现高于非A181T患者趋势.②条件允许,初始治疗应首选HBV抑制作用强、耐药发生率低的药物,避免疾病重症化或肝癌等不良事件发生.
- 郑良达鲍艳婷陈公英王洁周翔葛珂
- 关键词：阿德福韦酯
- 截断型突变体HBx-Mut120稳定表达真核细胞系的建立
- 2018年
- 目的 成功构建HBx及其截断型突变体HBx-Mut120的真核载体,建立了两者稳定表达的HepG2细胞系,并研究了目的基因对细胞生长的影响。方法 采用PCR扩增HBx及其截断型突变体HBx-Mut120基因,然后分别克隆到PCMVTag2B载体中,并构建成重组质粒HBx-PCMV-Tag2B和HBx-Mut120-PCMV-Tag2B,经过PCR、酶切、测序鉴定重组质粒后,将其转染人肝癌细胞HepG2,经Game 418筛选后得到稳定表达目的基因的Hep G2细胞,最后通过RT-PCR和Western blot鉴定HBx、HBx-Mut120的mRNA和蛋白在HepG2细胞中的表达情况,并用流式细胞仪检测了各组细胞的周期。结果 (1)成功构建目的基因表达载体PCMV-Tag2B-HBx、PCMV-Tag2B-HBx-Mut120。(2)成功建立稳定表达HBx及其缺失片段的HBx蛋白的HepG2细胞系。(3)通过流式细胞仪检测各组细胞周期及对比,发现HepG2-HBx细胞和HepG2-HBx-Mut120细胞的生长分数(G_2+S)明显高于HepG2细胞及空载体转染的HepG2细胞。结论 本实验成功构建携带HBx及其截断型突变体HBxMut120基因的重组表达质粒,转染人肝癌细胞HepG2细胞后分别能够稳定表达HBx蛋白和截断型HBx蛋白,HBx及其突变体稳转细胞后更能促进HepG2细胞的增殖,且突变型目的基因稳转细胞系转移能力较前明显增强。为进一步研究截断型HBx突变体在肝癌的发生、发展中的作用奠定了实验基础。
- 鲍艳婷陈公英王洁李鸽葛柯
- 关键词：HBX基因HBX蛋白
- 替比夫定治疗后乙型肝炎病毒耐药变异与基因型的关系被引量：3
- 2012年
- 在我国，替比夫定仍为抗HBV的一线药物，但长期使用后导致的高耐药变异率限制了其在临床上的使用。根据核苷酸序列的差异，HBV可分为A～I九种基因型，我国以B型和C型为主。有研究表明，HBV不同基因型由于基因结构的不同致病性也存在一定差异，并可影响抗病毒药物的疗效。然而，HBV不同基因型是否对HBV耐药变异产生影响，是否可以作为预测HBV发生耐药变异的指标尚不明确。为此，本研究应用PCR-DNA测序技术，检测常见核苷（酸）类药物相关耐药变异位点，探讨HBV基因型与替比夫定治疗过程中病毒发生耐药变异的关系。
- 郭晓凤施军平武静张永乐朱兴芳陈公英
- 关键词：基因型抗药性突变
- 阿德福韦酯在拉米夫定耐药慢性乙肝治疗中的应用被引量：7
- 2014年
- 目的:探讨单用阿德福韦酯与阿德福韦酯联合拉米夫定对拉米夫定耐药性慢性乙型肝炎患者的临床效果。方法:104例拉米夫定耐药行慢性乙型肝炎患者随机分为观察组(n=52)与对照组(n=52),对照组仅给予阿德福韦酯治疗,观察组在对照组基础上联合应用拉米夫定治疗,对比两组治疗效果。结果:经治疗两组血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、HBV-DNA均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);且治疗后观察组ALT、AST、HBV-DNA低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);治疗后观察组HBV-DNA及乙肝病毒e抗原(HBeAg)转阴率均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组治疗过程中均未出现明显严重不良反应及副作用。结论:阿德福韦酯联合拉米夫定在拉米夫定耐药的慢性乙型肝炎患者中可起到协同治疗作用,疗效确切,安全可靠,但在用药期间应注意肾功能的变化。
- 熊飞郑良达
- 关键词：阿德福韦酯拉米夫定耐药慢性乙型肝炎
- 慢性乙型肝炎HBsAg及HBsAg/HBV DNA比值与组织病理炎症活动度的相关性被引量：22
- 2015年
- 目的 研究HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）基线血清HBsAg、HBsAg/HBVDNA比值与肝组织病理炎症活动度的相关性. 方法 回顾性分析153例HBeAg阳性CHB患者基线HBsAg、HBsAg/HBV DNA比值与肝组织病理炎症活动度的相关性.采用Taqman荧光定量PCR法检测血清HBV DNA水平,定量检测血清HBsAg滴度. 结果 HBsAg （log10IU/ml）与HBV DNA （log10IU/ml）、HBsAg/HBV DNA比值进行相关性分析,相关系数r分别为0.642、0.57,P值均＜ 0.0001,均呈显著性正相关;HBsAg和HBsAg/HBV DNA比值与炎症活动度进行相关性分析,相关系数r分别为-0.389、-0.307,P值均＜0.0001,二者与炎症活动度均呈负相关;而ALT （log10U/L）与炎症活动度呈正相关（r=0.480,P＜0.0001）.肝组织炎症活动度中度及以上患者的血清HBsAg及HBsAg/HBV DNA比值均显著低于轻度及以下患者,组间差异具有统计学意义（P均＜ 0.01）.HBsAg、HBsAg/HBV DNA比值及ALT在组织炎症活动度最优截断点的受试者工作曲线下面积分别为0.700、0.672、0.713;当机会曲线下面积等于0.5时,其显著性水平均有统计学意义（P均＜0.001）.HBsAg诊断组织炎症活动度的灵敏度为76.92％高于ALT的4.36％;HBsAg/HBV DNA比值的特异度为81.33％高于ALT的64.00％,ALT的约登指数均高于HBsAg及HBsAg/HBV DNA比值.当HBsAg与ALT并联时,其灵敏度高达94.08％;串联时,其特异度可高达85.60％. 结论 HBeAg抗原阳性CHB患者HBsAg、HBsAg/HBV DNA比值及ALT均可作为肝组织炎症程度的判断指标,HBsAg与ALT并联或串联诊断时具有更高的灵敏度和特异度.
- 李鸽王洁鲍艳婷郑良达葛珂周翔陈公英
- 关键词：组织学炎症活动度
- 对慢性乙型肝炎及肝硬化患者的核苷(酸)类药物耐药位点的分析被引量：5
- 2014年
- 目的 研究接受核苷（酸）类似物抗病毒治疗、出现病毒学突破后的慢性乙型肝炎、肝硬化患者血清乙型肝炎病毒（HBV）P区基因序列突变率,突变形式及用药情况,为评估病情进展和实施下一步抗病毒治疗方案提供较为全面的信息.方法 选取浙江中医药大学附属第六医院2009年3月～2012年10月447例接受核苷（酸）类似物抗病毒治疗、出现病毒学突破后的慢性乙型肝炎、肝硬化患者为研究对象,采用基因直接测序法,对其血清HBV P区基因PCR扩增产物进行测序,分析各个耐药位点,同时搜集相关用药史进行回顾性分析.结果 在447例病例中存在位点突变者227例（50.8％）,共存在30种变异形式,变异形式以M204I、L180M＋ M204V、L180M＋ M204I三者居多.其余种类复杂多样,大多以联合突变形式出现;耐药药物的使用及产生的耐药位点基本一致;主要的变异位点集中发生在M204I和L180M,余均较为分散.且经统计分析,乙型肝炎及肝硬化两总体的突变率有统计学差异.结论 对核苷（酸）类似物抗病毒治疗中出现病毒学突破的慢性乙型肝炎及肝硬化患者血清中HBVP区基因耐药位点的分析研究对合理用药以及发生耐药后及时调整治疗方案有重要的作用.
- 鲍艳婷郑良达陈公英王洁周翔葛珂
- 关键词：乙型肝炎核苷类药物
