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大鼠血管平滑肌细胞中bFGF及其受体FGFR-1的基因表达被引量：2: 2005年; 目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR-1在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的表达情况。方法:建立大鼠血管平滑肌细胞原代培养并鉴定;使用原位杂交检测VSMCs中bFGF及其受体FGFR-1的mRNA表达;用免疫组织化学和WesternBlot技术鉴定bFGF蛋白表达情况。结果:通过光镜和免疫组织化学技术从细胞形态和结构上使VSMCs得到鉴定;原位杂交证实大鼠VSMCs表达bFGF及其受体FGFR-1的mRNA;免疫组织化学表明VSMCs的胞核和胞浆中有bFGF蛋白表达,WesternBlot显示bFGF有18KDa、22KDa、22.5KDa3种异构体形式。结论:大鼠血管平滑肌细胞表达bFGF及其受体FGFR-1mRNA,bFGF有多种异构体形式并分布在VSMCs的胞核和胞浆中。; 孙晋津陈剑秋; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子受体血管平滑肌细胞

反义寡核苷酸抑制血管平滑肌细胞bFGF基因表达被引量：1: 2006年; 目的:探讨转染反义脱氧寡核苷酸(AODN)对血管平滑肌细胞(VSMCs)碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达的影响机制。方法:使用原位杂交和免疫组化技术检测体外培养的VSMCs中bFGFmRNA和蛋白表达;利用脂质体分别将设计合成浓度为5μmol/L反义(反义组)、正义(正义组)及随机(随机组)脱氧寡核苷酸导入体外培养的VSMCs;应用逆转录PCR和WesternBlot半定量测定及计算机图像分析的方法,观测寡核苷酸对bFGF基因表达的影响。结果:体外培养的大鼠VSMCs均有bFGFmRNA和蛋白表达,反义bFGF寡核苷酸作用于VSMCs后1～5d,bFGFmRNA表达和蛋白表达均明显减弱,反义组与对照组比较,mRNA、蛋白表达在第1～5d表达差异均有统计学意义;而正义、随机组无此效应,与单纯脂质体和空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:反义bFGF寡核苷酸对血管平滑肌细胞bFGF基因表达的抑制作用具有序列特异性。; 孙晋津陈剑秋; 关键词：寡核苷酸类反义成纤维细胞生长因子2 平滑肌基因表达

反义碱性成纤维细胞生长因子对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用被引量：12: 2004年; 目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义脱氧寡核苷酸(AODN)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法利用脂质体分别将浓度为5μmol／L的bFGF反义、正义及随机寡核苷酸(ODN)导入体外培养的VSMCs;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot半定量测定方法,观测ODN对bFGF基因表达的影响;通过细胞活性测定观察ODN对VSMCs增殖的抑制作用。结果 bFGF、AODN作用于VSMCs后1-5 d,其相应的mR-NA表达和蛋白表达均明显减弱,细胞增殖活性受到抑制。反义组与对照组相比,mRNA在第1-4天表达差异有非常显著性(P<0.01),第5天有显著性(P<0.05);蛋白表达在1-5d差异有显著性(P<0.05);细胞增殖率在1-4 d差异有非常显著性(P<0.01),第5天差异无显著性(P>0.05)。而正义、随机组无此效应,同单纯脂质体和空白对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论反义bFGF ODN可通过特异性抑制其相应基因表达来实现阻遏血管平滑肌细胞增殖。; 孙晋津陈剑秋; 关键词：反义 VSMC ODN 碱性成纤维细胞生长因子阻遏 BFGF基因

bFGF反义寡核苷酸对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响: 2011年; 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法 Wistar大鼠48只,分为反义寡核苷酸(AODN)组、正义寡核苷酸(SODN)组、随机寡核苷酸(RODN)组、空白对照组。将含300μg寡核苷酸的F127多聚凝胶溶液涂于移植静脉及吻合口外周,对比术后1周、2周移植静脉平均内膜及中膜厚度。并检测血管壁细胞内bFGF蛋白表达。结果术后1周、2周,AODN组内膜厚度、内膜/中膜及bFGF阳性细胞率均小于其它各组,差异均有显著性(P<0.05)。而SODN组、RODN组,空白对照组之间比较,均无显著性差异(P>0.05)。术后2周,SODN组、RODN组、空白对照组内膜增生较术后1周时明显,差异有显著性(P<0.05)。结论 bFGF反义寡核苷酸通过对bFGF基因表达的抑制作用,达到了抑制移植静脉内膜增生的目的。; 田鹏陈剑秋孙晋津王旺河; 关键词：反义寡核苷酸碱性成纤维细胞生长因子静脉移植内膜增生

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天津市自然科学基金(013612411)