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IL-32γ对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖与细胞周期的影响: 2012年; 目的:研究IL-32γ对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖与细胞周期的影响及机制。方法:体外培养活动性类风湿关节炎和骨关节炎(OA)患者成纤维样滑膜细胞并以IL-32γ处理,应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western印迹方法检测cyclinD1及NF-κBp65蛋白含量;免疫细胞化学染色法检测PCNA表达的变化。结果:IL-32γ对OA-FLS增殖没有影响;不同浓度的IL-32γ(10～100 ng/ml)在72～120小时范围内,浓度和时间依赖性促进RA-FLS增殖;100 ng/ml的IL-32γ作用RA-FLS 48小时后促进了细胞周期由G1期向S期,进而G2/M期转化,同时上调了cyclin D1、NF-κBp65和PCNA的蛋白表达水平。结论:IL-32γ可促进RA-FLS增殖和加速细胞周期转化。上调NF-κBp65和cyclin D1的表达可能是其作用机制之一。; 刘宇宏王沙沙沈凌汛徐玉兰; 关键词：类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖细胞周期

RNA干扰靶向沉默白细胞介素-32γ基因对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖与凋亡的影响被引量：3: 2012年; 目的研究靶向白细胞介素（IL）-32y的shRNA对类风湿关节炎（RA）成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖与凋亡的影响及其机制。方法设计合成靶向IL-32y的短发夹RNA（EASY-shRNA．IL-32y），用脂质体法导入RA-FLS细胞中；反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹法检测IL-32y、cyclinD1及p-Akt的表达；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞周期；TUNEL法检测细胞凋亡。采用t检验进行统计分析。结果①针对序列1、2和3的EASY．shRNA．IL-32均能有效抑制FLS的IL-32y的表达（P〈0．01），最大抑制率分别为75．6％、66．2％和64．1％。②实验组在接种后3d[A值：（0．23±0．03）对（0．35±0．03）和（0．36±0．04），均P〈0．05]和5d[A值：（0．27±0．03）对（0．52±0．05）和（0．53±0．04），均氏O．01]的细胞数量明显少于对照质粒组和未转染组。③实验组处于G，期的细胞比例为[（88±6）％]，较对照质粒组[（69±5）％]和未转染组[（68±4）％]显著为高（均P〈0．05）；处于S＋G2期的细胞比例为[（13．6±3．0）％]，较对照质粒组[（30．2±4．1）％]和未转染组[（32．1±4-3）％]显著为低（均P〈0．01）。④实验组凋亡率为[（20．50±3．21）％]，较对照质粒组[（9．20±0．32）％]和未转染组[（8．60±0．22）％]显著为高（均P〈0．01）。⑤实验组cyclinD1和p．Akt的表达[分别为（0．36±0．04）和（0．31±0．03）]明显低于对照质粒组[分别为（0．59±0．08）和（0．53±0．06）]和未转染组[分别为（0．61±0．07）和（0．52±0．06），均P〈0．01]。结论靶向IL-32y的shRNA抑制RA-FLS增殖并促进凋亡。其机制可能部分与下调cyclinD1和p-Akt的表达，从而延缓RA-FLS通过整个细胞周期和抑制其存活有关。; 刘宇宏王莎莎沈凌汛徐玉兰陈正望; 关键词：白细胞介素32 SHRNA 成纤维样滑膜细胞

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