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柱前衍生高效液相色谱法测定山黧豆中β-二氨基丙酸的方法研究被引量：1: 2020年; 建立了柱前衍生高效液相色谱法测定山黧豆中β-二氨基丙酸(β-ODAP)含量的方法。采用Luna-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈和HAc-NaAc为流动相(17∶83,V∶V),λ=360nm,柱温40℃,取20μL进样分析。β-ODAP在0.39~25.27μg/mL范围,其吸收峰峰面积与其质量浓度线性关系良好,A=140.50c+72.30,R=0.999 5;山黧豆种子中β-ODAP的含量最高。方法操作简便、快速、准确,选择性好,可用于植物样中β-ODAP含量的测定。; 张小寒董晓宁杨玲娟; 关键词：高效液相色谱山黧豆

酶固定化研究进展被引量：16: 2021年; 由于酶催化的特异性、高效性和温和性,酶的工业化利用一直是酶工程领域的研究热点。酶固定化是酶工程发展的必然趋势。固定化酶已在众多工业生产中发挥越来越重要的作用,围绕酶固定的载体材料开发与固定技术研究进展很快。传统酶固定化主要包括吸附、包埋、结合或化学交联等技术,然而固定化酶的稳定性、牢固性及催化效率等与工业实际应用仍具有很大差距。近年来,随着纳米技术、高分子材料化学、表面化学、蛋白质结构分析及分子生物学等学科的快速发展,新型载体材料和固定化技术不断涌现。以纳米载体材料、纳米磁性材料、金属有机骨架复合材料为代表的新型固定载体以及以定向化学修饰研究为代表的固定化技术取得了显著进展。本文重点对酶固定的纳米载体、金属有机骨架材料以及定向修饰固定技术进行了简要综述,同时对研究前景作了简要展望。; 刘茹焦成瑾焦成瑾杨玲娟; 关键词：酶固定化金属有机骨架材料

基于酶催化的氰化物污染现场快速检测初步研究: <正>氰化物（Cyanide）剧毒众所周知。广义讲分子中具有氰基（-CN）的化合物均可称为氰化物,而只有溶于水或进入生物体内能解离出-CN的氰化物才有剧毒。自由-CN之所以剧毒,是因为-CN会轻易穿过膜系统与细胞呼吸链组...; 焦成瑾赵菲佚袁毅君杨玲娟; 关键词：原核表达酶分离纯化; 文献传递

多年生香豌豆中ODAP含量的测定: 多年生香豌豆为豆科香豌豆属的攀援性草本植物,适应性强,在保持水土、生态环保、景观绿化、饲料加工等方面开发利用价值很高,尤其是其蛋白含量高,是一种值得推广的优良牧草1]。ODAP是非蛋白质脂肪族氨基酸,其紫外吸收极弱,不能...; 杨玲娟焦成瑾赵菲佚袁毅君; 关键词：ODAP 柱前衍生 RP-HPLC 香豌豆; 文献传递

柱前衍生HPLC法测定三七中的三七素被引量：7: 2015年; 采用2,4-二硝基氟苯为柱前衍生试剂,建立测定三七中三七素含量的柱前衍生反相高效液相色谱法;采用Luna-C18柱(4.6×250mm,5μm)、乙腈和HAc-Na Ac为流动相(17∶83),检测波长360nm,柱温40℃,20μL进样,在0.40μg/m L—1.2mg/m L浓度范围内,色谱峰面积与三七素含量线性关系良好,回归方程为A=123.5×103c+136.7,R=0.9987,RSD=1.5%,三七幼苗叶中三七素含量最高。该方法操作简便、快速、准确,选择性好,可用于植物、药物和食品中三七素含量的测定。; 杨玲娟高二全焦成瑾; 关键词：三七素柱前衍生 HPLC

拟南芥AtJ3与PKS5相互作用参与植物ABA响应: 2016年; 脱落酸(abscisic acid,ABA)在植物生长、发育及环境胁迫响应中有着广泛的作用。前期研究已鉴定了诸多参与植物ABA信号转导的元件。本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)蛋白激酶PKS5(SOS2-like protein kinase 5)为诱饵蛋白,使用酵母双杂交筛选到与PKS5相互作用的蛋白分子伴侣At J3(Arabidopsis thaliana Dna J homolog 3)。At J3 T-DNA突变体atj3-1与atj3-2表现出萌发期ABA表型。在外源ABA处理下,atj3-1与atj3-2种子发芽率降彽、幼苗黄化、生长矮小。atj3-1与PKS5双突变体atj3-1pks5-1、atj3-1pks5-3和atj3-1pks5-4表现出与At J3或PKS5突变体相同的ABA表型。亚细胞定位与转基因研究显示At J3与PKS5有相同的表达模式。免疫共沉淀与体外磷酸化测试确认At J3与PKS5存在相互作用并抑制PKS5激酶活性。研究结果表明:At J3与PKS5相互作用,通过抑制PKS5激酶活性共同参与植物ABA信号响应过程。; 赵菲佚焦成瑾陈荃贾贞王太术周辉; 关键词：相互作用

过表达拟南芥点突变乙酰羟酸合成酶基因改变植物对缬氨酸的抗性及增强缬氨酸合成: 2015年; 拟南芥乙酰羟酸合成酶(acetohydroxyacid synthase,AHAS)在支链氨基酸合成中具有重要的作用。为考察AHAS不同亚基关键位点突变对植物缬氨酸抗性与缬氨酸合成的影响,对AHAS大小亚基上特定位点进行体外突变,构建AHAS点突变过表达转基因植物,研究AHAS不同亚基点突变转基因植物对缬氨酸抗性及其合成的影响。研究结果表明:AHAS小亚基G88D突变解除了终端产物对该酶的反馈抑制作用,使转基因植物缬氨酸含量提高。大亚基E305D突变增强小亚基G88D突变效应,而大亚基E482D突变对G88D突变具有相反的作用。AHAS全酶E305DG88D双突变转基因植物较E482DG88D具有更强的缬氨酸抗性表型和更高的缬氨酸含量。这些结果提示AHAS大小亚基间存在着相互作用,大小亚基不同位点突变对AHAS全酶活性具有不同的影响。; 赵菲佚焦成瑾王太术田春芳谢尚强刘亚萍; 关键词：点突变转基因植物

拟南芥PKS5激酶磷酸化ABI5参与植物ABA响应被引量：3: 2015年; 植物激素脱落酸（abscisic acid,ABA）在植物生长、发育及环境胁迫中起着重要的作用。本研究发现拟南芥PKSes（SOS2-like protein kinases）蛋白激酶家族成员PKS5（SOS2-like protein kinase 5）参与植物ABA响应。PKS5功能获得性点突变体pks5-3与pks5-4表现出对ABA的敏感表型。在外源ABA处理下,pks5-3与pks5-4种子萌发率降低,幼苗生长矮小、黄化。体外磷酸化测试显示,PKS5特异磷酸化ABA响应元件ABI5（ABA-insensitive 5）N末端多肽（1~211 aa）。q RT-PCR分析表明pks5-3与pks5-4突变体中ABI5下游ABA响应基因RAB18（RESPONSIVE TO ABA18）与EM6（LATE EMBRYOGENESIS ABUNDANT 6）表达均发生改变。这些研究结果表明,拟南芥PKS5通过磷酸化ABI5的N末端参与植物ABA响应过程。; 赵菲佚焦成瑾陈荃王太术田春芳高雅梅; 关键词：磷酸化

紫花苜蓿半胱氨酸合酶基因MsSDCS-0植物GFP荧光表达载体构建与拟南芥转化: 2019年; 半胱氨酸合成酶[Cysteine Synthase, CSase,也称为O-乙酰丝氨酸裂解酶,O-acetylserine(thiol)lyase,OAS-TL]在植物有机硫合成中起着关键的作用。本研究从已有中间克隆载体pBSCMsSDCS-0上获取已克隆的紫花苜蓿半胱氨酸合成酶基因MsSDCS-0片段后,将其亚克隆于植物荧光表达载体pCAMBIA1205-GFPn上,成功构建了该基因成员的植物GFP表达载体pCAMBIA1205-GFPn-MsSDCS-0。pCAMBIA1205-GFPn-MsSDCS-0在野生型拟南芥(Col-0)原生质体瞬时表达确认MsSDCS-0定位于胞质中;此外,该载体对拟南芥Col-0转化表明:过表达该基因不会对植物的生长表型产生影响。本研究结果将为通过基因工程方式提高紫花苜蓿含硫氨基酸含量及该基因在植物体内功能后续研究提供基础。; 赵菲佚马家琦安建平焦成瑾马伟超; 关键词：紫花苜蓿半胱氨酸合成酶

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