国家自然科学基金(31171694)
- 作品数：10 被引量：36H指数：3
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- 相关机构：华中农业大学教育部武汉纺织大学更多>>
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- 辛硫磷对鲫肝微粒体CYP3A酶活性、mRNA及蛋白表达的影响被引量：1
- 2019年
- 为探究不同剂量的有机磷农药辛硫磷在24、48、72和96 h染毒后对鲫(Carassius auratus gibebio)肝微粒体中CYP3A酶活性、mRNA及蛋白表达的影响,采用半静态染毒法,设置辛硫磷空白对照组低、中、高浓度组(0.0825、0.165、0.330 mg/L),以红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性反映CYP3A酶活性,最后采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别测定CYP3A-mRNA及蛋白的表达量。结果显示:辛硫磷能抑制CYP3A的酶活性并且下调CYP3A-mRNA的表达,72 h和96 h后,各浓度组中的mRNA的表达量相较对照组降低了50%以上。辛硫磷染毒后的CYP3A蛋白的表达量在各时间段中都呈现显著的剂量效应关系,在低、中浓度组间存在时间效应关系。结果表明,辛硫磷能作为一种抑制剂降低鲫肝脏中CYP3A酶活性、mRNA及蛋白表达量,其对蛋白表达抑制的剂量效应和时间效应影响更显著。
- 李思刘晓宇
- 关键词：辛硫磷CYP3A
- 两种毒死蜱分子印迹聚合物的制备及其识别性能研究被引量：2
- 2013年
- 目的制备能特异性识别农药毒死蜱的分子印迹聚合物并研究其识别机制,用于农作物中残留农药毒死蜱的分离富集及特异识别。方法利用沉淀法制备两种毒死蜱印迹聚合物,采用光谱手段、吸附实验和Scatchard分析等研究其结合机制。结果制备的2种印迹聚合物对毒死蜱有特异吸附,以甲基丙烯酸和2-乙烯基吡啶为单体制备的MIP存在两种结合位点。结论两种单体MAA、2-VP分别与毒死蜱以1∶3和1∶2配比结合,两种聚合物均可用于样品中毒死蜱的分离富集。
- 张璐邱瑾程燕赵丽敏吴中波李梦琦刘晓宇
- 关键词：毒死蜱分子印迹
- 基于体外消化模型的食品中邻苯二甲酸酯生物有效性的测定被引量：2
- 2013年
- 目的建立固相萃取-高压液相色谱法检测体外消化模型消化液及固相残渣中邻苯二甲酸酯(PAEs)的方法.方法食品经体外消化模型处理后离心分为固液两相,分别经溶剂提取、固相萃取柱净化后采用HPLC检测两相中的PAEs含量,通过计算得到生物有效性值.结果该方法在0.1~20 mg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998,方法的回收率在70.38%~96.49%之间,相对标准偏差均低于7%.结论该方法操作简单,灵敏度和重现性好,抗干扰能力强,可用于食品中PAEs生物有效性的测定,同时为进一步进行PAEs暴露评估和健康风险评估奠定基础.
- 秦静刘晓宇刘幸朱雨田孟超戴艳徐少华
- 关键词：生物有效性固相萃取高压液相色谱法
- 基于红外图像形心优化提取的汽车夜视安全系统被引量：2
- 2015年
- 为了提高汽车夜间行驶安全性能,设计并实现了一套基于红外图像处理的夜视安全系统;使用被动式红外相机对车辆和行人进行红外成像以得到车辆前方行人和车辆的准确位置;测距必须确定对象的形心,对红外图像的灰度值进行判定区分行人和车辆,对行人使用中值空域滤波方法进行降噪,对车辆使用db4小波进行预处理,然后使用基于图像边缘的图像分割方法进行图像分割,使用最大类间方差评估确定分割结果,再进行区域提取得到形心坐标;使用小孔成像模型计算形心与本车的距离,提取本车速度、加速度参数计算理论碰撞时间,当理论碰撞时间小于时间阈值时进行声光告警,从而实现实时预警;系统使用DIR-384-P红外相机,系统算法使用PFGA实现,测试结果表明,经过标校和加固后,系统与目标存在5 m距离时,车辆测距的误差率达到2.74%,行人测距的误差率低于3.9%,具有一定的实际应用价值。
- 吴琼飞朱勇张志强
- 关键词：红外图像处理
- 高效液相色谱和液相色谱-电喷雾质谱联用法鉴定辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中代谢产物及途径被引量：5
- 2013年
- 采用差速离心法制备鲫鱼肝微粒体,选择已经建立的肝微粒体系统进行体外孵育,研究有机磷杀虫剂辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中的代谢。产物经乙酸乙酯萃取2次,取出有机相于40℃下旋转蒸发至近干,加1 mL甲醇,经高效液相色谱(HPLC)分离测定,液相色谱-电喷雾质谱联用(LC-ESI/MS)鉴定其分子结构,发现了3种代谢产物(M1:二乙基硫代磷酸;M2:四乙基二硫代焦磷酸;M3:辛氧磷),据此推断辛硫磷在鲫鱼肝微粒体(细胞色素P450酶系)的作用下进行了脱硫氧化、水解反应。从而可推断辛硫磷在鲫鱼肝微粒体中的代谢途径和代谢特点,为进一步研究其体内代谢和代谢酶奠定基础。
- 刘荣飞刘幸刘晓宇范雯婷赵冬冬石旺荣朱雨田李宏
- 关键词：辛硫磷鲫鱼肝微粒体体外代谢
- 辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性及其表达水平的影响被引量：2
- 2019年
- 【目的】研究辛硫磷暴露对鲫鱼肝微粒体中细胞色素P4501a(CYP1A)活性及其mRNA和蛋白表达的影响,明确其剂量—效应及时间—效应关系,为揭示有机磷农药对水生生物的代谢调节机制提供理论依据。【方法】设辛硫磷低、中、高浓度组(0.0825、0.165和0.33 mg/L)和丙酮(助溶剂)对照组,采用半静态染毒法染毒鲫鱼,分别于染毒24、48、72和96 h后取样并迅速剖解取出鲫鱼肝胰脏,以CYP1A相关酶7-乙氧基-3-异吩唑酮-脱乙基酶(EROD)活性反映CYP1A活性,采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别测定鲫鱼肝微粒体中CYP1A基因mRNA及其蛋白的表达情况。【结果】辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性产生抑制作用,辛硫磷染毒24 h时CYP1A活性与辛硫磷存在明显的剂量—效应关系;各辛硫磷浓度组间均存在明显的时间—效应关系,至染毒96 h时低、中、高浓度组鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性分别较对照组下降54.7%、30.4%和65.5%,且差异极显著(P<0.01,下同)。辛硫磷染毒后,鲫鱼肝微粒体中CYP1A基因mRNA的表达整体上呈明显下调趋势,各染毒时间组间均存在较强的剂量—效应关系,除染毒48 h时CYP1A基因mRNA相对表达量与辛硫磷浓度呈正相关外,其他染毒时间点均呈负相关。辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A蛋白表达的影响均达极显著水平,且呈明显的剂量—效应及时间—效应关系,至染毒96 h时低、中、高浓度组的表达量分别较对照组降低74.6%、82.6%和85.7%。【结论】辛硫磷能抑制鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性并下调CYP1A基因mRNA及其蛋白的表达;相对于辛硫磷产生的剂量—效应影响,其对CYP1A活性及其蛋白表达的时间—效应影响更明显。
- 李思刘晓宇
- 关键词：鲫鱼辛硫磷肝微粒体活性
- 重金属镉在鲫鱼鳃组织中的积累及其对P-糖蛋白基因表达的影响被引量：1
- 2019年
- 以鲫鱼(Carassius auratus)为试验材料,研究了在2.12、4.23、8.46 mg/L不同浓度镉(CdCl2·2.5H2O)的胁迫下,Cd在鲫鱼鳃组织96 h内的富集量及其对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)活性和mRNA表达的影响。结果表明,不同Cd浓度和时间处理均对鲫鱼腮内的Cd富集量、P-gp的活性变化及基因表达量有明显影响。暴露于2.12 mg/L Cd后,Cd的富集量在48 h达到最大值,之后有所降低并趋于稳定;暴露于4.23、8.46 mg/L Cd后,Cd的富集量随着处理时间的延长明显升高,呈明显的时间依赖关系。在Cd的胁迫下,鲫鱼鳃组织中P-gp的活性以及mRNA的表达显著升高(P<0.05),且在不同Cd浓度处理下,P-gp活性和mRNA的表达均在72 h达到最大。研究表明P-gp在鲫鱼自身抗Cd机制中发挥了作用,可较敏感地反映水环境中重金属Cd浓度或含量。
- 师玲刘晓宇
- 关键词：鲫鱼镉P-糖蛋白MRNA表达
- 有机磷农药多残留检测化学发光标记物的合成及鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的以O,O-二乙基硫代磷酰氯和鲁米诺为原料,合成一种新型的化学发光标记物,用于后续的二乙氧基类有机磷农药多残留化学发光免疫法检测。方法取鲁米诺和O,O-二乙基硫代磷酰氯溶于二氯甲烷中,以三乙胺作为缚酸剂,冰浴下反应8 h后分出有机层,产物经柱层析纯化,即得到化学发光标记物。结果产物经紫外、红外鉴定,实验结果表明反应产物即为所需的化学发光标记物,产物在BPCL上进行发光特性测定,表现出较强的发光能力,最大发光强度达到9000 mV。结论本方法合成的化学发光标记物具有较强的发光能力,能用于后续的二乙氧基类有机磷农药多残留的化学发光免疫检测。
- 刘涛孟超姚鑫李景娜程燕刘晓宇
- 关键词：O,O-二乙基硫代磷酰氯鲁米诺
- 基于分子印迹聚合物的微流控化学发光传感器检测莱克多巴胺被引量：4
- 2014年
- 目的：制备能特异性识别莱克多巴胺(ractopamine, RCT)的分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymers, MIPs),将该印迹聚合物与微流控化学发光法结合起来,以制备高选择性的化学发光传感器。方法利用沉淀聚合法制备莱克多巴胺印迹聚合物,采用扫描电镜、红外光谱法、吸附实验对其进行表征；以该印记聚合物为识别元件,以微流控芯片为流通反应池,并以化学发光仪作为检测器,通过流动注射分析法来检测猪肝和牛肉中的莱克多巴胺。结果在最佳条件下,测得莱克多巴胺线性范围6～960 ng/mL,线性回归方程为?I=4.8777C-9.7851, r=0.9907,检出限为0.83 ng/mL,对10 ng/mL莱克多巴胺平行测定11次,其RSD(相对标准偏差)为7.1%。应用该方法成功分析了猪肝和牛肉中RCT含量,回收率可达90.3%~99.8%。结论本方法快速、准确、样品前处理简单,能很好地用于食品中莱克多巴胺残留的检测。
- 万德慧王晓朋吴中波唐晗刘晓宇
- 关键词：莱克多巴胺分子印迹
- 化学发光生物传感器检测食品中生物胺总量被引量：14
- 2014年
- 目的：建立快速地有效检测食品中生物胺总量的分析方法。方法用固定化的二胺氧化酶制成酶柱作为生物传感器的识别元件,将微流控芯片与化学发光仪结合作为检测元件,以鲁米诺-铁氰化钾作为化学发光体系,通过流动分析法来检测食品中生物胺的总量。结果当腐胺、组胺、酪胺浓度分别在3~500、2~100、3~200μmol/L时,线性回归方程分别为Y=17.448X+408.93、Y=88.329X+997.13、Y=45.762X+1728.2,相关系数分别为0.9966、0.9937、0.9907,检出限分别为0.7、0.5、0.5μmol/L。另外,本研究对传感器的性能进行了评价。结果显示,在最佳条件下对含有腐胺、组胺、酪胺的溶液分别测定7次,其RSD均小于8%,精密度较好；以腐胺为底物,连续通入鲁米诺和铁氰化钾溶液7次, RSD=1.66%,表现出良好的稳定性；将固定化酶保存在磷酸盐缓冲液中,每10 d测定一次酶活,持续70 d。2个月内固定化二胺氧化酶酶活仅降低了15%,保存时间较长；将传感器用于检测猪肉、鲫鱼和葡萄酒中的生物胺总量,样品中三种胺的添加回收率均在90%~94%之间,回收率较高,适合检测总生物胺。结论此传感器的综合性能良好,适用于食品中生物胺总量的快速检测。
- 唐晗王晓朋吴中波万德慧刘晓宇
- 关键词：生物胺二胺氧化酶微流控芯片酶传感器化学发光
