国家自然科学基金(81200845)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 大鼠海马组织RNA、DNA和蛋白质共提取方法的研究被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨Trizol法同时提取大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA和蛋白质的可行性及优势.方法Trizol法提取成年雄性Sprague-Dawley大鼠单侧海马组织RNA、基因组DNA以及蛋白质; 商业化试剂盒提取另一侧海马组织基因组DNA,RIPA裂解液提取蛋白质.用超微量分光光度计和SYBR实时定量RT-PCR法检测Trizol法提取的RNA的质量,利用超微量分光光度计和聚合酶链式反应（PCR）法比较两种方法提取DNA的效果及质量,采用Western blot法比较两种方法提取蛋白质的效果.结果 Trizol法提取单侧海马RNA的质量浓度介于1178.3～2225.8ng/μL之间,A260/280介于2.01～2.03,A260/230介于1.88～2.22,并获得了稳定的β-actin和GR循环域值.Trizol法和试剂盒提取单侧海马DNA的质量浓度分别介于215.7～271.8ng/μL和268.6～872.5ng/μL之间,均适于充当PCR反应模板.Trizol法和RIPA裂解液提取的蛋白质在Western blot法检测目的 蛋白含量的过程中均呈现清晰的条带.结论 Trizol法提取大鼠单侧海马组织RNA的同时提取的DNA和蛋白质,与商业化试剂盒和RIPA裂解液从不同海马组织中分别提取基因组DNA和蛋白质的效果相当.采用Trizol法同时提取海马组织的RNA、DNA和蛋白质,不仅提高了实验效率、节约了实验成本,而且有效避免了因反复实验操作带来的人为干扰及误差.
- 胡丽丽赵小鸽倪磊王爱英杨娟
- 关键词：TRIZOL海马RNADNA蛋白质
