国家自然科学基金(30801539)
- 作品数：5 被引量：11H指数：1
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- 相关机构：中日友好医院华北煤炭医学院北京协和医学院更多>>
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- 大鼠ETFβ基因过表达对NADPH氧化酶基因表达的影响
- 2012年
- 目的:构建大鼠ETFβ的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达和对NADPH氧化酶的影响。方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码ETFβ的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定后测序,测序正确后用磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,使用RT-PCR方法检测空载体组和重组质粒转染组的NADPH氧化酶各亚基mRNA水平的表达变化。结果:(1)测序结果证实PCR扩增得到编码ETFβ的cDNA序列正确;(2)磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,ETFβ融合蛋白成功表达;(3)RT-PCR结果显示重组质粒转染组的NADPH氧化酶5个亚基中的NOX3,NOX4的mRNA表达降低(P<0.05),空载体组和重组质粒转染组之间比较NOX1,NOX2,NOX5的mRNA表达差异无统计学意义。结论:成功构建大鼠ETFβ的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达,并且降低了NADPH氧化酶NOX3,NOX4的mRNA表达水平。
- 古艳婷孙斯凡李平董晞王红盼赵婷婷张浩军杨靖
- 关键词：NADPH氧化酶HEK293
- 大鼠Uqcrfs1重组质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达
- 2012年
- 目的:构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK 293T细胞,使用RT-PCR、Western Blot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果:测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论:成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。
- 孙斯凡古艳婷李平王红盼董晞杨靖赵婷婷王旭
- 关键词：重组质粒糖尿病肾病
- 阿霉素肾病大鼠尿液糖胺聚糖与尿液蛋白含量的相关性
- 2010年
- 目的探讨阿霉素肾病大鼠疾病进展过程中尿液糖胺聚糖含量的变化及其与尿蛋白的关系。方法采用一次性尾静脉注射阿霉素6mg/kg制作肾病综合征大鼠模型,第1、2、3、4、6周分别收集大鼠24h尿液测定尿糖胺聚糖和尿蛋白含量。43d后结束实验取血及肾脏,检测血生化,观察肾组织病理改变。结果第2、3、4、6周与正常对照组比较,阿霉素肾病大鼠24h尿蛋白排泄量呈进行性明显上升趋势;造模43d后模型组血清白蛋白含量显著下降,总胆固醇和甘油三酯含量显著升高,肾组织病理所见,模型组肾小球系膜区见中度至重度的系膜细胞增殖及基质增生。从第3周开始阿霉素肾病大鼠尿糖胺聚糖浓度显著高于正常组,且与24h尿蛋白排泄量呈正相关关系。第6周尿糖胺聚糖浓度与血清白蛋白浓度负相关,与甘油三酯浓度正相关。结论阿霉素肾病综合征大鼠尿液中糖胺聚糖浓度升高,并与24h尿蛋白排泄、血清白蛋白、甘油三酯浓度显著相关。
- 郭景珍赵婷婷李平严美花李忻张浩军董晞万方李鸿
- 关键词：阿霉素尿蛋白糖胺聚糖
- 糖肾方对自发性2型糖尿病模型大鼠脂代谢及肝脏脂变的影响被引量：10
- 2010年
- 目的:观察糖肾方对自发性2型糖尿病模型(OLETF)大鼠脂代谢及肝脏脂变的作用,探讨相关的作用机制。方法:45只雄性OLETF大鼠随机分成OLETF组、糖肾方组(1.60g/kg)和蒙诺组(0.833mg/kg)。18只LETO大鼠作为正常组。各实验组从动物12周龄起开始给药。分别在36周龄和56周龄取材,检测血脂水平,观察肝组织病理组织学变化并进行半定量分析,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析SREBP-1及G6PDmRNA在肝组织中的表达。结果:糖肾方能显著降低OLETF组大鼠总胆固醇(TC)水平(P<0.01),减轻肝脂病变,显著改善肝脏组织大、小空泡的发生面积(P<0.05);抑制SREBP-1mRNA在肝脏中的表达(P<0.05);上调G6PDmRNA在肝脏中的表达(P<0.001)。结论:糖肾方可以改善OLETF大鼠的血脂水平异常及肝脂变,其可能的机制是通过降低SREBP-1和增加G6PDmRNA在肝脏的表达,减少脂肪在肝脏中的淤积及降低TG的合成。
- 董晞张浩军赵世萍李治国路晓光郭景珍赵婷婷王泰龄李平
- 关键词：糖肾方2型糖尿病
- 基底膜蛋白多糖在糖尿病肾病中的研究进展被引量：1
- 2009年
- 蛋白多糖（proteoglycan,PG）是广泛存在于细胞外的一种蛋白构象,它们在整个机体中发挥多种功能。基底膜蛋白多糖（perlecan）作为硫酸肝素蛋白多糖（heparan sulfate proteoglycan．HSPG）家族的一员与糖尿病多种并发症密切相关。在患者和糖尿病动物模型的肾脏和其他组织器官中基底膜蛋白多糖水平都有所下降。基底膜蛋白多糖在维持肾小球滤过屏障中起着重要的作用，在糖尿病蛋白尿进展过程中肾小球基底膜蛋白多糖水平下降是一个主要影响因素。鉴于肾脏病对糖尿病患者的高危害性，对基底膜蛋白多糖的大量研究是在糖尿病模型的肾脏不同类型细胞中展开。
- 赵婷婷李平郭景珍沙洪董晞
- 关键词：糖尿病肾病
