国家自然科学基金(81070661)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：曾龙驿穆攀伟江玮李晓峰鲁红云更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人皮下、网膜脂肪组织来源前脂肪细胞的原代培养及甘精胰岛素对其增殖、分化的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨人皮下、网膜脂肪组织来源的前脂肪细胞形态、功能的差异，观察不同浓度甘精胰岛素对其增殖、分化的影响。方法胶原酶分离法原代培养人皮下、网膜前脂肪细胞，倒置显微镜下观察不同来源的人前脂肪细胞在形态方面的差异，不同浓度甘精胰岛素（20、200、500、100（3、1500nmol／L）干预其增殖及分化过程，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测二者增殖的差异，实时定量PCR检测脂肪分化相关基因表达的差异。结果（1）可从人皮下、网膜脂肪组织分离出前脂肪细胞，并在体外扩增，皮下前脂肪细胞更细长，容易增殖，而网膜前脂肪细胞呈多角形，易于老化。（2）MTT法结果显示甘精胰岛素抑制网膜前脂肪细胞的体外增殖，且其抑制作用具有剂量依赖性，1000nmol／L干预72h后，与未加胰岛素组相比，网膜前脂肪细胞的增殖明显低[吸光度（A）值：0．144±0．021比0．267±0．040，P〈0．01]；皮下前脂肪细胞作用不明显（A值：0．305±0．045比0．350±0．037，P〉0．05）。（3）500nmol／L的胰岛素浓度是人前脂肪细胞分化的适宜浓度，PCR结果显示该浓度时，对于皮下前脂肪细胞，脂肪分化的标志基因过氧化物酶增殖物激活受体（PPAR）γ（F=31．31，P〈0．01）和CCAAT／增强子结合蛋白0l（C／EBP（x）mRNA表达最高（F=9．86，P〈0．05），前脂肪细胞的标志基因Pref-1表达最低（皮下F=68．95，P〈0．01；网膜F=30．38，P〈0．01），但是胰岛素浓度对网膜脂肪细胞PPARγ、C／EBPαmRNA影响不大（均P〉0．05）。结论甘精胰岛素可抑制人网膜前脂肪细胞的增殖，促进皮下、网膜前脂肪细胞的分化。
- 鲁红云李晓峰穆攀伟江玮曾龙驿
- 关键词：细胞培养技术细胞分化前脂肪细胞甘精胰岛素
- 甘精胰岛素对体外培养的人脂肪细胞脂肪因子分泌及脂质合成与分解的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨甘精胰岛素对体外培养的人脂肪细胞脂肪因子分泌及脂质合成与分解的影响.方法 原代培养人皮下前脂肪细胞,采用不同浓度的甘精胰岛素（20、200、500、1 000、1 500nmol/L）干预其分化过程,酶联免疫吸附法检测分化过程中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、瘦素、脂联素、视黄醇结合蛋白4（RBP4）的分泌情况,比色法检测细胞内甘油三酯（TG）合成及培养基中甘油的释放量,实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测脂肪分化标志基因：过氧化物酶体增殖物活化受体γ（PPAR-γ）、CCAAT促进结合蛋白α（C/EBPα）以及脂联素、RBP4、脂质代谢基因脂肪细胞脂肪酸结合蛋白（aP2）、激素敏感性酯酶（LPL）转录情况.组内比较采用配对t检验,组间比较采用.结果（1）人脂肪组织可分离出前脂肪细胞,并诱导分化为成熟的脂肪细胞,随着细胞的分化成熟,TNF-α、瘦素、脂联素、RBP4的分泌逐渐增加.（2）随着细胞的分化,细胞内TG含量逐渐增加,分化第15天时达峰值[（12.16±0.19）比（0.02 ±0.00） mmol·L-1·g-1,t=11.20,P＜0.001]；培养基中甘油含量与甘精胰岛素浓度呈正相关,1 500比500nmol/L组增高[21 d：（961±15）比（611±10） μmol/L,t =3.70,P＜0.01],与分化时间无关.（3）RT-PCR结果：PPAR-γ、C/EBPα、脂联素、RBP4、aP2、LPL基因转录水平随着分化时间的延长逐渐增加,在第15 ～21天达峰值,与分化前比较,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.结论 甘精胰岛素可诱导体外培养的人前脂肪细胞的分化,促进多种脂肪细胞因子的分泌,中低浓度促进脂质合成,高浓度可诱导脂质分解.
- 鲁红云李晓峰穆攀伟江玮曾龙驿
- 关键词：脂细胞甘精胰岛素
- Caveolin-1在甘精胰岛素改善2型糖尿病小鼠糖代谢及骨骼肌炎症中的作用被引量：4
- 2017年
- 目的:观察Caveolin-1下调的2型糖尿病小鼠接受甘精胰岛素治疗后糖代谢及骨骼肌炎症的改善情况。方法:C57BL/6J小鼠随机分为2组:对照组(NC组)和2型糖尿病模型组(T组)。T组采用高脂高糖饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射方法成模。T组根据胰岛素治疗及尾静脉接受病毒注射情况再分为4组:无干预组(T2DM组),接受胰岛素治疗组(insulin组),注射sh RNA沉默Caveolin-1表达并胰岛素治疗组(LV-sh RNACav1组),注射阴性病毒并胰岛素治疗组(LV-GFP),治疗组均皮下注射甘精胰岛素3周,记录小鼠随机血糖及胰岛素剂量,取小鼠骨骼肌用Western blot检测Caveolin-1及TNF-α的表达。结果:与insulin组及LV-GFP组小鼠相比,LV-sh RNACav1组小鼠控制血糖需要的甘精胰岛素量最大(P<0.05),骨骼肌中炎症因子TNF-α表达量最多(P<0.05)。结论:Caveolin-1与机体胰岛素敏感性相关,并可能参与了胰岛素对骨骼肌炎症的改善作用。
- 彭航娅李海成林硕曾文林楚文林可意曾龙驿
- 关键词：CAVEOLIN-1骨骼肌2型糖尿病TNF-Α甘精胰岛素
