上海市卫生局科研基金(044044)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：崔磊石润杰孙明华柴岗王珮华更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院上海市组织工程研究与开发中心更多>>
- 发文基金：上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨髓基质干细胞体外诱导和鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的建立人自体骨髓基质干细胞(human menchymal stem cells,hMSCs)体外分离、鉴定体系,建立经诱导表达成骨、软骨、脂肪细胞表型的体外培养体系,探讨作为骨组织工程种子细胞的可能性,为组织工程技术应用打下基础。方法抽取患者骨髓5ml,以密度梯度法分离hMSCs,使用流式细胞仪鉴定细胞表型;应用免疫组化和分子生物学技术,对hMSCs进行成骨、软骨、脂肪细胞的诱导培养和表型鉴定。结果第2代hMSCs阳性细胞表达率CD105(78±6)%,CD166(43±7)%,CD29(69±12)%;hMSCs成骨诱导培养第3代平均扩增(163.4±13.4)倍,形成钙结节,骨细胞转录因子、骨钙素、骨桥蛋白和I型胶原免疫荧光阳性,RT-PCR证实有I型胶原、骨钙素、骨桥蛋白和骨结合素mRNA表达,对照组阴性;成软骨细胞诱导培养后II型胶原、SOX9(SRY-type HMGbox9,是在哺乳动物性别决定和软骨生成中起着关键调控作用的一个基因)。免疫荧光阳性,RT-PCR证实II型胶原、软骨聚集蛋白聚糖mRNA表达,对照组阴性;成脂肪细胞诱导培养后,油红-O染色阳性,RT-PCR证实PPAR2 mRNA的表达,对照组阴性。结论通过密度梯度法可获得较高纯度hMSCs,经体外培养能保持多项分化潜能,体外诱导培养第3代仍可表达各种细胞表型,能够满足骨组织工程临床应用对种子细胞质和量的需要。
- 石润杰柴岗崔磊
- 关键词：细胞培养成骨细胞软骨细胞脂细胞
- 自体骨髓基质干细胞构建下鼻甲被引量：3
- 2009年
- 目的探讨采用经体外成骨诱导的人骨髓基质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)为种子细胞,部分脱钙骨(partly demineralized bone matrix,pDBM)为支架材料,构建组织工程化骨,重建下鼻甲,治疗萎缩性鼻炎与空鼻综合征的可行性和有效性。方法该研究经上海交通大学医学院附属第九人民医院伦理委员会审批通过,12例患者(年龄23～55岁,平均35.3岁;5例萎缩性鼻炎,7例空鼻综合征)签署知情同意书后入选本实验。自髂前上棘穿刺抽取骨髓,体外分离获得hMSCs,经体外成骨诱导和扩增至第3代,复合pDBM体外培养1周构建组织工程化骨,植入患者下鼻甲内或相当于下鼻甲部位以构建下鼻甲。术后不同时期分别行临床和CT检查随访,同时测量10侧鼻腔之正常下鼻甲CT值作为对照。结果10例患者完成该研究,构建下鼻甲成功率为90%(9/10例);随访1～6年,9例成功构建下鼻甲的萎缩性鼻炎患者治疗有效率为100%(9/9例)。CT显示构建下鼻甲与正常下鼻甲形态相似,构建下鼻甲骨CT灰度值1～12个月稳定在350～390之间,与正常下鼻甲骨CT灰度值(389.4)无显著差异(P>0.05)。结论采用hMSCs和pDBM自体内构建下鼻甲骨,治疗效果稳定,组织工程技术可作为目前治疗萎缩性鼻炎的一种新选择,值得进一步深入研究。
- 石润杰吴晴伟赵影颖王珮华孙明华崔磊
- 关键词：萎缩性骨髓祖代细胞细胞移植脱钙骨
