重庆市自然科学基金(CSTC2009BB5066)
- 作品数：11 被引量：38H指数：4
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- Chromofungin抑制TNF—α诱导血管内皮通透性增加的钙信号机制被引量：1
- 2015年
- 目的探讨嗜铬粒蛋白A（chromogranin A，CGA）衍生多肽Chromofungin（CHR）对肿瘤坏死因子-α（TNF—α）诱导血管内皮细胞钙内流的影响。方法以人脐静脉内皮细胞系EA．hy926细胞为研究对象，建立TNF—α刺激炎症模型，实验分为对照组、TNF—α组、10nmo/LCHR＋TNF—α组、100nmol/LCHR＋TNF-α组和1000nmol/L CHR＋TNF—α组。Transwell小室法检测EA．hy926细胞通透性，激光共聚焦法检测EA．hy926细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]1）的变化。结果与对照组比较，TNF-α组明显增加EA．hy926细胞通透性[（1．189±0．086）vs．（1．771±0．195），t=4．343，P=0．01]；10nmol/L、100nmol/L和1000nmoL／LCHR抑制TNF-α诱导的EA．hy926细胞通透性增加，其中10nmol/L和100nmol/L CHR显著降低TNF-α诱导的EA．hy926细胞高通透性[（1．771±0．195）vs．（1．315±0．134），t=3．403，P=0．042；（1．771±0．195）vs．（1．236±0．181），t=3．985，P=0．017]，1000nmol/LCHR降低TNF-α诱导的EA．hy926细胞高通透性，差异无统计学意义[（1．771±0．195）vs．（1．411±0．255），t=2．679，P=0．126]。10nmol/L、100nmol/L和1000nmol/LCHR作用于EA．hy926细胞时细胞内Ca2＋浓度无明显变化。TNF-仪诱导EA．hy926细胞外Ca2＋快速内流，各时间点细胞内Ca2＋荧光强度F140、F1100与起始荧光值F1100比较，差异具有统计学意义[荧光强度分别为：（41．497±3．788）vs．（56．193±3．082），F=196．129，P=0．000；（41．497±3．788）vs．（53．457±4．536），F=101．19，P=0．000]，10nmol／L、100nmol/L和1000nmol/LCHR能够抑制TNF-仪引起的Ca2＋快速内流。结论CHR抑制TNF-α诱导的EA．hy926细胞通透性增加，这一作用可能是通过阻止TNF-α诱导的细胞外Ca2＋内流来实现的。
- 罗丽张丹古妮娜魏伏陈晓迎姜丽萍蔡国强刘景仑
- 关键词：血管内皮细胞钙嗜铬粒蛋白A肿瘤坏死因子-Α
- 微循环监测技术的研究进展被引量：4
- 2015年
- 正常的血流灌注是保证人体生理功能的一个必要条件。活体微循环的监测对于了解脏器功能、诊治疾病、研究疾病机制和药物治疗效果有重要的作用。该文就几种活体微循环监测技术,如正交偏振光谱技术、侧流暗视野成像技术、激光多普勒成像技术、近红外线光谱成像技术、脉搏血氧测定监测技术等近年来的主要研究进展予以综述。
- 古妮娜张丹
- CGA 衍生多肽 CHR 抑制 TNF -α引起的血管内皮细胞高通透性的研究被引量：3
- 2014年
- 目的：观察嗜铬粒蛋白 A （ chromogranin A ， CGA ）的衍生多肽 CGA47-66（chromogranin， CHR）对TNF-α引起血管内皮细胞（EA．hy926）高通透性的影响和初步机制。方法分别用 CHR、TNF -α作用人血管内皮细胞系 EA．hy926，应用 Transwell 小室法、PCR、Western-blot检测单层内皮细胞通透性的改变，血管内皮钙黏蛋白VE-cadherin mRNA和蛋白的表达，以及磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶（ p38 mitogen activated protien kinase ， p38 MAPK）和总p38 MAPK等渗透性相关蛋白的表达。结果与空白对照组比较，TNF-α组EA．hy926细胞的通透性显著增高（2．479±0．117比1．769±0．554，t＝3．543，P＝0．008），VE-cadherin mRNA的表达显著降低（1．145±0．035比1．593±0．161， t＝-4．707， P＝0．035），而CHR （1 nM、10 nM、100 nM）组中EA．hy926细胞的VE-cadherin mRNA的表达较空白对照组有显著增加（1．512±0．04、1.615±0．170、1．918±0．355比1．162±0．189，P＜0．05），同时CHR（1 nM、10 nM、100 nM、1000 nM）能够缓解TNF-α组引起的高渗透性改变（1．954±0．379、1．835±0．090、1．430±0．349、1.559±0．447比2．479±0．117，P＜0．05）和 VE -cadherin mRNA 的低表达（1．541±0．149、1．529±0．098、2．087±0．437、1．640±0．160比1．145±0．035，P＜0．05），并且在1～100 nM范围内，上述作用呈剂量依赖性；Western-blot检测到TNF-α组EA．hy926细胞的VE-cadherin蛋白表达明显低于空白对照组，磷酸化p38 MAPK蛋白表达明显高于空白对照组；TNF-α组＋CHR组与TNF-α组相比，TNF-α组＋CHR组中VE -cadherin 蛋白的表达明显增加，磷酸化p38 MAPK蛋白明显降低。结论 CGA衍生多肽CHR能改善TNF-α引起的血管内皮细胞高通透性，这一作用在一定剂量范围内呈剂量依赖性，并且可能与p38 MAPK信号通路相关。
- 古妮娜张丹罗丽陈晓迎谢明刘景仑姜丽萍
- 关键词：CHROMOGRANINTNF-Α
- 脓毒症中脂质炎症介质血小板活化因子研究进展被引量：2
- 2011年
- 脓毒症是由感染引起的全身炎症反应综合征，具有高发病率和高死亡率的特点。实验证实细胞因子、化学因子、氧自由基和脂质介质作为致炎因子启动并参与了脓毒症并引起相应的病理生理后果，
- 刘景仑张丹任国胜
- 关键词：血小板活化因子脓毒症全身炎症反应综合征高死亡率高发病率化学因子
- 乌司他丁通过Rho／ROCK信号通路改善脂多糖诱导脓毒症小鼠肺损伤的研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨乌司他丁（UTI）对脂多糖（LPS）诱导脓毒症小鼠肺损伤的保护作用及其分子机制。方法将C57BL／6小鼠随机分为对照组（Con组，n=10）、模型组（LPS组，n=10）及UTI干预组（L＋U组，n=30），建立LPS脓毒症小鼠模型。采用肺湿干质量（W／D）法及伊文思蓝（EvansBlue，EB）法观察各组小鼠肺组织含水量及肺微血管通透性的变化，HE染色法检测各组小鼠肺组织病理变化，免疫组化法检测肺组织血管钙黏蛋白（VE-cadherin）及ROCK2的表达。结果与Con组比较，LPS组小鼠肺组织W／D及EB含量均明显增加（均P〈0．05），而L＋U组W／D及EB含量明显降低，其中UTI在10^4U／kg、10^5U／kg剂量时，与LPS组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）；LPS组小鼠较Con组肺组织损伤严重，L＋U组肺组织损伤明显减轻；免疫组化结果显示，LPS组小鼠肺组织VE—cadherin表达明显降低，ROCK2表达明显增高（均P〈0．05），而UTI干预后，VE—cadherin表达明显增加，ROCK表达明显下降（均P〈0．05）。结论UTI能够剂量依赖性地降低LPS所致的肺毛细血管通透性增加，从而改善脓毒症小鼠肺损伤，这一作用可能与UTI抑制Rho／ROCK信号通路的激活有关。
- 魏伏张丹曾燕许珊罗丽
- 关键词：肺损伤RHO/ROCK信号通路
- 嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR抑制LPS诱导的永生化脑微血管内皮细胞高通透性被引量：1
- 2018年
- 目的探讨嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR(chromofungin)对LPS所诱导的永生化人脑微血管内皮细胞高通透性的影响。方法分别用LPS、CHR、CGA4-16作用于人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC),用CCK8法检测不同浓度LPS刺激HBMEC细胞活力变化;EVOM法及Transwell小室法检测内皮细胞相对通透性;Western blot及RT-PCR法检测紧密连接蛋白(ZO-1和Claudin-5)的表达情况。结果与空白组相比,随着LPS浓度增加,HBMEC细胞的活性受到显著抑制(P<0.05)。随着LPS作用时间延长,其细胞内紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5的表达逐渐下调,6 h后蛋白表达量降到最低(P<0.05),12 h和24 h后其蛋白表达与6 h相比无明显差异。LPS作用下HBMEC单层细胞电阻值明显降低(t=-18.214,P<0.001),细胞通透性显著升高(t=6.083,P=0.004),ZO-1、Claudin-5的蛋白和mRNA表达明显下调(P<0.05),而CHR可显著改善上述变化。结论嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR能通过上调紧密连接相关蛋白的表达从而改善LPS所致的脑微血管内皮细胞高通透性。
- 刘思佚曾燕刘疏柯魏伏许珊张丹
- 关键词：人脑微血管内皮细胞高通透性
- 入院时血清嗜铬粒蛋白A浓度和ICU患者病情严重程度的相关性研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨重症患者入院时血清嗜铬粒蛋白A(Chromogranin A,CGA)浓度与危重病评分以及预后之间的关系。方法 105例连续收入ICU的患者被分为非全身炎症反应(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)、SIRS和脓毒症组(包括脓毒症、严重脓毒症和脓毒性休克3个亚组),健康志愿者(n=18)为对照组。比较患者入院时血清CGA、降钙素原(procalcitonin,PCT)、急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)和序贯器官衰竭(SOFA)评分。结果 SIRS组、脓毒症各亚组患者入院时血清CGA浓度比健康对照组和非SIRS组明显增高(P<0.05)。CGA浓度与PCT、WBC、血肌酐、APACHEⅡ和SOFA都成正相关(r=0.759、0.570、0.507、0.576、0.718,P<0.05)。ROC分析显示CGA、APACHEⅡ与PCT评分可作为28 d死亡的预测指标(曲线下面积分别为0.818、0.789和0.685)。以血清CGA浓度为139μg/L为截分值,Kaplan-Meier分析提示CGA增高患者死亡率明显高于对照组(P<0.01)。结论重症患者入院的血清CGA浓度和病情严重程度呈正相关,血清CGA浓度超过139μg/L的患者死亡率明显增高,CGA是预测ICU患者死亡风险的独立指标。
- 谢明陈晓迎刘景仑古妮娜张丹任国胜
- 关键词：嗜铬粒蛋白A重症监护患者危重病评分
- 嗜铬粒蛋白A衍生多肽CGA47-66抑制脓毒症小鼠血脑屏障通透性增加被引量：9
- 2016年
- 目的探讨嗜铬粒蛋白A（CGA）衍生多肽CGA47-66（CHR）对脓毒症小鼠血脑屏障通透性的影响。方法健康雄性C57BL／6小鼠120只，按随机数字表法分组，每组12只。72只用于观察脂多糖（LPS）诱导小鼠脑组织含水量和脑组织伊文思蓝（EB）含量的动态变化。另48只分为生理盐水对照组（NS组）、LPS诱导脓毒症模型组（LPS组）、低剂量CHR预处理组（CL＋LPS组）及高剂量CHR预处理组（CH＋LPS组）o腹腔注射10mg／kg、LPS0．1mL制备脓毒症小鼠模型；NS组注射等量生理盐水；CL＋LPS组和cH＋LPs组于注射LPS前10min分别腹腔注射CHR15．5ug／kg和77．5ug／kg。6h后经尾静脉注射2％EB4mL／kg，检测脑组织含水量和EB含量；采用荧光示踪法定性观察血脑屏障通透性变化；苏木素一伊红（HE）染色后观察脑组织病理学改变。结果注射LPS后随着时间的延长，脑组织含水量和EB含量均逐渐增加，脑组织含水量与对照组出现统计学差异的时间早于EB含量变化的时间（分别为3h和6h）。LPS组脑组织含水量及EB含量均较NS组明显升高[脑组织含水量：（79．77±0．62）％比（78．28±0．44）％，P〈0．01；EB含量（ug／g）：13．87±4．50比7．13±1．76，P〈0．05]；而两个CHR预处理组均可逆转LPS诱导的脑组织含水量和EB含量增高，以CH＋LPS组效果更加明显[脑组织含水量：（78．15±0．73）％比（79．77±0．62）％，EB（ug／g）：7．09±2．59比13．87±4．50，均P〈0．05]。EB荧光观察结果显示，NS组荧光信号仅存在于脑膜；LPS组脑实质中可见EB荧光广泛分布，说明EB渗漏较NS组明显；两个CHR预处理组脑实质中EB荧光减少，说明EB渗漏明显减少，且以高剂量组改善更为明显。HE染色显示，NS组脑血管结构清晰，周围间隙未见明显增大；LPS组脑组织结构疏松，小血管周围间隙明显增宽，水肿明显；两个CHR预处理组脑水肿较LPS
- 曾燕张丹姜丽萍魏伏许珊
- 关键词：脓毒症嗜铬粒蛋白A血脑屏障
- 脓毒症患者中横纹肌溶解综合征与预后关系的研究被引量：4
- 2017年
- 目的探讨脓毒症患者中横纹肌溶解综合征(RM)与病情严重程度及预后的关系。方法采用前瞻性研究方法,入选2014年10月~2015年9月重庆医科大学附属第一医院中心ICU连续收治的脓毒症患者151例作为研究对象。检测入ICU当天的血清肌酸激酶(CK),以CK≥1000U/L作为RM的诊断标准,比较发生RM的患者与未发生RM患者的感染标志物、危重症评分、器官功能障碍和28天病死率等。结果 151例脓毒症患者中37例(24.5%)发生RM。RM组的PCT水平、APACHEⅡ评分和SOFA评分较非RM组高(P<0.05)。RM组ICU期间肝脏功能障碍、循环障碍、肾脏功能障碍的发生率、人均器官障碍数、血肌酐峰值水平、接受连续肾脏替代治疗(CRRT)患者的比例和28天病死率较非RM组高(P<0.05),而呼吸功能障碍、凝血功能障碍和神经系统障碍的发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CK对预测脓毒症患者28天死亡风险具有统计学意义,ROC曲线下面积(AUC)为0.694(P<0.05),低于APACHEⅡ评分(0.841)和SOFA评分(0.805)(P<0.05)。结论脓毒症患者中RM的发生率高,发生RM的患者的病情更危重,其ICU期间肝脏功能障碍、循环障碍、肾脏功能障碍的发生率和28天病死率均显著增加,CK可以作为预测脓毒症患者28天病死率的参考指标。
- 龚雪张丹李鹏飞曾燕魏伏许珊董瑞安
- 关键词：横纹肌溶解综合征脓毒症肌酸激酶预后器官功能障碍
- 乌司他丁抑制TNF—α诱导血管内皮细胞高通透性的研究被引量：6
- 2016年
- 目的探讨乌司他丁（UTI）对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的血管内皮细胞高通透性的影响。方法建立人脐静脉内皮细胞系EA．hy926细胞TNF-α诱导炎症模型，将其分为正常组、TNF-α组、uTI组及TNF-α＋不同浓度的UTI组（T＋U组），分别采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测EA．hy926细胞活性，EVOM法测单层细胞电阻。RT-PCR法、免疫细胞化学法检测血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）的表达。结果与正常组相比，TNF-α作用下EA．hy926单层细胞电阻值明显降低（67．200±8．937vs33．600±8．771，P=0．010），通透性增加，UTI在1-100U／mL范围内以剂量依赖性方式改善TNF-α所致的EA．hy926细胞高通透性（40．133±7．484vs33．600±8．771，P=0．382；49．232±3．162vs．33．600±8．771，P=0．044；63．700±8．515vs．33．600±8．771，P=0．013）。TNF-α作用下EA．hy926细胞VE-cadherinmRNA的表达较正常组显著降低（1．089±0．018vs0．835±0．021，P=0．000），UTI可抑制TNF-α引起的VE-cadherin低表达，其中UTI浓度为10U／mL和100U／mL时VE-cadherin mRNA的表达较TNF-α．组差异具有统计学意义（0．976±0．014vs．0．835±0．021，P=0．001；1．115±0．015vs．0．835±0．021，P=0．000），UTI的上述作用在1-100U／mL浓度范围内呈现出剂量依赖性。免疫细胞化学结果显示，与正常组相比，TNF-α作用下VE-cadherin的表达明显降低（0．061±0．013vs0．093±0．014，P=0．049），而UTI可改善TNF-α导致的VE-cadherin表达降低（0．032±0．004vs．0．061±0．013，P=0．016）。结论UTI可抑制TNF-α引起的EA．hy926细胞通透性增加，且在一定范围内呈现出剂量依赖性。
- 魏伏张丹罗丽古妮娜曾燕陈晓迎刘景仑
- 关键词：高通透性乌司他丁血管内皮钙黏蛋白
