国家重点实验室开放基金(SKLPBS1112)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：黄新祥倪斌周冬生张义全杨瑞馥更多>>
- 相关机构：军事医学科学院江苏大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 鼠疫菌OxyR调控子蛋白对dps的转录调控机制被引量：1
- 2013年
- 【目的】利用分子生物学实验研究鼠疫菌调控子OxyR对dps的转录调控机制。【方法】提取鼠疫菌野生株(WT)和oxyR突变株(ΔoxyR)的总RNA,采用引物延伸实验研究dps的转录起始位点,并根据产物的丰度判断OxyR对dps的调控关系。进一步采用实时定量RT-PCR的方法验证OxyR对dps的调控关系。PCR扩增dps的整个启动子区DNA序列,并纯化His-OxyR蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证OxyR对dps启动子区是否具有直接的相互作用。利用大肠杆菌OxyR识别基序,预测鼠疫菌OxyR对dps启动子区的结合位点,从而得出鼠疫菌OxyR对dps的转录调控机制。【结果】鼠疫菌dps有一个转录起始位点G(-40)(翻译起始位点为+1),其转录表达受OxyR的激活;体外实验及生物信息学预测结果表明OxyR能结合到dps启动子区-111到-78之间的碱基上。【结论】OxyR能直接结合到dps启动子区而激活其转录表达。
- 倪斌张义全黄新祥杨瑞馥周冬生
- 关键词：鼠疫菌OXYRDPS转录调控
- 鼠疫菌OxyR调控子蛋白对rovA基因的转录调控研究
- 2013年
- 应用分子生物学技术,开展鼠疫菌调控子蛋白OxyR对rovAR的转录调控机制研究。提取鼠疫菌野生株(WT)和oxyR突变株(ΔoxyR)的总RNA,采用引物延伸试验研究rovAR的转录起始位点,并根据产物的丰度判断OxyR对rovAR的调控关系。构建克隆有rovAR上游启动子区的lacZ重组质粒,将重组质粒转入WT和ΔoxyR中,通过测定β-半乳糖苷酶活性来比较2株重组菌中的rovAR启动子活性,进一步验证OxyR对rovAR的调控关系。进而利用大肠埃希菌OxyR识别基序,预测OxyR对rovAR启动子区的结合位点。发现rovAR的2个转录起始位点均受OxyR的激活,且rovAR启动子区具有可能的OxyR结合位点。推测OxyR能直接结合到rovAR启动子区而激活其转录表达。
- 倪斌刘磊黄新祥韩延平
- 关键词：鼠疫耶尔森菌OXYR转录调控
- 鼠疫菌OxyR蛋白对katY的转录调控机制
- 2013年
- 目的利用分子生物学实验研究OxyR对katY的转录调控机制。方法 PCR扩增katY的整个启动子区DNA序列全长,并纯化鼠疫菌His-OxyR蛋白,通过体外的凝胶阻滞实验(EMSA)和DNase I足迹实验研究OxyR对katY启动子区的结合位点;提取鼠疫菌野生株(WT)和oxyR突变株(ΔoxyR)的总RNA,采用引物延伸实验研究katY的转录起始位点,并根据产物的丰度判断OxyR对katY的调控关系;进一步采用实时定量RT-PCR的方法验证OxyR对katY的调控关系。结果体外实验结果表明OxyR能结合到katY启动子区-101到-48之间的碱基上;鼠疫菌katY有一个转录起始位点G(-26)(翻译起始位点为+1),其转录表达受OxyR的激活。结论 OxyR能直接结合到katY启动子区而激活其转录表达。
- 倪斌张义全黄新祥杨瑞馥周冬生
- 关键词：鼠疫耶尔森氏菌OXYR转录调控
