国家自然科学基金(30671176)
- 作品数：14 被引量：141H指数：8
- 相关作者：陈长兰铁梅贲松彬李华为黄子琪更多>>
- 相关机构：辽宁大学沈阳师范大学沈阳农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高校重点实验室项目国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程生物学医药卫生更多>>
- 蛹虫草菌丝体发酵培养过程中氨基酸添加技术研究被引量：7
- 2010年
- 组氨酸、精氨酸、赖氨酸是对蛹虫草生长影响较大的3种碱性氨基酸,本实验研究在蛹虫草液体发酵过程中添加上述氨基酸的不同条件对蛹虫草菌丝体生物量和其中主要抗癌功能成分虫草素的影响。首先进行添加氨基酸种类、氨基酸的添加量、初始pH值、培养温度对蛹虫草菌丝体生物量和虫草素含量的单因素试验,在此基础上进行四因素三水平的正交试验。结果表明:对蛹虫草菌丝体生物量影响从大到小的顺序依次是:氨基酸种类>培养温度>初始pH值>氨基酸添加量。增加蛹虫草菌丝体生物量的最佳培养条件为:添加氨基酸种类为精氨酸,培养温度为26℃,培养初始pH值为6,100mLPDA发酵培养液添加精氨酸0.3g。对蛹虫草菌丝体中虫草素含量影响从大到小的顺序依次是:氨基酸种类>初始pH值>培养温度>氨基酸添加量。增加菌丝体中虫草素含量的最佳培养条件是添加氨基酸种类为精氨酸,培养温度为24℃,100mLPDA发酵培养液添加0.3g,培养的初始pH值为6。
- 贲松彬李惠娇黄子琪桑育黎孟程程侯潇牟藤陈长兰
- 关键词：蛹虫草虫草素氨基酸
- 三种果蝇cg10091、cg15745和GstD21的细胞定位研究
- 果蝇蛋白质的细胞定位对于阐明其分子功能具有重要意义。通过RT-PCR获得了果蝇内质网应激蛋白Cg10091、cg15745和GstD21的cDNA片段,将其插入到pAcPA-GFP质粒上构建了绿色荧光蛋白GFP与上述蛋白...
- 牟藤王秋月夏骊夏久智邓秀君贲松彬陈长兰
- 关键词：果蝇细胞定位
- 文献传递
- 富硒食用菌硒蛋白清除氧自由基作用研究被引量：8
- 2014年
- 研究富硒食用菌硒蛋白对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除和抑制作用,为富硒食用菌的开发利用提供依据。利用Fenton体系产生·OH,邻苯三酚自氧化体系产生O2-·。以缓冲溶液为提取剂从富硒食用菌中提取硒蛋白,ICP-MS法和考马斯亮蓝染色法测定硒蛋白含量。结果表明,随着硒蛋白浓度的增大,对羟自由基的清除率随之增加,空白蛋白和无机硒对·OH的清除率之和小于富硒食用菌蛋白对·OH的清除率,且存在极显著差异。无机硒、普通食用菌蛋白和硒蛋白对超氧阴离子(O2-·)均有清除作用,随着体积的增加,三者对O2-·的清除率呈上升趋势,在不同浓度下,富硒食用菌蛋白对O2-·的清除率均高于普通食用菌蛋白以及无机硒。硒与食用菌蛋白之间在清除自由基方面存在协同作用。硒蛋白对O2-·有一定的清除和抑制作用。硒蛋白对·OH的清除效果好于对O2-·的清除效果。
- 杨奇郭阳徐锐谷学军张莹铁梅
- 关键词：硒蛋白羟自由基超氧阴离子
- 不同种类氨基酸对蛹虫草菌丝体生长和虫草素含量的影响被引量：12
- 2012年
- 在蛹虫草液体摇瓶培养过程中分别添加20种不同的氨基酸,添加量为0.2g/100mL,以研究其对蛹虫草菌丝体生长和虫草素含量的影响。结果表明:在20种氨基酸中,16种氨基酸能显著促进蛹虫草菌丝体的生长。其中列前5位的依次为3种碱性氨基酸:精氨酸、赖氨酸和组氨酸,两种酸性氨基酸:谷氨酸和天冬氨酸。这5种氨基酸分别使菌丝体生长量增加了1.10、0.82、0.63、0.48、0.40倍。且每一种氨基酸添加后都能使菌丝体中虫草素含量显著增加。其中两种碱性氨基酸中的精氨酸和组氨酸添加后菌丝体中的虫草素含量分别增加了1.91和1.90倍,极性氨基酸中的苏氨酸和天冬酰胺添加后虫草素含量分别增加了1.43和1.42倍,非极性氨基酸中的丙氨酸添加后虫草素含量增加了1.05倍。
- 陈长兰孟程程佟丽黄子琪桑育黎马靖淇侯潇牟藤贲松彬
- 关键词：蛹虫草虫草素氨基酸菌丝体
- 硒多糖的抗氧化活性及与过氧化氢酶协同作用的研究被引量：22
- 2010年
- 对自行培养的富硒蛹虫草中提取的有机硒多糖进行抗氧化活性研究。采用循环伏安法(CV),在铂电极表面构筑支撑磷脂双层膜(Supported bilayer lipid membrane,s-BLM),以0.1mol/LKCl-1.0mmol/LK3Fe(CN)6-1.0mmol/LK4Fe(CN)6为探针溶液,利用Fenton体系中Fe2+和H2O2反应产生的羟自由基对模拟生物膜的损伤程度考察有机硒多糖的生物活性。结果表明:羟自由基使s-BLM的通透性增强,造成膜体损伤;而在硒多糖存在下,可使羟自由基对膜的这种损伤受到抑制,硒多糖能够清除自由基保护生物膜;采用紫外-可见(UV-Vis)吸收光谱法比较研究不同浓度的过氧化氢酶与硒多糖对羟自由基的清除率。结果表明:硒多糖对羟自由基的清除效果好于过氧化氢酶,且当体系中硒多糖和过氧化氢酶共存时,二者对羟自由基的清除效果具有协同作用。进一步讨论了硒多糖抗氧化活性的可能机理,为有机硒多糖在保护生物膜、抗氧化活性方面的开发与利用提供科学的理论依据。
- 李华为赵素云刘晓波宋琳琳铁梅
- 关键词：硒多糖羟自由基过氧化氢酶
- 土壤施硒对燕麦硒含量及产量的影响被引量：12
- 2015年
- 采用不同含硒量的硒肥进行燕麦土壤施硒的田间试验,研究硒施入量对硒在燕麦中的分布、燕麦产量、燕麦品质及硒在燕麦中存在形态的影响。结果表明：1）土壤施硒可以明显提高灌浆期和成熟期燕麦茎和籽粒中硒的含量。2）土壤中施加硒10-80mg/kg时,燕麦株高和产量均比空白组有所增加。在施硒量为40mg/kg时,燕麦株高和产量均达到最大值,分别为125.3cm和7.51kg。而后随着土壤中施加硒量的增加,燕麦株高和产量均比空白组有所下降。3）灌浆期施硒量为10-80mg/kg时,茎和籽粒中粗蛋白的含量较对照组高,而粗纤维的含量较对照降低。施硒量超过80mg/kg时,燕麦中粗蛋白和粗纤维含量较对照组未有显著变化,成熟期时,燕麦籽粒中粗蛋白和粗纤维含量高于茎中含量,变化趋势和灌浆期相同。4）富硒燕麦茎和籽粒中硒的形态分布为碱溶态〉盐溶态〉Tris-HCL态〉水溶态〉酸溶态。
- 铁梅韩杰李宝瑞刘阳刘博伟张同成李华为
- 关键词：硒燕麦
- 富硒蛹虫草抗氧化作用研究被引量：5
- 2010年
- 从富硒蛹虫草中提取硒多糖和硒蛋白。分别采用ICP-MS法和苯酚硫酸法及考马斯亮蓝法对硒多糖和硒蛋白中硒、多糖及蛋白含量进行测定;在Fenton体系中,以510nm波长处的吸光度研究硒多糖和硒蛋白对羟自由基的清除作用。结果表明:硒多糖和硒蛋白清除羟自由基的效果强于相同浓度的无机硒、多糖及蛋白;其中,富硒蛹虫草硒多糖的对羟自由基最高清除率为38.02%,而硒蛋白的最高清除率可达75.00%。
- 李华为赵素云铁梅
- 关键词：蛹虫草硒多糖硒蛋白FENTON体系羟自由基
- 果蝇硒蛋白D-SelK原核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2012年
- 目的:克隆编码果蝇硒蛋白D-SelK结构基因并在大肠杆菌中表达,纯化后制备兔抗D-SelK的抗体。方法:利用PCR从pGM-T-D-SelK质粒中扩增D-SelK基因,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-D-SelK,以重组质粒转化E.coli BL21(DE3),筛选阳性重组菌株,IPTG诱导目的蛋白表达,通过变性、电泳纯化D-SelK蛋白,SDS-PAGE和Westem blot方法鉴定目的蛋白的表达;以表达的D-SelK蛋白免疫家兔,制备抗D-SelK的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定。结果:扩增了D-SelK基因,克隆于表达载体pGEX-6p-1中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确。经诱导在大肠杆菌中表达出目的蛋白,纯化后免疫家兔,能有效地刺激特异性抗体的产生,抗血清的效价达到1∶51 200以上,且具有良好的特异性。结论:已成功构建D-SelK基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;制备出兔抗D-SelK抗体,效价及特异性均良好,这为进一步研究功能特异性的D-SelK提供了有效的手段。
- 李其久崔剑孟宪军陈长兰贲松彬
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- ICP-MS等三种测定蛹虫草硒含量方法的比较被引量：17
- 2009年
- 采用微波消解法对试验样本进行消解,分别通过ICP-MS法、HPLC/荧光法和3,3-二氨基联苯胺比色法三种方法测定了富硒蛹虫草菌丝体中硒的含量,对上述几种硒含量测定方法的工作条件、检出限和精确度进行了对比研究。实验结果表明:ICP-MS法、HPLC/荧光法和3,3-二氨基联苯胺比色法的检出限分别为0.260 7,0.182 1和10.485 9μg.L-1,ICP-MS法的检出限最低,3,3-二氨基联苯胺比色法的检出限最高。在精密度方面,对同一样品以ICP-MS法测硒的标准差为最低,以3,3-二氨基联苯胺比色法测硒为最高。建议当分析样品中硒含量很低时,可选用HPLC/荧光法和ICP-MS法,如分析样品含硒量相对较大,可采用3,3-二氨基联苯胺比色法。
- 王莹铁梅康平利吕永通贲松彬陈长兰
- 关键词：蛹虫草硒ICP-MS
- 蛹虫草富硒条件优化及硒对其中主要活性成分的影响被引量：17
- 2009年
- 选择对蛹虫草富硒影响较大的四个因素:培养基、装液量、培养时间和硒浓度进行四因素三水平的正交试验,以优化蛹虫草菌丝体的培养条件和富硒条件,并采用ICP-MS方法测定蛹虫草菌丝体中的硒含量。结果表明:对菌丝体生物量影响较大的因素分别为培养时间>硒浓度>培养基种类>装液量,对富硒率影响较大的因素依次为:硒浓度>培养基种类>培养时间>装液量。最佳富硒条件为:硒浓度10μg/ml、合成培养基、培养6d和3/5装液量;在最优化富硒培养条件下,菌丝体中两种主要药用活性成分:虫草多糖和虫草素,其含量分别为226.3mg/g和2.22mg/g,是非富硒菌丝体中的3.4倍和5.8倍,能大幅提高蛹虫草的药用价值,为富硒可促进虫草多糖和虫草素等活性成分增加的机理研究提供一定的理论依据。
- 贲松彬黄子琪王莹侯潇陈长兰
- 关键词：蛹虫草硒元素虫草多糖虫草素
