国家自然科学基金(30671172)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：何淑雅马云喻长顺苏娇李斌元更多>>
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- IQCE mRNA与FXR1P在酵母三杂交体系中的相互作用被引量：1
- 2007年
- 脆性X相关基因1编码蛋白FXR1P是一种RNA结合蛋白,其所结合的靶RNA目前所知甚少。本研究应用酵母三杂交技术对本课题组从pRH3-cDNA人脑海马RNA表达文库中筛选到的一种可能与FXR1P存在相互作用的RNA IQCE进行研究,以验证该RNA与FXR1P的相互作用。方法为:提取利用酵母三杂交技术初步筛选得到的酵母阳性克隆的质粒,转化大肠杆菌Top10,利用其质粒不相容性分离插入了目的片段的pRH3′-cDNA质粒,将该质粒转化入含目的基因FXR1的酵母菌株L40-ura3/pHyb lex/Zeo-MS2/pYESTrp3/FXR1,进行一对一的酵母三杂交验证,最后将该片段进行测序。测序结果为IQCE的一段编码序列,而目前尚无研究报导FXR1与IQCE的相互关系。结论:提示FXR1P与IQCE mRNA存在相互作用,IQCE可能是FXR1P发育调控网络组成成员之一。
- 马云何淑雅喻长顺苏娇张晋王茹静胡维新
- 关键词：脆性X综合征
- 结构域酵母三杂交诱饵载体的构建及酵母转化
- 2007年
- 目的脆性X相关蛋白(FXR1P)是一种RNA结合蛋白,本研究构建了其N-端结构域、KH结构域的酵母三杂交诱饵载体并转化酵母菌株L40 ura3/pHyblex/Zeo-MS2,为筛选这2种结构域的相互作用RNA作基础。方法根据Genebank提供的序列设计引物,以pYESTrp3/FXR1质粒作为模板,扩增分别包含FXR1P N-端结构域、KH结构域的编码区序列,连接到用于酵母三杂交文库筛选的pYESTrp3质粒,得到诱饵质粒,导入大肠杆菌Top10扩增,筛选阳性克隆并提取其中的重组质粒,再转化酵母菌L40 ura3/pHyblex/Zeo-MS2。结果经过测序验证,该重组诱饵质粒构建成功,转化酵母菌之后对宿主菌无毒性,无自激活现象。结论成功构建了能用于酵母三杂交文库筛选的FXR1P蛋白N-端结构域、KH结构域酵母三杂交诱饵载体,为研究这两个结构域的RNA结合功能奠定了基础。
- 马云李斌元徐向红刘慧婷贾瑜何淑雅
- 关键词：脆性X综合征
- FXR1P相互作用RNA的研究被引量：2
- 2007年
- 目的:本研究利用酵母三杂交系统从人脑海马回cDNA文库中筛选FXR1P的靶RNA,以进一步阐明FXR1基因的功能。方法:将表达FXR1P全长的质粒pYESTrp3/FXR1转化酵母菌株L40ura3/pHybLex/Zeo-MS2,检测毒性和自激活性;应用酵母三杂交技术从人脑海马回pRH3′-cDNA文库中筛选FXR1P的相互作用RNA;分离初步筛选的结果,再次转化含有诱饵质粒的融合菌株L40ura3/pHybLex/Zeo-MS2/pYESTrp3/FXR1,重新验证阳性结果;最后对阳性结果的外源插入片段进行测序和生物信息学分析。结果:酵母三杂交的筛选得到了3个阳性结果,经过测序和同源性分析,其中一个阳性结果中的插入片段为K-ALPHA-1 mRNA的部分序列。结论:K-ALPHA-1 mRNA可能是一种新的FXR1P的靶RNA。
- 何淑雅喻长顺马云刘薇胡维新
- 关键词：脆性X综合征
- 不同民族人群FMR1基因CGG重复序列检测与分析被引量：6
- 2007年
- 目的检测和分析脆性X综合征致病基因FMR1 CGG重复序列在汉族和壮族人群中的多态性分布。方法采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对1060例汉族人（男280人，女780人）和283例壮族人（男85人，女198人）FMR1基因CGG重复序列进行分析，并用Southern印迹技术对结果进行了验证。结果汉族人群中共检测到33种等位基因，其中CGG重复序列范围为6～43，壮族人群共检测到27种等位基因，CGG重复序列范围为6～57，两类人群中最常见的等位基因分别为28和29。结论应用PCR扩增技术进行了FMR1基因的大面积筛查，中国汉族和壮族人群中FMR1基因CGG重复序列变异分布略有差异。
- 马云何淑雅李斌元苏娇喻长顺刘慧婷徐向红
- 关键词：脆性X综合征FMR-1基因
- Study on interaction between FXR1 and CMAS and FTH1
- ＜正＞Objective This Project aims to elucidate the distribution and colocalization of FXR1 and CMAS and FTH1 in c...
- Yang Yang,Ma Yun,Fu Xiang-hui,HE Shu-ya (Department of Biochemistry and Molecular Biology,Nanhua University,HengYang 421001,China)
- 文献传递
- 脆性X相关蛋白Ⅰ的研究进展被引量：2
- 2007年
- 脆性X相关基因I(FXR1)发现于1995年,位于3号染色体3q28。其产物脆性X相关蛋白1(FXR1P)与脆性X智障蛋白1 (FMR1P)、脆性X相关蛋白2(FXR2P)形成一个RNA结合蛋白家族。目前认为这三种蛋白能输送mRNA分子并调控其翻译过程。FXR1的翻译产物(FXR1P)分子中存在两个KH结构域和一个RGG结构域,这两种结构域与FXR1P分子的RNA结合作用有关。FXR1P的表达具有较高的组织特意性,在横纹肌中表达最高。合适的动物模型对于一种蛋白的功能研究具有十分重要的意义,目前,FXR1敲除的各种动物模型如小鼠、斑马鱼、非洲爪蟾的近亲Xenopus tropicalis已经在不同的实验室建立。本文主要介绍了FXR1P的结构特点、功能及其实验动物模型。
- 何淑雅喻长顺苏娇马云李斌元
- 关键词：脆性X综合征
