国家科技重大专项(2011ZX08006-003)
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 相关作者：李奎郭豫杰李宏基杨国宇查光明更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所河南农业大学四川农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项引进国际先进农业科技计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪背最长肌与腰大肌microRNA表达谱分析被引量：2
- 2013年
- 【目的】为研究microRNA在猪肌肉生长发育中的作用。【方法】采用Illumina高通量测序技术对猪背最长肌和腰大肌的microRNA转录组进行测定,并鉴定差异表达的microRNA。【结果】在猪背最长肌和腰大肌文库中分别产生了15.22M和17.52M的序列;两个文库共检测到的695个microRNA,其中有363个共表达、193个差异极显著(P<0.01)。【结论】说明microRNA在不同骨骼肌类型中存在差异表达。
- 张小丽刘瀛锴李明洲蒋岸岸帅素容
- 关键词：MICRORNA背最长肌腰大肌高通量测序
- 整合型诱导表达猪生长激素(pGH)载体的构建及表达研究被引量：8
- 2013年
- 旨在构建整合型诱导表达猪生长激素(Porcine growth hormone,pGH)载体,在细胞水平验证其诱导效率及表达效率。从pTRE-GH12载体上扩增TRE-GH片段,通过Sal I酶切位点连接到pCAGGS-rtTA载体中,构建重组载体pCAGGS-rtTA-TRE-GH12(下称pTTGH),将pTTGH质粒转染猪PK15细胞,经G418筛选后,在培养液中添加诱导底物强力霉素(Doxycycline,DOX)后不同时间段通过实时荧光定量PCR(QRT-PCR)测定细胞内pGH mRNA的表达;在培养液中添加不同浓度的的DOX,通过QRT-PCR及Western blot测定细胞内pGH的表达变化。酶切及测序结果表明成功构建了pTTGH载体;QRT-PCR结果表明,和对照组相比,试验组细胞培养液中添加诱导底物后外源GH基因表达在36h时最高;在一定浓度范围内,外源GH表达水平和添加DOX的浓度呈现出正相关性,而正常细胞组中GH的表达水平不受DOX添加与否及量的影响。通过条带灰度分析Western杂交结果验证了培养基中一定范围内DOX浓度和pGH表达量呈现出正相关。试验结果表明,本研究成功构建了整合型诱导表达GH载体并能实现GH的可控表达,本研究为以后制备可控表达GH转基因动物、进一步研究GH对机体影响奠定基础。
- 鞠辉明白立景姜星李奎
- 关键词：猪生长激素整合型真核表达载体
