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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对肝癌DNA甲基转移酶1及上皮钙黏附素表达的影响: 2010年; 目的：研究5-氮杂-2＇脱氧胞苷（5～Aza—CdR）对肝癌细胞中DNA甲基转移酶1（DNMT1）及上皮钙黏附素（E-cadherin）表达的影响。方法：免疫组织化学检测上皮钙黏附素在肝癌（26例）及癌旁组织（20例）中的表达。用终浓度10μmol／L的5-Aza-CdR处理培养的肝癌细胞株GQY-7703作为实验组，未处理细胞为对照组；DNMT1基因和上皮钙黏附素基因（CDH1）的转录产物及表达蛋白分别使用半定量RT-PCR和免疫印迹法检测；CDH1的甲基化状态使用甲基化特异性PCR（MSP）检测。结果：相比较癌旁组织，肝癌组织中上皮钙黏附素表达显著下调。5-Aza-CdR降低了GQY-7703细胞中DNMT1在转录水平和翻译水平的表达；CDH1CpG岛的甲基化水平降低；上皮钙黏附素mRNA和蛋白表达量明显增高，对电泳条带的半定量分析显示实验组和对照组之间的差异具有统计学意义。结论：5-Aza-CdR通过抑制DNMT1的表达，改变了CDH1基因的异常甲基化状态，进而恢复上皮钙黏附素的表达。; 吴守伟汤必奎黄银久胡明洁赵莉; 关键词：肝癌细胞 DNA甲基转移酶1 上皮钙黏附素

外生殖器畸形患者遗传学检查的临床意义被引量：1: 2010年; 目的探讨遗传学检查在生殖器发育畸形患者临床诊断和治疗中的作用。方法收集20例不同程度外阴发育异常患者的外周血,运用G显带技术进行染色体核型分析,PCR技术检测SRY基因(sex-determiningregion of Y chromosome,SRY)。结果 6例真两性畸形的核型为46,XX;45,X;46,XX/46;XY和46,XX/47,XXY,其中1例46,XX个体的SRY(-),其余5例SRY(+);6例男性假两性畸形,存在睾丸组织,核型均为46,XY,且SRY(+);2例女性假两性畸形,具子宫及卵巢,核型46,XX,SRY(-);1例46,XY女性综合征,具子宫及双侧卵巢间质,核型46,XY,SRY(-);1例46,XX男性综合征,隐睾,核型46,XX,SRY(+);3例母孕期药物影响女婴,具子宫及卵巢,核型46,XX,SRY(-);1例肥胖引起的埋藏阴茎,核型46,XY,SRY(+)。结论临床上对生殖器发育畸形患者进行核型分析和SRY基因检测,有利于早期对性腺发育的判断,促进疾病的诊断和治疗。妇女孕期性激素的使用应加强管理。; 吴守伟胡明洁唐宝定李庆文席玉玲赵莉; 关键词：外生殖器两性畸形核型分析基因分析

5氮-杂-2′-脱氧胞苷对胃癌细胞中HLA-C表达的影响: 2010年; 目的:研究5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌细胞中人白细胞抗原C(HLA-C)表达的影响及其与DNA甲基转移酶1(DNMT1)的关系。方法:用终浓度为10μmol/L的5-Aza-CdR处理培养胃癌细胞(实验组),以未处理细胞作为对照;HLA-C和DNMT1基因的转录表达使用半定量RT-PCR检测;HLA-C的甲基化状态使用甲基化特异性PCR(MSP)检测。结果:5-Aza-CdR处理降低了BGC823细胞中DNMT1基因在转录水平的表达;HLA-C CpG岛的甲基化水平降低;HLA-C mRNA表达量明显上调,对电泳条带的半定量分析显示实验组和对照组之间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:5-Aza-CdR通过抑制DNMT1的表达,改变胃癌细胞中HLA-C基因的异常甲基化状态,进而上调HLA-C的表达。; 吴守伟付倩琦汤必奎黄银久赵莉; 关键词：DNA甲基转移酶

DNA去甲基化药物对肝癌SMMC-7721细胞株IGF2印迹状态及表达的影响: 2010年; 目的:研究5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌SMMC-7721细胞株IGF2印迹状态及表达的影响。方法:用终浓度为10μmol/L的5-氮杂-2′-脱氧胞苷处理培养的SMMC-7721细胞,不含5-Aza-CdR培养液培养的细胞作为对照组;IGF2基因的印迹状态使用PCR-RFLP方法检测;IGF2基因的表达使用半定量RT-PCR确定。结果:SMMC-7721细胞中IGF2基因处于母源印迹状态,为杂合子;5-氮杂-2′-脱氧胞苷处理后IGF2基因的mRNA表达量降低,电泳条带的半定量分析显示处理和对照之间的差异具有统计学意义(P<0.01),RFLP结果未见印迹丢失。结论:胞嘧啶去甲基化药物能够改变SMMC-7721细胞中IGF2的甲基化状态,降低IGF2mRNA的表达量,但并不引起IGF2基因完全失表达。; 吴守伟汤必奎胡明洁黄银久赵莉; 关键词：胰岛素样生长因子2 基因组印迹

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安徽省高校省级自然科学研究项目(2006kj124c)