国家自然科学基金(81330052)
- 作品数：6 被引量：11H指数：3
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- 相关机构：北京协和医学院安徽医科大学中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ANO1蛋白在食管鳞状细胞癌中表达的瘤内异质性被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨ANO1蛋白在食管鳞状细胞癌组织中表达的瘤内异质性及与肿瘤临床病理学特征的关系。方法:采用组织微阵列免疫组化法检测122例食管鳞癌每例4个肿瘤取材区域及相应正常组织中ANO1蛋白的表达情况,比较每例肿瘤不同取材区域的表达差异,分析ANO1蛋白表达情况与患者临床病理学特征的相关性。结果:ANO1蛋白在所有正常组织中呈阴性表达,而在肿瘤组织的表达阳性率为53.3%(65/122)。统计学分析显示,ANO1蛋白的表达情况在有、无淋巴结转移之间及不同肿瘤临床分期之间存在显著性差异(P<0.05)。在阳性表达的病例中,绝大多数(55/65)肿瘤内显示不同程度的ANO1蛋白表达异质性,其中32.3%(21/65)的病例存在不同取材区域之间较大的异质性。结论:ANO1蛋白在正常组织中呈阴性表达,在食管鳞状细胞癌组织中呈部分阳性表达,与临床病理学参数存在显著相关性(P<0.05)。而且,食管鳞状细胞癌ANO1蛋白表达存在明显的瘤内异质性,多位点取材有助于提高ANO1表达的检出率并可减少漏检。
- 肖长艳马赛常晨鲁陈陈黄大可郝佳洁张钰徐昕蔡岩贾雪梅王明荣王小春
- 关键词：食管鳞状细胞癌免疫组化
- 利用染色体区段混合BAC探针鉴定食管癌细胞中的染色体畸变被引量：3
- 2014年
- 染色体畸变是恶性肿瘤细胞的重要遗传学特征,文章旨在应用BAC DNA克隆鉴定食管癌细胞中的染色体臂和染色体区段的畸变。针对染色体各区段选取5~10个1 Mb BAC DNA,分别混合制备成特定染色体区段的BAC DNA混合克隆,然后将染色体臂上覆盖所有区段的上述混合克隆进一步混合制备成特定染色体臂BAC DNA混合克隆。利用简并寡核苷酸引物聚合酶链反应（Degenerate oligonucleotide primed PCR, DOP-PCR）标记染色体臂探针,利用切口平移法（Nick translation）标记染色体区段探针,并对食管癌细胞中期染色体进行荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization, FISH）分析。正常人外周血淋巴细胞中期染色体FISH结果显示,上述方法标记的探针具有较高的特异性。进一步利用染色体臂混合探针,确定了多个食管癌细胞中的染色体重排所涉及的特定染色体臂；利用染色体区段混合探针,鉴定出KYSE140的t（1q；7q）衍生染色体中1q上的断点范围位于1q32-q41。文章成功建立了1 Mb BAC DNA混合克隆探针标记技术,并鉴定出多个食管癌细胞中的染色体臂和染色体区段畸变,不仅为利用 M-FISH 技术鉴定肿瘤细胞中的染色体畸变提供了更为准确的方法,而且还可能进一步将该法推广应用于恶性血液病的核型分析以及产前诊断。
- 郝佳洁王春丽顾文跃程潇钰张钰徐昕蔡岩王明荣
- 关键词：染色体畸变BAC荧光原位杂交食管癌细胞
- 可条件性诱导PLK1稳定敲降的食管癌细胞株的建立
- 2014年
- 目的:建立可条件性诱导PLK1-shRNA稳定表达的食管癌细胞株,为深入研究PLK1在食管癌发生发展中的作用及分子机制提供细胞模型。方法:合成PLK1-shRNA寡核苷酸,退火后连接到慢病毒表达载体pLKO-Tet-On并转化至感受态细胞Stbl3,利用菌落PCR和测序分析鉴定阳性重组子。用pLKO-shPLK1-Tet-On重组质粒和包装质粒共转染293T细胞,收集病毒上清,感染食管癌细胞KYSE510,利用嘌呤霉素筛选可诱导PLK1-shRNA稳定表达的细胞株。采用qRT-PCR和Western blot检测强力霉素(Dox)诱导PLK1-shRNA表达的效率。结果:菌落PCR和测序分析结果显示,pLKO-shPLK1-Tet-On重组质粒中PLK1-shRNA的序列及插入位点正确。包装、收获病毒并感染KYSE510细胞后,筛选获得了具有嘌呤霉素抗性的稳定细胞株KYSE510-shPLK1-Tet-On。qRT-PCR和Western blot的检测结果显示,0.1μg/mL Dox即可显著下调KYSE510-shPLK1-Tet-On细胞中PLK1的表达。结论:成功构建了诱导型PLK1-shRNA慢病毒表达载体,并筛选获得了可条件性诱导PLK1稳定敲降的食管癌细胞株,为进一步探讨PLK1异常表达与食管癌发生发展的关系提供了理想的细胞模型。
- 曹迎亚车轶群陈群马文韬刘洋郝佳洁蔡岩鲁卫华王明荣张钰
- 关键词：PLK1慢病毒载体食管癌
- 食管鳞癌组织中层粘连蛋白5Y2的表达及其瘤内异质性被引量：4
- 2016年
- 目的探讨层粘连蛋白5Y2（LN-5Y2）在食管癌组织中的表达及其瘤内异质性。方法采用微阵列免疫组织化学技术检测了135例食管鳞癌组织中LN-5Y2蛋白的表达情况，分析其与食管癌患者临床病理特征的关系。比较同一肿瘤不同取材位点之间、不同肿瘤同-取材位点之间LN-5Y2蛋白的表达情况。结果LN-5y2蛋白在肿瘤组织中的阳性率为40．O％（54／135），在I～Ⅱ期和Ⅲ期患者中的阳性率分别为31．1％（23／74）和50．8％（31／61），差异有统计学意义（P=0．023）。LN-5y2蛋白表达与食管鳞癌患者年龄、性别、T分期、淋巴结转移情况和分化程度无关（P〉0．05）。在54例LN．5Y2蛋白阳性的肿瘤组织中，同一肿瘤不同取材位点之间、不同肿瘤同一取材位点之间，LN．5Y2蛋白的表达均显示出一定程度的异质性。结论LN．5y2蛋白表达与食管鳞癌患者的临床分期有关．且在同一肿瘤内不同区域存在异质性。
- 鲁陈陈吴李飞常晨王春丽潘蓓青徐昕蔡岩张钰王明荣郝佳洁贾雪梅
- 关键词：食管肿瘤免疫组织化学
- 食管鳞癌TP53基因突变及其瘤内异质性分析被引量：4
- 2016年
- 目的 探讨食管鳞癌瘤内多个取材位点中TP53基因突变异质性状态及其与临床病理特征的相关性。方法对食管鳞癌原发肿瘤及其配对的手术切端组织,采用聚合酶链式反应（PCR）法和直接测序法检测TP53基因第2~11号外显子突变状态,评估各病例瘤灶内4个不同位点TP53基因突变与临床病理参数的相关性及其在瘤内的异质性。结果 在30例被测食管鳞癌肿瘤中,发现18例患者存在TP53基因突变,占60%（18/30）。16例为点突变,其中3例为无义突变,13例为错义突变;另2例为导致移码的缺失突变。大部分突变集中于TP53基因5~8号外显子,其中5号外显子的突变率最高,为23.3%（7/18）。在2例肿瘤中检测到第282位密码子突变（R282W）,3例检测到第175位密码子突变（R175H）。观察每例肿瘤各位点突变等位基因峰高与正常等位基因峰高之比（relative intensity,RI值）,发现在有点突变的16例中,12例的4个肿瘤位点的RI之间存在很大差异,其余4例瘤内各位点RI值也不一致。结论 食管鳞癌存在较高频率的TP53基因突变,而且每例肿瘤均存在不同程度的瘤内异质性。
- 江烨常晨马赛潘蓓青张钰徐昕蔡岩王明荣郝佳洁李敏
- 关键词：食管鳞癌基因突变
- 联合靶向PLK1和mTOR对食管鳞癌的协同抑制作用及分子机制研究
- 食管鳞癌(Esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)是我国高发的恶性肿瘤，其恶性程度高，预后差，目前临床上尚无有效的治疗药物。PLK1(Polo-like kinase 1)过表达和...
- 杨凯霞
- 关键词：食管鳞癌PLK1MTOR分子机制
- 文献传递
