国家教育部博士点基金(20050558060)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：中山大学附属第一医院泰安市中心医院广州市胸科医院更多>>
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- RNA干扰抑制胸膜间皮细胞水通道蛋白1表达的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究 RNA 干扰技术对大鼠胸膜间皮细胞水通道蛋白1(AQP1)基因表达的影响,探讨应用该技术治疗胸腔积液的可行性。方法体外培养大鼠胸膜间皮细胞,细胞鉴定后,采用免疫细胞化学、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测 AQP1表达;设计并构建2个靶向大鼠AQP1基因的短发夹 RNA(shRNA)重组质粒,脂质体转染大鼠胸膜间皮细胞48 h 后,采用 RT-PCR 及Western 印迹方法分别在 mRNA 和蛋白质水平检测 AQP1基因表达的抑制效果。结果胸膜间皮细胞存在 AQP1表达,所设计的2个 AQP1-siRNA 重组质粒可不同程度地抑制 AQP1在胸膜间皮细胞中的表达,在 mRNA 水平抑制率分别为83.5%和90.9%;在蛋白质水平抑制率分别为41.2%和67.6%,与空白对照组和阴性对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.01)。结论质粒介导的 RNA干扰可明显抑制大鼠胸膜间皮细胞 AQP1基因的表达,且抑制率具有序列相关性,是潜在的胸腔积液基因治疗新方法。
- 张伟谢灿茂李志平朱智文严英硕杜宏春
- 关键词：胸膜上皮细胞RNA干扰水通道蛋白1
- 水通道蛋白-1在炎症性胸腔积液大鼠胸膜上的表达及其意义被引量：1
- 2008年
- 胸膜炎是引起胸腔积液的主要原因之一。近年发现多种细胞膜上存在参与液体转运的水通道蛋白（aquaporin，AQP），并证实AQP参与许多疾病的液体转运，AQP的发现为研究胸腔积液生成和吸收的分子机制提供了新方法。我们通过复制炎症性胸腔积液大鼠模型，观察AQP-1在炎症性胸腔积液大鼠胸膜上的表达及其与胸腔积液形成的相互关系，探讨胸膜AQP-1在胸腔液体转运中的作用。
- 张伟张伟谢灿茂何桥郭禹标彭穗玮
- 关键词：水通道蛋白-1胸腔积液胸膜炎炎症性AQP-1
- 葡萄糖对大鼠胸膜间皮细胞水通道蛋白1表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察葡萄糖对胸膜间皮细胞水通道蛋白1(AQP-1)表达的影响。方法体外原代培养Wistar大鼠胸膜间皮细胞,鉴定后将细胞随机分为对照组和葡萄糖组,对照组以D-MEM/F-12培养液培养细胞,葡萄糖组以含不同浓度葡萄糖(50、100及200mmol/L)培养液培养细胞24h;100mmol/L葡萄糖组分为6、12、18及24h四个时间组,应用Western印迹、RT-PCR方法检测细胞中AQP-1表达变化。结果含50、100及200mmol/L的葡萄糖培养液作用细胞24h后,AQP-1蛋白表达量(积分吸光度)分别为54.02±4.61、127.84±9.41和231.62±22.63,分别为对照组(22.45±2.16)的2.41、5.69和10.32倍(P<0.01),AQP-1表达与葡萄糖浓度相关;以含100mmol/L葡萄糖培养液培养细胞6、12、18及24h后,AQP-1蛋白表达量分别为24.68±2.56、58.68±3.67、89.61±6.62和113.41±7.65,分别为对照组(11.81±1.45)的2.09、4.97、7.59和9.60倍,差异均有统计学意义(P<0.01),AQP-1表达与作用时间相关。AQP-1在mRNA水平表达与蛋白水平表达相一致。结论葡萄糖上调胸膜间皮细胞AQP-1的表达,具有浓度和时间相关性,AQP-1可能参与胸水的转运。
- 张伟刘道明毛秋云谢灿茂
- 关键词：葡萄糖胸膜间皮细胞水通道蛋白1胸腔积液
- 地塞米松对大鼠胸膜间皮细胞水通道蛋白1表达的调节被引量：2
- 2007年
- 目的:观察胸膜间皮细胞水通道蛋白1(AQP-1)的表达及地塞米松(Dex)对其表达的影响,为进一步研究胸水治疗的机制提供实验依据。方法:体外培养大鼠胸膜间皮细胞,细胞鉴定后,采用免疫细胞化学、RT-PCR方法检测AQP-1表达;应用Westernblotting检测以不同浓度Dex(10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mmol/L)处理细胞24h及以10-4mmol/LDex处理细胞6h、12h、24h、36h、48h、72h后AQP-1表达情况。结果:发现胸膜间皮细胞存在AQP-1表达,10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mmol/LDex干预胸膜间皮细胞24h后,AQP-1蛋白表达量(积分吸光度)分别为755.04±19.81、843.72±19.41、862.96±26.53、694.80±32.00、938.08±13.32,分别高于正常对照组(372.90±16.46)2.02、2.26、2.31、1.86、2.52倍(P<0.01),AQP-1表达升高与地塞米松浓度无关;以10-4mmol/LDex干预细胞6h、12h、24h、36h、48h、72h后,AQP-1蛋白表达量分别为:554.14±23.57、917.78±38.62、1587.20±61.22、1322.09±28.65、918.40±26.62、1117.60±51.32,分别高于正常对照组(495.91±23.12)1.12、1.85、3.20、2.67、1.85、2.25倍(P<0.01),AQP-1表达与地塞米松作用时间有关。结论:胸膜间皮细胞存在AQP-1表达,地塞米松对胸膜间皮细胞AQP-1表达有明显的增强性调节作用,具有时间依赖性。
- 张伟谢灿茂何桥邓晓华柯彩霞
- 关键词：地塞米松胸膜间皮细胞水孔蛋白类
- 角叉菜胶致炎症性胸腔积液大鼠胸膜上水通道蛋白1的表达被引量：5
- 2008年
- 目的探讨水通道蛋白1(AQP-1)在炎症性胸腔积液大鼠胸膜上的表达及其与胸水形成的关系。方法56只健康Wistar大鼠随机分为对照组(8只)和胸膜炎组(48只)。采用角叉菜胶胸腔内注射复制炎症性胸腔积液大鼠模型。胸膜炎组根据注入角叉菜胶后处理时间再分为6、12、24、36、48和72h组,每组8只。测定各组大鼠胸腔积液量,对胸腔积液进行细胞计数和分类,采用HE染色观察脏、壁层胸膜的病理变化,采用免疫组化染色检测AQP-1在大鼠胸膜上的分布,分别采用RT-PCR和Westernblot方法检测脏、壁层胸膜AQP-1的mRNA和蛋白表达。结果胸膜炎各时相组胸水量分别为(2.10±0.22)mL、(4.10±0.15)mL、(4.40±0.36)mL、(3.20±0.27)mL、(2.60±0.18)mL和(0.12±0.02)mL。AQP-1主要表达在脏、壁层胸膜的间皮细胞和毛细血管内皮细胞。胸膜炎各时相组脏、壁层胸膜AQP-1表达均增强。胸膜炎组AQP-1mRNA在壁层胸膜的表达于6h开始升高,24h达高峰;在脏层胸膜的表达于12h开始升高,24h达高峰。AQP-1蛋白表达的变化趋势与mRNA表达一致。12h和24h组壁层胸膜AQP-1表达与胸腔积液量呈正相关(r=0.857,r=0.846,P均<0.01);24h脏层胸膜AQP-1表达与胸腔积液量呈正相关(r=0.725,P<0.05)。结论胸膜炎胸腔积液时胸膜AQP-1表达增强,AQP-1可能参与炎症性胸腔积液的转运过程。
- 张伟谢灿茂
- 关键词：胸腔积液胸膜胸膜炎水通道蛋白1
