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广东省自然科学基金(9251063201000001): 作品数：10 被引量：13H指数：3; 相关作者：李扬秋陈少华杨力建李萡沈琦更多>>; 相关机构：暨南大学河南省肿瘤医院广东医学院附属医院更多>>; 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

实时定量PCR检测慢性粒细胞白血病患者Shh、Smo基因的表达水平被引量：3: 2014年; 目的建立Hedgehog信号通路功能性基因Shh和功能性受体蛋白Smo基因的定量检测方法,并分析其在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中的表达水平。方法利用实时定量PCR检测20例CML患者和作为正常对照(8例)的健康人外周血细胞中Shh、Smo基因的表达水平,以β2微球蛋白(β2-M)基因作为内对照。结果 CML组Shh、Smo表达水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。结论成功建立Shh、Smo基因的定量检测方法;Shh、Smo基因在CML中高表达。; 朱华民李扬秋; 关键词：SHH 慢性粒细胞白血病实时定量PCR

抗原特异TCR α和β链基因克隆及分子空间结构预测被引量：1: 2011年; 目的扩增弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)相关抗原特异T细胞克隆的全长TCRα和β链基因序列,并对其三维空间结构进行预测。方法从已鉴定的2例伴有克隆性增殖TCR Vα6和Vβ13亚家族T细胞的DLBCL患者外周血中克隆全长TCRα和β基因序列,利用Primer Premier 5.0分析软件推算其相应的氨基酸序列,并通过自动化蛋白质模建服务器SWISS-MODEL进行三维空间结构预测。然后利用蛋白质三维图像分析软件Rasmol对所获得的TCR三维空间结构进行显示和分析。结果获得DLBCL相关抗原特异TCRα6和β13全长基因序列及其氨基酸序列。2例患者的TCR Vα6的空间结构与PDB ID:3ffcD模型相似,序列同源性分别为92.16%和91.71%;而2个TCR Vβ13也均具有同一个空间结构模型PDB ID:2ialD,序列同源性分别为92.95%和92.18%。结论来自不同DLBCL患者外周血中克隆性增殖的TCR Vα6或Vβ13亚家族T细胞的TCR具有高度同源性的空间结构,提示其可能识别相同的肿瘤抗原表位。; 尹青松谭获陈少华杨力建李萡叶静梅李扬秋; 关键词：T细胞受体同源建模弥漫大B细胞淋巴瘤

血液肿瘤病人TCR/CD3信号缺陷及其治疗策略: 2011年; T细胞免疫缺陷导致机体监测恶性转化细胞不力,是血液肿瘤发生发展的重要原因,T细胞受体信号分子CD3复合物尤其是CD3ζ表达下降或缺失严重影响T细胞的活化功能,本文主要综述近年对血液肿瘤中T细胞受体信号传导分子CD3ζ的缺陷及其可能的治疗策略的研究进展。; 李扬秋杨力建陈少华李萡; 关键词：血液肿瘤基因表达免疫缺陷

弥漫大B细胞淋巴瘤相关抗原特异TCR基因修饰T细胞TCRζ链基因的表达: 2011年; 目的:分析DLBCL相关抗原特异TCR基因修饰T细胞经肿瘤细胞刺激活化前后TCRζ链基因表达水平的变化。方法:利用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR,相对定量检测TCR基因修饰T细胞活化前后TCRζ链基因的表达情况,β2微球蛋白基因(β2M)为内参照,根据相对定量公式:2-△Ct×100%和2-△△Ct,计算TCR基因修饰T细胞活化前后TCRζ链基因的相对表达水平及其差异情况。结果:与未转染T细胞的TCRζ基因mRNA表达量(1.74±0.28)%相比,TCR转基因修饰T细胞TCRζ基因mRNA的表达水平没有发生明显的变化,表达量为(1.78±0.22)%;而经效/靶细胞(TCR基因修饰T细胞/Toledo细胞)混合培养后,活化的TCR基因修饰T细胞的TCRζ基因mRNA表达水平为(11.54±1.98)%,明显高于未刺激培养之前的TCR基因修饰T细胞和未转染T细胞的TCRζ基因的表达水平(P<0.05),分别增长了(6.59±0.80)倍和(6.48±0.36)倍。结论:TCR转基因修饰T细胞受到抗原的刺激而活化,TCRζ链基因的表达相应增加。; 尹青松陈少华杨力建查显丰李萡李扬秋; 关键词：实时定量PCR 弥漫大B细胞淋巴瘤

胎儿胸腺发育过程中T细胞抗原受体的表达: 2010年; 目的：检测不同胎龄胎儿胸腺组织内T细胞抗原受体（TCR）的表达及发育规律.方法：18～40周胎儿胸腺组织,采用免疫组织化学SP法检测TCRαβ和TCRγδ的表达. 结果：胚胎21周,胸腺组织开始出现TCRαβ和TCRγδ阳性细胞.TCRαβ阳性细胞主要分布被膜下及小叶间隔中,围绕血管成群分布.TCRγδ阳性细胞的分布与TCRαβ阳性细胞相似, 但细胞数量较TCRαβ阳性细胞少.38周以后胎儿胸腺内TCR阳性细胞主要分布在皮髓质交界处,被膜下及小叶间隔中的TCR阳性细胞较早期少.结论：TCR阳性细胞在胚胎早期开始出现,其分布部位提示局部微环境有利于这些细胞的分化发育.; 卢晓晔林芳芳李杨秋高岚; 关键词：胎儿胸腺 T细胞抗原受体免疫细胞化学

SEA联合K562细胞体外诱导正常人脐带血单核细胞TCRζ链表达的作用被引量：1: 2010年; 目的:研究金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对K562细胞体外诱导脐血T细胞活化TCRζ链基因表达情况。方法:常规分离4例脐带血单核细胞,分别与抗CD3单克隆抗体、单纯K562细胞、SEA以及SEA联合K562细胞共培养,诱导T细胞活化增殖,并设空白对照组。刺激培养48 h后收集各组细胞提取mRNA并合成cD-NA,采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量检测TCRζ链在不同组别T淋巴细胞中的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式:2-ΔΔCt计算TCRζ链表达差异倍数。结果:抗CD3单抗组、K562细胞组、SEA组、SEA联合K562细胞组诱导培养T细胞中TCRζ链表达差异倍数分别是(4.52±0.96)、(1.65±0.26)、(1.43±0.44)、(3.41±0.30),表明各组均有活化T细胞的作用,但各组TCRζ链表达水平有差异,其中SEA联合k562细胞组的T细胞ζ链基因表达均明显高于单纯k562组及单纯SEA组(P<0.01)。结论:超抗原SEA有助于增强K562细胞体外诱导T细胞活化作用。; 高永鹏林晨田红霞高珂郜世隽江振友陈少华沈琦李扬秋; 关键词：脐带血 BCR-ABL融合蛋白

慢性粒细胞白血病患者FcεRⅠγ链基因表达上调被引量：1: 2011年; 目的:在慢性粒细胞白血病病人(CML),CD3ζ链表达明显下降,分析与CD3ζ存在互补关系的FcεRⅠγ基因在CML患者中表达水平,以了解T细胞免疫中TCR信号转导的变化情况。方法:利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR法测定CML患者和健康人各20例的外周血单个核细胞(PBMCs)的FcεRⅠγ基因表达水平,以β2微球蛋白基因(β2MG)作为内参照,采用相对定量公式:2-ΔCt×100%,计算FcεRⅠγ链的相对mRNA表达量。结果:CML患者PBMCs中FcεRⅠγ基因表达水平明显高于健康对照组(P<0.001)。FcεRⅠγ表达水平变化与病人外周血CD3+T细胞比例无相关性。结论:CML病人中FcεRⅠγ表达上升,提示FcεRⅠγ可能在一定程度调节CD3ζ链缺陷所带来的T细胞免疫异常。; 闫小娟查显丰沈琦陈少华杨力健李萡李扬秋; 关键词：慢性粒细胞性白血病基因表达实时荧光定量RT-PCR

慢性粒细胞性白血病中TCRζ相关的基因表达研究: 研究背景和目的:慢性粒细胞性白血病(CML)病人常伴有免疫功能缺陷,前期研究发现病人T细胞亚家族谱系缺陷、胸腺输出功能低下和T细胞活化缺陷等,同时,病人T细胞中TCRζ链基因表达明显下降,本研究进一步分析调控TCRζ基因...; 闫小娟査显丰沈琦吴秀丽陈少华李萡杨力建李扬秋; 文献传递

CML病人外周血T细胞CD3基因表达模式变化被引量：3: 2010年; 在我们前期研究发现慢性髓系白血病(CML)病人中T细胞受体信号传导分子CD3ζ基因表达下调的基础上,本研究进一步分析病人外周血中全部4种CD3γδεζ基因的表达模式特点,以深入了解病人的T细胞免疫中信号转导的变化。利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测17例初诊慢性期CML病人外周血单个核细胞中CD3γ、δ、ε和ζ链的表达水平,以β2微球蛋白基因(β2MG)作为内参照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算CD3分子各亚单位的相对mRNA表达量,以17例健康成人外周血作为对照。结果表明:CML中CD3γ、δ、ε基因表达水平分别为2.344%,0.515%和3.516%(中位数),与健康对照组比较(3.093%,0.853%和2.302%)并没有显著性差异(p=0.072,p=0.190,p=0.615),而CML中CD3ζ链基因的表达水平(0.395%)则明显低于健康对照组(1.538%)(p<0.001)。在CML中4种CD3分子表达水平模式依次为CD3ε>CD3γ>CD3δ>CD3ζ,而对照组中则为CD3γ>CD3ε>CD3ζ>CD3δ。结论:本研究首先提供了CML病人中CD3各基因表达模式情况,显示以CD3ζ为主的TCR信号分子的表达缺陷,4种CD3链分子的表达水平模式也发生变化。; 杨力建陈少华王亮陈思郁志卢育洪李扬秋; 关键词：慢性髓系白血病基因表达免疫缺陷

脐带血CD4^+和CD8^+ T细胞中T细胞特异转录因子Elf-1表达特点被引量：1: 2010年; 目的:了解脐带血单个核细胞(CBMCs)及其CD4+和CD8+ T细胞亚群中转录因子Elf-1的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测12例脐带血CBMCs、CD4+和CD8+ T细胞亚群中Elf-1基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参照,10例健康成人作为对照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Elf-1mRNA相对表达量。结果:脐带血和健康成人外周血单个核细胞(PBMC)、CD4+和CD8+ T细胞均表达Elf-1,具体表达量呈现明显的个体差异性。Elf-1 mRNA相对表达量在CBMCs为18.55%±2.48%(其中最高为36.22%,最低为6.45%),在脐带血CD8+ T细胞为3.52%±0.45%(其中最高为6.75%,最低为1.71%),均明显高于健康成人PBMC(9.16%±1.92%)及其CD8+ T细胞(2.02%±0.27%)(P<0.01,P<0.05),而脐带血CD4+T细胞Elf-1 mRNA相对表达量为3.83%±0.61%,与健康成人外周血CD4+ T细胞(2.73±0.52%)比较,无显著差异。结论:本研究率先报道脐带血T细胞亚群中Elf-1 mRNA表达特点,结果提示Elf-1基因在CBMCs及其CD8+ T细胞亚群中的高表达可能是T细胞的免疫学特点之一。; 林春兰陈少华杨力建郑海涛沈琦周羽竝李扬秋; 关键词：脐带血

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