国家高技术研究发展计划(2008AA10Z306)
- 作品数：5 被引量：39H指数：5
- 相关作者：孙君社刘萍张莹罗岩胡锦蓉更多>>
- 相关机构：中国农业大学集美大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 溶氧对巨大芽孢杆菌发酵亚硝酸还原酶的影响被引量：8
- 2011年
- 通过振荡间歇静置培养,研究不同静置时间对巨大芽孢杆菌发酵生产亚硝酸还原酶(nitrite reductase,NiR)的影响,并在适宜间歇静置条件下,分析细胞生长、基质消耗与NiR酶量的关系。结果表明,在发酵前12h每2h振荡培养间歇60min静置培养的条件下,20h发酵时所得亚硝酸盐还原酶的酶活最高;在每2h振荡培养间歇60min静置培养的条件下,周期为20h的该菌的发酵特性研究表明,菌体的细胞生长量及发酵液中的亚硝酸盐消耗量和葡萄糖消耗量均同步低于一直振荡培养的对照组,但发酵20h后所得亚硝酸还原酶的酶活为98.7U/mL,比一直振荡培养的对照组的酶活高出103.4%。
- 张莹孙君社张京声罗岩胡锦蓉刘萍
- 关键词：巨大芽孢杆菌振荡培养
- 亚硝酸还原酶高产菌株的筛选及发酵条件优化被引量：12
- 2009年
- 通过紫外线对巨大芽孢杆菌MPF-906进行了诱变处理,提高了产酶能力,变异株Z85酶活达到28.76U/mL。进一步对其发酵条件进行研究,优化了培养基和培养条件。优化的培养基为:葡萄糖1.5%,牛肉膏0.2%,硫酸铵0.1%,K2HPO40.135%,KH2PO40.07%,NaCl 0.1%;无机盐溶液10 mL/L(即MgSO.47H2O0.04%、MnSO.4H2O 0.001%、CaCl.22H2O 0.002%)。发酵条件为:摇床转速160 rpm,接种量4%,初始pH6.5,30℃发酵20 h。在此最优化条件下,亚硝酸还原酶的酶活达到45.94 U/mL。
- 郑怀忠陈发河李淑燕孙君社刘萍
- 关键词：紫外诱变发酵
- 巨大芽孢杆菌发酵降解亚硝酸盐动力学研究被引量：6
- 2011年
- 研究了在不同初始亚硝酸钠和葡萄糖浓度条件下,巨大芽孢杆菌B.megaterium MPF-906细胞生长和降解亚硝酸盐的发酵动力学。结果发现,初始亚硝酸盐浓度对细胞生长有重要影响,初始亚硝酸盐浓度为2mmol/L的环境最利于细胞增殖,此时亚硝酸盐的消耗速率也最大,发酵液中亚硝酸盐消耗曲线和细胞生长曲线表现出互为对应的关系;低浓度诱导物亚硝酸钠的环境也更有利于细胞生产亚硝酸还原酶(NiR)。初始葡萄糖浓度对细胞生长也有重要影响,初始葡萄糖浓度为2.0%的环境最利于细胞增殖,此时细胞生成速率最大,初始较高的葡萄糖浓度时,亚硝酸盐的降解速率减小,但亚硝酸盐降解率仍可在14h内达到100%;初始葡萄糖浓度为2.0%时,糖耗速率最快;较高浓度葡萄糖的环境也有利于细胞生产NiR。
- 张莹刘萍孙君社罗岩
- 关键词：巨大芽孢杆菌亚硝酸盐发酵动力学
- 巨大芽孢杆菌产亚硝酸还原酶活性测定条件优化被引量：12
- 2011年
- 为探明巨大芽胞杆菌产亚硝酸还原酶(nitrite reductase,NiR)的催化特性,更好发挥其催化性能,该文从缓冲液种类、电子供体种类及浓度、NaCl浓度、加酶量以及反应温度和反应时间等几个方面研究了巨大芽胞杆菌产亚硝酸盐还原酶活性测定的适宜条件。研究结果表明,该菌产NiR酶活测定体系为:在250μL反应体系中加入Na2HPO(40.1mol/L)-柠檬酸(0.05mol/L)缓冲液(pH6.0)125μL;1mol/L NaCl 15μL;0.05mol/L甲基紫精(MV)7.5μL、0.05mol/L硫代硫酸钠20μL和0.15mol/L连二亚硫酸钠20μL作为电子供体,加酶量50μL;优化后的反应条件为反应温度35℃,反应时间1.5min。
- 罗岩孙君社张京声胡锦蓉张莹刘萍
- 关键词：巨大芽孢杆菌酶活测定
- 亚硝酸还原酶的分离纯化及其性质研究被引量：6
- 2011年
- 经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Cellulose柱层析、SephadexG-75凝胶过滤层析,由巨大芽孢杆菌(B.megaterium MPF-906)分离纯化得到亚硝酸还原酶(nitrite reductase,NiR),分子量为35ku。NiR反应的最适温度和pH值分别为40℃和6.5。热稳定性较好,80℃保温4h后仍有50%的酶活力。在pH5.5～9.0均较稳定,残余酶活都在60%以上。Cu2+、Ba2+能提高酶活力;Mn2+、Pb2+对酶活力有明显抑制作用;Na+、Fe3+、Mg2+、Al3+对其有轻微抑制作用;Ca2+、Zn2+对酶活力影响不大。亚硝酸钠为底物,该酶的Km=8.6mmol/L,Vmax=4.1U/mg,该酶的适电子供体为抗坏血酸20mol/L、0.1mol/L的连二亚硫酸钠和0.075mol/L的草酸钠。
- 刘萍罗岩张莹杨艳孙君社倪元颖
- 关键词：巨大芽孢杆菌分离纯化酶学性质
