上海市教育委员会重点学科基金(S30204-k03)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：俞丽芬李薇薇徐琛莹卢君瑶蔡劬更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Sulfone通过抑制ERK途径上调XAF1表达诱导结肠癌细胞凋亡被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨化学预防药物Sulfone是否通过转录调节XAF1的表达诱导结肠癌细胞凋亡。方法:采用Hoechst 33258染色法检测人结肠癌细胞株HCT116(p53野生型)和SW480(p53突变型)经Sulfone处理后的细胞凋亡率。运用Western印迹法检测上述细胞经Sulfone处理前后XAF1、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和ERK1/2总蛋白质的表达量变化。通过双重荧光素酶报告基因检测Sulfone对XAF1启动子转录活性的调节作用。结果:Sulfone能诱导HCT116和SW480细胞凋亡,其效应随剂量的增加和时程的延长而更明显。Sulfone能有效抑制上述两种细胞中ERK1/2蛋白的磷酸化(抑制率分别为74%和57%,P<0.05),但上调XAF1蛋白的表达(2.2倍和3.1倍,P<0.05)。经Sulfone处理后,XAF1启动子的转录活性在HCT116和SW480细胞分别提高了3.3倍(P<0.01)和2.6倍(P<0.05)。结论:Sulfone通过抑制ERK途径,在转录水平显著上调XAF1的表达进而诱导细胞凋亡,且这种作用的强弱与肿瘤细胞的p53分型有关。
- 卢君瑶李薇薇徐琛莹蔡劬俞丽芬
- 关键词：结肠癌SULFONE凋亡
- 雌激素受体β通过调节AMPK/mTORC1轴的作用诱导结肠癌细胞自噬被引量：8
- 2013年
- 目的:探讨雌激素受体(ER)β诱导结肠癌细胞自噬的作用机制。方法:将ERβ质粒转染人结肠癌细胞株HCT116(p53野生型)和SW480(p53突变型)后,通过荧光显微镜观察自噬现象;采用蛋白印迹法检测LC3-Ⅱ蛋白、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、AMPK和p70S6K蛋白及相应磷酸化蛋白的表达变化;应用实时定量PCR法检测DRAM1、Sestrin1和Sestrin2的mRNA表达变化。结果:ERβ过表达能促进HCT116和SW480细胞发生自噬;LC3-Ⅱ和p-AMPK蛋白在HCT116细胞中分别上调了2.81倍和1.80倍(P<0.05);在SW480细胞中分别上调了1.70倍和2.48倍(P<0.05)。p-mTOR和p-p70S6K蛋白的表达水平在HCT116细胞中分别下降了29.52%和34.54%,在SW480细胞中分别下降37.89%和41.86%。除了Sestrin1 mRNA在SW480细胞中的表达无变化外,DRAM1和Sestrin2 mRNA的表达量在2种细胞中均显著上调(P<0.05)。结论:ERβ可通过对AMPK/mTORC1轴的调节作用诱导结肠癌细胞发生自噬。
- 徐琛莹李薇薇秦溶俞丽芬
- 关键词：结肠癌雌激素受体Β自噬
- 人结肠癌细胞株HCT116中雌激素受体β与mTOR基因相互作用的初步研究被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨雌激素受体β(ERβ)在人结肠癌细胞株HCT116中的表达及其与mTOR基因的相互关系。方法:分别采用ERβ质粒转染(联合或不联合ERβ激动剂)、siRNA干扰mTOR基因、5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)处理HCT116细胞株;通过实时定量PCR法检测各处理组细胞中之mTOR、ERβ和cyclinD1的mRNA表达;蛋白印迹法检测p-mTOR、mTOR、ERβ和cyclinD1的蛋白表达。结果:HCT116细胞株转染ERβ质粒后,无论是否存在ERβ激动剂,都可明显下调p-mTOR和cyclinD1的蛋白表达水平,但是mTOR蛋白的表达却无变化。siRNA干扰细胞的mTOR基因后,ERβ表达明显增加而cyclinD1的mRNA和蛋白表达水平均下降。5-aza-dC处理后,能明显促进HCT116细胞株中ERβ的表达,mTOR基因在mRNA和蛋白水平的表达都无明显差异,但p-mTOR的蛋白水平降低,cyclinD1的mRNA和蛋白表达水平都下降。结论:ERβ和mTOR之间具有负相互调节作用;HCT116细胞中亦存在ERβ启动子甲基化的现象。这为ERβ及其特异性激动剂和mTOR抑制剂的联合应用防治结肠肿瘤提供了初步的实验依据。
- 许慈俞丽芬蔡劬卢君瑶钟捷
- 关键词：雌激素受体Β哺乳动物雷帕霉素靶蛋白结肠直肠癌
