国家自然科学基金(81101261)
- 作品数：3 被引量：17H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠DAF蛋白真核表达载体的构建及生物活性鉴定
- 2013年
- 目的构建大鼠促衰变因子(DAF)的酵母真核表达载体,诱导其表达并对生物学特性进行鉴定。方法采用RT-PCR技术从大鼠肝脏组织中扩增出DAF基因并克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K质粒中。经酶切鉴定后,将pPIC9K-DAF转化至毕赤酵母菌GS115,通过G418-YPD平板筛选高拷贝转化子。转化子经甲醇诱导表达后,对表达的DAF蛋白进行SDS-PAGE及Western blot鉴定并检测重组蛋白的生物活性。结果成功克隆大鼠DAF基因,并筛选出pPIC9K载体中的DAF阳性克隆,证实所获得相对分子质量约为70×103大小的重组蛋白具有大鼠DAF蛋白的抗原性和生物学活性。结论采用分子克隆的方法成功构建大鼠DAF蛋白的毕赤酵母真核表达载体,能为补体及免疫研究提供高效的大鼠DAF蛋白来源。
- 王巍张立张朋
- 关键词：毕赤酵母真核表达PPIC9K
- 环孢霉素A调控高脂血症大鼠血管内皮LOX-1表达的机制研究被引量：1
- 2014年
- 目的观察环孢霉素A(CsA)对高脂血症大鼠血管内皮凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响及其机制。方法首先建立高脂血症大鼠模型,然后分别采用高〔5mg/(kg·d)〕、低〔1mg/(kg·d)〕剂量的CsA对高脂血症大鼠进行灌胃7d,正常血脂的大鼠(正常对照组)及单纯高脂血症模型组于同时点用等量生理盐水灌胃。干预结束后,分别采用Western blot、免疫组织化学方法观察大鼠胸主动脉血管内皮上LOX-1和C-反应蛋白(CRP)蛋白的表达,并采用试剂盒检测血清中氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)以及活性氧簇(ROS)的表达水平。结果与单纯高脂血症模型组相比,不同剂量的CsA均可上调高脂血症大鼠血管内皮细胞上LOX-1的表达(P<0.05),而对血清中ox-LDL的表达没有明显影响(P>0.05);不同剂量组CsA均可增加高脂血症大鼠血管内皮上CRP的表达以及血清中ROS的表达水平,以高剂量组最明显(P<0.05)。结论在高脂环境中,CsA除了能通过上调ox-LDL血清水平刺激LOX-1上调外,还能通过激活CRP和ROS途径上调LOX-1的表达水平,这些因素可能促进动脉粥样硬化的发生。
- 吴厚苛王巍李虹步宏张朋
- 关键词：环孢霉素A凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1高脂血症活性氧簇
- 息肉样子宫内膜异位症临床病理分析被引量：16
- 2014年
- 目的探讨息肉样子宫内膜异位症的临床病理学特征、鉴别诊断及发病机制。方法收集6例息肉样子宫内膜异位症的临床及病理资料,采用HE及免疫组化染色,分析其组织形态学及免疫表型,并复习相关文献。结果患者主因阴道出血、卵巢肿块就诊,平均年龄41.3岁。病变主要位于卵巢子宫内膜囊肿内、阴道后穹窿、直肠前壁及左侧阔韧带后叶。眼观:均为类圆形息肉样肿块,切面灰白、灰红色,质软,4例病变单发,2例多发。镜检:病变由子宫内膜样腺体及类似子宫内膜间质细胞的短梭形细胞构成,伴成簇的厚壁血管。腺上皮及间质细胞均无非典型性,核分裂象少见。免疫表型:腺上皮细胞ER、PR、CKpan阳性;间质细胞ER、PR、vimentin、CD10阳性,腺上皮细胞及间质细胞Ki-67增殖指数<5%。截止随访日期均未见患者复发。结论息肉样子宫内膜异位症是子宫内膜异位症的一种罕见亚型,具有独特的临床病理及分子遗传学特征,在临床及病理诊断中易误诊为恶性肿瘤,需与Müllerian腺肉瘤、卵巢宫内膜样腺癌、苗勒管乳头状瘤和纤维上皮性息肉等相鉴别。
- 徐炼杨开选王巍江炜李雷于娜何英
- 关键词：子宫内膜异位症临床病理特征
