湖北省科技攻关计划(2007AA301B32-2)
- 作品数：4 被引量：37H指数：3
- 相关作者：王建军潘永成刘全付校杨光海更多>>
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- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人肺腺癌多药耐药细胞系A549/cDDP的建立及相关基因表达检测被引量：1
- 2009年
- 背景与目的现有研究表明,肺癌细胞多药耐药造成的化疗失败是影响患者生存率的主要原因。本研究旨在建立人肺癌多药耐药细胞系,研究其耐药特性和机制。方法应用人肺腺癌细胞株A549,采用顺铂(cDDP)大剂量间歇诱导法,建立多药耐药细胞系A549/cDDP。相差显微镜观察细胞形态和结构差异,绘制两种细胞的体外生长曲线。用MTT法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的多药耐药性,采用流式细胞术检测该耐药细胞表面多耐药基因(MDR)的表达产物P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH/GST)的表达情况,应用RT-PCR检测MDR、MRP基因表达水平。结果A549/cDDP对多种抗癌药物耐药,各种抗癌药物IC_(50)显著提高:(70.5±4.9)%的A549/DDP细胞表面P-gp表达阳性,而对照细胞A549表达仅为(42.4±5.6)%;(29.4±2.9)%的A549/DDP细胞表面MRP表达阳性,而对照细胞A549表达仅为(21.4±3.5)%,二者有差异(t=11.94; t=5.56,P均<0.01);A549/cDDP和A549细胞的GSH/GST表达无明显变化(P>0.05)。RT-PCR检测发现A549/cDDP中的MDR mRNA及MRP mRNA高表达。结论建立的A549/cDDP具有明确的多药耐药性,其多药耐药基因MDR mRNA及MRPmRN4表达升高。
- 潘永成赵伟刚王建军刘全杨光海李劲松
- 关键词：肺肿瘤多药耐药基因表达
- 单双侧肺减容术的临床比较被引量：3
- 2008年
- 目的比较单双侧肺减容手术围手术期死亡率与并发症。方法56例行肺减容手术的患者,分为单侧肺减容组36例和双侧肺减容组20例,比较两组的死亡率、并发症、住院时间。结果36例单侧肺减容术死亡1例,围手术期死亡率为2.8%,20例双侧肺减容术死亡3例,围手术期死亡率为15.0%;术后平均住院天数单侧肺减容术(16.5d)较双侧肺减容术(21.0d)极显著缩短(P<0.01)。结论虽然双侧肺减容术在改善患者肺功能方面优于单侧肺减容术,但是围手术期死亡率与并发症却比单侧肺减容术明显增高。
- 付校潘永成王建军
- 关键词：肺气肿肺减容术并发症
- Beclin1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义被引量：18
- 2008年
- 目的检测人非小细胞肺癌标本中自噬相关基因Beclin1的表达并讨论其意义及与细胞病理类型和临床分期的关系。方法采用免疫荧光染色、RT-PCR和Western blot法检测54例非小细胞肺癌的肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织Beclin1蛋白、mRNA表达。结果免疫荧光染色显示Beclin在肺癌组织中表达较低,表达率为8.3%,显著低于癌旁和正常组织(P=0.00)。Beclin1 mRNA在肺癌、癌旁及正常组织中的相对表达量为1.302±0.074、1.691±0.100、1.673±0.081(F=6.6,P=0.002),Western blot检测Beclin1蛋白在肺癌、癌旁、正常组织中的相对表达量分别为3.489±0.293、5.306±0.459、6.329±0.580(F=9.73,P<0.01)。Beclin1蛋白和mRNA表达与肺癌病理组织类型和临床分期无明显关系。结论Beclin1蛋白和mRNA表达在肺癌组织中明显低于癌旁和正常组织,表达量的差异有统计学意义,在癌旁和正常肺组织中表达接近。
- 刘全王建军潘永成孟利峰詹曦郑庆丰
- 关键词：自噬BECLIN1非小细胞肺癌
- 自噬在长春瑞滨诱导的肺癌细胞A549死亡中的作用被引量：16
- 2008年
- 背景与目的已有的研究表明,很多药物可以诱导肿瘤细胞发生自噬。本研究旨在明确自噬在肺癌A549细胞长春瑞滨处理过程中的存在,研究自噬在长春瑞滨诱导的A549细胞死亡中的作用。方法MTT法检测细胞生存率;激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分别定性及定量检测自噬特异性蛋白LC3的表达;AnnexinV-FITC流式细胞术检测细胞凋亡;自噬特异性阻断剂3-甲基腺嘌呤和长春瑞滨共同作用细胞后用MTT法和流式细胞术检测细胞死亡率和凋亡率的变化。结果长春瑞滨处理肺腺癌细胞早期(24h内)可出现明显的自噬性变化,自噬高峰期出现在长春瑞滨诱导(6-12)h,在长春瑞滨给药前阻断自噬,长春瑞滨对A549细胞的毒性作用增强,而在其给药后阻断自噬则长春瑞滨对A549细胞的细胞毒性作用有所减弱。结论长春瑞滨可以诱导肺癌A549细胞自噬,在长春瑞滨给药前期,自噬对细胞有保护作用,可以延迟凋亡的发生;而在长春瑞滨给药后期,自噬则作为一种细胞的的死亡程序,与凋亡一起促进细胞死亡。
- 付校潘永成王建军刘全杨光海李劲松
- 关键词：A549细胞自噬凋亡
