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人肝癌细胞2-DE实验技术条件优化: 2012年; 双向凝胶电泳（two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）是目前比较蛋白质组学研究中最常用蛋白质的技术,通过利用蛋白质的等电点与分子量特性将蛋白质分离,与质谱技术（mass spectrometry,MS）联用,已被广泛应用于分析细胞或组织样品中整体蛋白质表达的差异情况〔1-2〕。然而实验操作过程中,; 韦艳张海英梁钢; 关键词：双向凝胶电泳人肝癌细胞

EGCG逆转肝癌耐多药差异基因表达被引量：3: 2011年; 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)逆转人肝癌细胞耐多药的机制,为进一步在基因转录水平上高通量筛选逆转肝癌耐多药天然药物提供一定的参考依据。方法采用人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶Bel-FU细胞,甲基四唑蓝法检测耐药Bel-FU细胞的耐多药性及对EGCG进行体外细胞毒性试验;选择与肝癌发生发展相关途径的42个功能基因作为检测基因,采用实时定量PCR微阵列技术检测Bel-7402组、Bel-FU组、Bel-FU+EGCG作用组基因表达;实时定量PCR检测相同条件下处理的基因Hras、MDR1表达变化以验证微阵列技术结果。结果耐药细胞Bel-FU对5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、长春新碱、阿霉素、柔红霉素的耐药指数分别为:89.6、3.9、37.2、16.5、3.7;EGCG对细胞Bel-FU的IC50、IC10值分别为587.4、73.1μg/mL;实时定量PCR微阵列检测结果显示:与Be-7402组比较,Bel-FU组中有5个基因上调;与Bel-FU组比较,Bel-FU+EGCG作用组有5个基因下调,其中有3个基因为Bel-7402组与Bel-FU组之间的差异基因;实时定量PCR验证结果:Bel-FU组中基因Hras、MDR1表达为Bel-7402组中的2.84、2.74倍,与Bel-FU组比较,Bel-FU+EGCG组作用中基因Hras、MDR1表达分别下调3.21、3.74倍。结论 EGCG对人肝癌耐多药细胞Bel-FU具有一定逆转作用。; 韦艳张海英梁钢; 关键词：肝细胞癌耐多药

槲皮素逆转人肝癌细胞MDR作用的研究被引量：9: 2012年; 目的:在基因转录水平上探讨槲皮素逆转人肝癌多药耐药(MDR)的作用机制。方法:采用体外培养人肝癌耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU,MTT法测定槲皮素的体外细胞毒性及浓度依赖的逆转耐药作用。实时定量PCR以及Westernblot检测槲皮素作用后细胞中基因mdr1、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)、H-ras和P-糖蛋白(P-gp)的表达变化。结果:槲皮素对Bel-FU细胞的IC10和IC50分别为58.2、193.9μmol/L。16.5、33.0、49.5μmol/L的槲皮素对Bel-FU的逆转耐药倍数分别为1.14、1.68、2.38倍;槲皮素可下调耐药细胞中基因mdr1、MRP、GST-π、H-ras表达(P<0.05),下调倍数分别为0.38、0.27、0.36、0.42,而对TopoⅡα无影响(P>0.05)。槲皮素可下调P-gp蛋白在耐药细胞中的表达量(P<0.05)。结论:槲皮素可下调耐药细胞中耐药相关基因的表达量,从而逆转人肝癌细胞的多药耐药性。; 韦艳张海英梁钢; 关键词：槲皮素 P糖蛋白多药耐药相关蛋白质类印迹法蛋白质

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广西地方性高发疾病防治研究重点实验室基金(8042009-K6)