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三角褐指藻甘油兼养条件下甘油激酶的功能研究被引量：5: 2015年; 本研究利用RT-PCR结合RACE方法扩增出了三角褐指藻甘油激酶(PtrGK)基因全长cDNA序列,其完整ORF为2079bp,编码692个氨基酸.基于上述序列构建了甘油激酶原核表达载体.构建反向互补RNA干扰载体并转化野生型三角褐指藻,得到含有甘油激酶反向互补干扰结构的转基因藻.研究表明:其甘油激酶表达水平、利用某油速率和细胞分裂速度都较野生型藻有了较大程度的下降.说明甘油激酶对三角褐指藻甘油兼养生长的重要作用.; 陈波黄龙郭婷卿人韦; 关键词：RNAI 生物能源

二酰基甘油转移酶对三角褐指藻油脂积累及相关环境因子响应的研究被引量：4: 2012年; 本文应用RT-PCR和RACE方法扩增出三角褐指藻二酰基甘油转移酶(Ptdgat)全长cDNA,其完整编码框(ORF)为1587 bp,编码528个氨基酸.基于克隆所得Ptdgat的ORF构建了反向互补RNA干扰载体,并用基因枪PDS-1000/He转化野生型三角褐指藻,筛选到了所需的阳性转基因藻.实时荧光定量PCR(qPCR)结果揭示:含Ptdgat RNA干扰结构的转基因藻的二酰基甘油转移酶的表达水平比野生型三角褐指藻该酶的表达水平有显著降低;野生型藻和转基因藻的油脂含量定量分析结果揭示:含RNAi干扰结构的转基因三角褐指藻油脂含量也明显低于野生型三角褐指藻.另外本文也揭示了适当浓度的外源培养因子铁、硅和脱落酸(ABA)提高了三角褐指藻Ptdgat基因的表达水平及其油脂含量.; 凃丽于广欣陈波曲芳兵冷鹂兰利琼卿人韦; 关键词：三角褐指藻 RNAI 生物柴油

三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)油脂富集培养的研究被引量：6: 2011年; 探讨了营养盐铁、硅及植物激素脱落酸(ABA)单因子对三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)的生长、油脂含量(%干重)及油脂产量的影响.采用光密度值OD_(450)评价微藻的生长状况,以溶剂浸提法提取油脂.结果表明:(1)铁处理组中,铁浓度在0～46.57umol/L范围内时,藻的生长速率随铁浓度提高而增大;铁浓度为11.64μmol/L时,油脂含量达30%,高于其它铁浓度培养;当铁浓度为11.64μmol/L时,油脂产量最高——是无铁培养的2.8倍;(2)硅处理组中,低含量硅盐(4.6μmol/L)不仅促进了藻的生长而且提高了油脂含量,油脂产量比高含量硅盐(42.6μmol/L)培养提高了40%;(3)ABA处理组中,1 mg/L ABA不仅促进了藻的生长而且提高了油脂含量,油脂产量比对照提高了50%;5 mg/L ABA虽提高了油脂含量但却抑制了藻的生长,油脂产量和对照相当;15 mg/L ABA抑制了藻的生长、降低了油脂含量.用气相色谱分析微藻的脂肪酸组成,结果显示:1 mg/L ABA明显影响了三角褐指藻的脂肪酸组成,以高产量油脂(4.6μmol/L硅盐、1 mg/L ABA培养)为原料制备出的生物柴油的质量将会提高.; 王晓青王嫁江雪涂丽李湘兰利琼卿人韦; 关键词：油脂铁硅三角褐指藻

雨生红球藻质体球滴结构蛋白基因的克隆与原核表达被引量：5: 2012年; 叶绿体或者有色体中的质体球滴结构(Plastoglobules)是多数植物的类胡萝卜素等次生代谢产物积累的场所,但在能大量积累虾青素的雨生红球藻中,这个结构一直没有得到确认。通过透射电子显微镜观察发现雨生红球藻的质体内确切存在plastoglobules结构;并通过RT-PCR结合RACE技术,从雨生红球藻cDNA文库中克隆到了与编码plastoglobules的结构蛋白(Plastoglobulin)具有高度同源性的基因序列全长,称做Hpgp基因;该基因的表达产物称之为雨生红球藻质体球滴蛋白(HPGP;Haematococcus plastoglobules pro-tein);并进一步利用原核表达系统将该编码基因进行原核诱导表达,用His-Tag蛋白分离纯化系统纯化到了目标蛋白,并用该His-Tag融合蛋白为抗原免疫实验兔,制备到了相应的一抗抗体,为下一步对该蛋白的功能阐明以及雨生红球藻的虾青素积累机制研究提供重要的基础。; 范勇于广欣汪乐霓曲芳兵冷鹂兰利琼卿人韦; 关键词：雨生红球藻虾青素原核表达

镉对三角褐指藻生化组分及光合效能的影响被引量：2: 2013年; 以三角褐指藻为实验材料,研究了不同浓度Cd2+对三角褐指藻生化组分及光合效能的影响.测定了Cd2+处理三角褐指藻16 d后细胞密度、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、叶绿素a含量、最大光能转化效率(F v/F m)、实际光能转化效率(Yield)等指标.结果显示,0.1μmol/L Cd2+和1μmol/L Cd2+处理组对三角褐指藻各项指标都具有促进作用,其中0.1μmol/L Cd2+处理组的促进作用最明显,细胞密度、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、叶绿素a含量分别为对照组的1.12、1.35、1.29和1.22倍;F v/F m和Yield与对照组相比也有显著提高.实验表明,三角褐指藻可以通过自身代谢的调整来适应一定浓度的Cd2+;低浓度镉在一定程度上促进了三角褐指藻细胞代谢,增强了其光合作用效能.; 曲芳兵陈波代易颖郭婷兰丽琼卿人韦; 关键词：三角褐指藻镉生化组分光合效能

Cloning and Phylogenetic Analysis of a Fatty Acid Elongase Gene from Nannochloropsis oculata CS179被引量：4: 2009年; Nannochloropsis oculata CS179, a unicellular marine microalga, is rich in long-chain polyunsaturated fatty acids (LCPUFAs). Elongase and desaturase play a key role in the biosynthesis of PUFAs. A new elongase gene, which encodes 322 amino acids, was identified via RT-PCR and 5' and 3' RACE. The sequence of the elongase gene was blast-searched in the NCBI GenBank and showed a similarity to those of the cryptosporidium. But the NJ-tree revealed that the N. oculata CS179 elongase clustered with those of the microalgae Phaeodactylum tricornutum, Ostreococcus tauri and Thalassiosira pseudonana.; MA XiaoleiYU JianzhongZHU BaohuaYANG Guanpin; 关键词：微绿球藻脱氢酶海洋微藻 NCBI

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国家高技术研究发展计划(2007AA09Z427)