黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11531223)
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 相关作者：刘岩杨德军王科亮王晓民徐万海更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第四医院哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- B-7.1转基因细胞株的表达和检测
- 2011年
- 目的构建B-7.1基因真核表达载体并导入CAK-1肾细胞癌细胞表达,为进一步研究基因的功能做材料准备。方法采用RT-PCR方法,以正常肝脏组织cDNA为模板,扩增B-7.1基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中,将其导入CAK-1肾细胞瘤细胞,对转染后的细胞进行RT-PCR和Western blot分析。结果经过克隆测序结果证实,我们成功将B-7.1读码框架插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位点,并且,与pCDNA3空载体转染对照细胞相比,pCDNA3-B-7载体转染的CAK-1细胞中B-7基因无论是mRNA水平还是蛋白水平均有明显升高。结论 B-7.1转基因细胞株的成功构建和检测,为深入研究B-7.1蛋白的生物学功能奠定了材料基础。
- 刘岩王科亮杨德军
- 关键词：肾细胞癌转基因
- B7-1转基因细胞株的表达和检测
- 2011年
- 目的构建B7-1基因真核表达载体并导入CAK-1肾癌细胞表达,为进一步研究基因的功能做材料准备。方法采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,以正常肝脏组织cDNA为模板,扩增B7-1基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中,将其导入CAK-1肾细胞瘤细胞,对转染后的细胞进行RT-PCR和Western blot分析。结果克隆测序结果证实,B7-1读码框架被成功插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位点,与pCDNA3空载体转染对照细胞相比,pCDNA3-B-7载体转染的CAK-1细胞中B-7基因mRNA水平和蛋白水平均有明显升高。结论 B7-1转基因细胞株的成功构建和检测,为深入研究B7-1蛋白的生物学功能奠定了材料基础。
- 刘岩王科亮杨德军
- 关键词：B7-1转基因
