福建医科大学科学研究发展基金(FJGXY04035)
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
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- 氧化损伤对内皮细胞内质网应激相关蛋白表达的影响被引量：7
- 2010年
- 目的:通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立体外氧化应激的细胞凋亡模型,观察氧化损伤对内皮细胞内质网应激(ER stress)相关蛋白表达的影响。方法:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-24 h,MTT法观察t-BHP作用后细胞的存活率;Hoechst/PI染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态;Western blotting检测ER应激标志物肌醇需求激酶1α(IRE1α)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达情况。结果:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-24 h后,发现随着t-BHP作用浓度的增加和时间的延长,细胞活力逐渐下降;不同浓度t-BHP处理8 h后,t-BHP大于25μmol/L时,细胞凋亡率明显增加(6.3%±0.6%、16.1%±0.9%、24.7%±1.5%、23.8%±1.3%,P<0.05);ER应激相关信号蛋白IRE1α、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)及凋亡蛋白caspase-3表达增加。结论:氧化应激可导致内皮细胞发生凋亡,可能与引起内质网应激相关信号蛋白的表达有关。
- 刘鲁豫王燕萍王林曦刘小莺唐莉刘晓红刘礼斌
- 关键词：氧化性应激内质网应激细胞凋亡人脐静脉内皮细胞
- 氧化应激对内皮细胞NF-κB、iNOS和NO信号表达的影响被引量：9
- 2010年
- 目的观察氧化剂第三丁基过氧化氢(t-BHP)对体外培养的内皮细胞存活率及核转录因子κB(NF-κB)、iNOS和一氧化氮(NO)的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用不同浓度的t-BHP处理,具体如下:(1)检测细胞存活率。t-BHP作用浓度分别为12.5,25,50,100μmol/L,作用时间分别为30,60,90,120 min,采用MTT法观察;(2)检测NF-κB p65、iNOS蛋白表达量及细胞内NO水平。t-BHP的作用浓度为50μmol/L,作用时间分别为30,60,90,120 min,采用Western blot测NF-κB p65、iNOS蛋白表达量,Griess化学显色法测细胞内NO水平;(3)iNOS抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME,600μmol/L)预处理内皮细胞24 h,用Griess化学显色法检测细胞内NO水平。结果 t-BHP可降低内皮细胞的存活率,且呈时间及剂量依赖性,50μmol/Lt-BHP作用30 min细胞核NF-κB活化片段p65蛋白表达达高峰,作用60 min细胞质iNOS蛋白达高峰;iNOS抑制剂L-NAME可明显抑制内皮细胞NO升高。结论氧化应激可引起内皮细胞损伤,其效应可能通过NF-κB-iNOS-NO途径介导。
- 何姜陈闽刘小莺王燕萍刘礼斌
- 关键词：脐静脉内皮细胞核因子ΚB诱导型一氧化氮合酶一氧化氮
