北京市自然科学基金(7042028)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- HIV／AIDS患者疾病进程与CD4^＋CD25^hi调节性T细胞之间相关性研究被引量：2
- 2009年
- 目的通过分析不同阶段HIV感染者外周血CD4^＋CD25^hi调节性T细胞（CD4^＋CD25^hi regulatory T cells，Treg cells）与外周血免疫状态和病毒载量的相关性，探讨Treg细胞对HIV／AIDS发病进程的影响。方法采集116例HIV感染者和21例正常人对照外周血，用4色流式细胞术进行CD4^＋和CD8^＋T细胞绝对数计数；用3色流式细胞术进行Treg细胞测定；用荧光定量PCR法进行HIVRNA载量测定。实验数据用回归统计学方法和T检验方法进行分析。结果HIV感染者外周血Treg细胞频率在HIV感染初期显著下降，之后随着疾病的进程逐渐升高。在CD4^＋T细胞大于300／μl的患者低于正常对照组，在CD4^＋T细胞小于100/μm的患者高于正常对照组，差异具有统计学意义。Treg细胞频率与CD4^＋T淋巴细胞绝对数和CD4v／CD8^＋之间均呈负相关，其相关系数r和P值各为r=-0．564，P〈0．001和r=-0．377，P〈0．001；Treg细胞频率与血浆HIV病毒载量呈正相关，其相关系数r=0．514，P〈0．001。结论CD4^＋CD25^hi Treg细胞可能是参与艾滋病免疫发病机理的重要细胞，在HIV感染发病进程的不同阶段具有不同的意义，其确切机制有待进行进一步研究。
- 宋淑静冯鑫郭晶晶刘亚楠伦文辉魏红山刘顺爱
- 关键词：T淋巴细胞
- 抗HBsAg×抗CD3 diabody-cIFN原核表达及活性鉴定
- 2008年
- 目的构建人源抗乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)×人源化抗CD3双特异双链抗体(diabody)与重组复合干扰素(consensus Interferon,cIFN)的融合蛋白(抗HBsAg×抗CD3 diabody-cIFN,简称S×3Db-cIFN)的表达载体,在原核表达系统中进行表达,并鉴定表达蛋白的活性。方法对相关的模板重组载体进行限制性内切酶消化和T4连接酶的连接,构建目的重组载体pRA-cIFNSHOL和pRA-OHSL,经测序鉴定后分别转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,用SDS-PAGE和Western blotting进行表达鉴定,用GuHCl阶段透析法重新折叠获得目的蛋白S×3Db-cIFN。用ELISA和流式细胞术进行S×3Db-cIFN的抗HBsAg抗体活性和抗CD3抗体活性。结果成功构建了表达载体pRA-cIFNSHOL和pRA-OHSL,并实现了大肠杆菌中的高效表达和表达后的重新折叠,获得了目的蛋白S×3Db-cIFN,蛋白复性率为24%。用ELISA和流式细胞术初步鉴定融合蛋白的活性,结果显示S×3Db-cIFN具有明显的抗HBsAg抗体活性和抗CD3抗体活性。结论用基因工程方法成功制备了人源(化)抗HBsAg×抗CD3 diabody与cIFN的融合蛋白,此融合蛋白具有抗HBsAg抗体活性和抗CD3抗体活性,有可能成为有效的抗HBV免疫导向药物,有待进一步探讨其应用价值。
- 刘顺爱郭晶晶余康康刘志英冯鑫徐道振
- 关键词：HBSAGCD3
