上海市科学技术发展基金(014119065)
- 作品数：10 被引量：53H指数：4
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- 三硝基苯磺酸诱导大鼠慢性胰腺炎模型的建立被引量：9
- 2003年
- 为研究慢性胰腺炎的发病机制和治疗措施[1] ,从三硝基苯磺酸(trinitrobenenze sulfonic acid, TNBS)成功地诱导慢性炎症性肠病和慢性硬化性胆管炎动物模型[2]实验中得到启示,我们通过胰管内注入TNBS建立了与人类慢性胰腺炎胰腺纤维化病理改变过程类似的实验动物模型.
- 王兴鹏龚自华吴凯张汝玲
- 关键词：三硝基苯磺酸慢性胰腺炎动物模型
- 胰腺星状细胞在大鼠胰腺纤维化形成中的作用被引量：13
- 2003年
- 目的 动态观察三硝基苯磺酸 (TNBS)胰管内注射诱导大鼠胰腺纤维化过程中胰腺星状细胞 (PSC)的活化情况 ,并研究PSC相关介质转化生长因子 β1(TGF β1)、基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )和Ⅰ型胶原蛋白表达 ,探讨PSC在胰腺纤维化形成过程中的作用。方法 通过胰管内注射含 2 %TNBS的乙醇磷酸盐缓冲液诱导大鼠胰腺纤维化模型 ,并分别于术后 72h和 3、4、5、6、7周处死大鼠 ,留取胰腺组织。胰腺组织切片经HE染色 ,光镜下观察病理学变化。分别用免疫组化、RT PCR、Westernblot检测胰腺组织α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)、TGF β1、MMP 2mRNA和Ⅰ型胶原蛋白表达 ;电镜观察不同时点胰腺组织超微结构变化。结果 2 %TNBS胰管内注射后早期主要以胰腺组织炎症、水肿、坏死为主 ,3周后则以纤维组织增生、腺泡萎缩、胶原沉积等纤维化表现为主 ,以第 4周为甚。第 3周时α SMA表达量较少 ,第 4周时则显著增多 ,而后又渐减。第 3周时胰腺组织TGF β1蛋白表达显著增加 ,4周时达峰值。正常胰腺组织仅有极微量MMP 2mRNA表达 ,而制模早期胰腺组织即有MMP 2mRNA表达显著增加 ,随时间延长其表达量呈波动性变化 ,但仍明显高于正常。正常胰腺组织间质有少量Ⅰ型胶原表达 ,而在胰腺纤维化区域则可见大量Ⅰ型胶原沉积。
- 王兴鹏张汝玲龚自华吴恺
- 关键词：胰腺星状细胞三硝基苯磺酸胰腺纤维化慢性胰腺炎
- 血管紧张素Ⅱ对大鼠胰腺纤维化过程中细胞凋亡的调节作用被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨洛沙坦对TNBS诱导大鼠实验性胰腺纤维化形成过程中胰腺腺泡细胞凋亡的影响及可能机制。方法 雄性SD大鼠 10 0只随机分为正常组、对照组、治疗组 ,采用胰管内注射 2 %三硝基苯磺酸 (TNBS)诱导大鼠胰腺纤维化模型。治疗组每天给予洛沙坦 (10mg/kg)灌胃 ;对照组给予等容积的无菌蒸馏水。观察胰腺组织病理改变 ;TUNEL法原位检测凋亡胰腺腺泡细胞密度 ;透射电镜观察胰腺组织细胞形态学变化 ;逆转录 -多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测Bcl 2凋亡相关基因家族成员Bcl 2、Bcl XL、Bak、BaxmRNA表达。结果 洛沙坦治疗可逆转胰腺组织炎症细胞浸润、腺泡萎缩等异常改变。对照组大鼠胰腺腺泡细胞凋亡较正常大鼠明显增加 ,胰腺组织Bax、BakmRNA表达较正常增加 ,Bcl 2mRNA表达降低 ,Bcl XLmRNA不表达 ;洛沙坦治疗后凋亡减少 ,洛沙坦治疗组Bax、Bcl 2mRNA表达及Bax/Bcl 2较对照组降低 ,Bak、Bcl XLmRNA不表达。结论 TNBS诱导大鼠胰腺纤维化形成过程中胰腺腺泡细胞凋亡增加 ;洛沙坦阻断 1型血管紧张素Ⅱ受体 (AT1R)可抑制其凋亡 ,其机制可能与调控bcl 2凋亡相关基因表达有关。由此可见 。
- 张汝玲王兴鹏吴恺吴丽颖董育玮
- 关键词：胰腺纤维化细胞凋亡
- 1型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂抑制大鼠胰腺纤维化形成被引量：4
- 2005年
- 目的 探讨1型血管紧张素Ⅱ受体(AT1)拮抗剂洛沙坦对大鼠实验性胰腺纤维化形成 的抑制作用。方法 胰管内注射2%三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠胰腺纤维化模型。于制模后第2 天,治疗组给予洛沙坦(10mg/kg体重)灌胃,每日1次,对照组给予等容积的无菌蒸馏水。于制模后 3,7,14,21,28d分别处死两组大鼠(每时点各6只),并留取血清和胰腺组织。通过HE染色和Van Gieson(V G)染色观察胰腺组织病理学改变和细胞外基质胶原纤维分布。分别应用放射免疫法和酶 动力法测定血清透明质酸(HA)和淀粉酶。胰腺组织AT1受体蛋白和mRNA表达分别采用免疫组 化和逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法。结果 洛沙坦可抑制TNBS诱导的大鼠胰腺纤维化 形成,降低胰腺组织炎症细胞浸润、腺泡细胞坏死及纤维化程度,并且能降低血清HA和淀粉酶水 平、下调AT1受体基因和蛋白的表达。结论 1型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对TNBS诱导的大鼠胰 腺纤维化形成具有抑制作用,表明肾素 血管紧张素系统(RAS)在慢性胰腺炎胰腺纤维化的发生发展 过程中起重要的介导调节作用。
- 张汝玲王兴鹏吴恺龚自华吴丽颖董育玮
- 关键词：胰腺纤维化慢性胰腺炎肾素-血管紧张素系统
- 核因子-κB在血管紧张素II介导的大鼠胰腺纤维化发生中的作用被引量：5
- 2004年
- 目的 :探讨NF -κB在血管紧张素II介导的大鼠胰腺纤维化发生中的作用。方法 :SD大鼠 (2 0 0 -30 0g)随机分为正常组、对照组、治疗组。大鼠胰管内逆行注射 2 %三硝基苯磺酸 (TNBS)复制胰腺纤维化模型。于造模后第 1d始 ,治疗组给予洛沙坦灌胃 (10mg·kg-1·d-1) ,模型组给予等量的无菌蒸馏水。分别采用免疫印迹、免疫组化和TransAMTM方法检测胰腺组织NF -κB表达、分布和活化情况。采用硫堇蓝 (toluidineblue)染色和透射电镜观察肥大细胞数量、分布和活化脱颗粒现象。RT -PCR研究胰腺组织细胞间粘附分子 (ICAM - 1)mRNA表达。结果 :造模后第 3d大鼠胰腺组织NF -κBp6 5蛋白表达及其活性增加 ,第 7d达峰值 [(0 4 0 6± 0 0 86 )mg/g总蛋白 ]。对照组大鼠胰腺组织中肥大细胞活化 ;ICAM - 1mRNA表达于第 3d和第 7d增加。洛沙坦可抑制NF -κB蛋白表达和肥大细胞活化、下调ICAM - 1mRNA表达。结论 :血管紧张素II在大鼠胰腺纤维化形成早期可能通过受体AT1途径促发炎症反应及纤维化 。
- 张汝玲王兴鹏吴恺吴丽颖董育玮
- 关键词：胰腺纤维化
- 肥大细胞在大鼠胰腺纤维化形成中的介导作用被引量：3
- 2003年
- 目的 动态观察大鼠实验性胰腺纤维化过程中胰腺组织肥大细胞的数量和分布变化 ,并探讨其在胰腺纤维化形成中的可能介导作用。方法 经胆胰管注射 2 %三硝基苯磺酸 (TNBS)诱导大鼠胰腺纤维化模型 ,分别在术后 3d、1周和 4周处死大鼠并留取胰腺标本 ,HE染色观察胰腺组织病理学改变和纤维化程度 ;免疫组织化学染色和硫堇蓝染色观察胰腺星状细胞活化及肥大细胞的数量和分布。结果 HE染色显示 2 % TNBS注射后 3d,胰腺组织病理表现以炎症为主 ,4周时可见明显的胰腺组织纤维化形成。术后 3d组织间质中的肥大细胞数量增加 ,1周后明显增多 (P<0 .0 5 ) ;4周时脱颗粒现象明显增多 ;而在其它区域肥大细胞的数量和分布与 3d时相比未见明显差异 (P>0 .0 5 )。第 4周可见坏死纤维化区域数量较 1周时显著增加 (P<0 .0 1) ,α- SMA在正常组织中呈散在阳性分布 ,术后 3d时呈弱阳性表达 ,1周后阳性明显增强 ,主要位于坏死纤维化区域和胰管周围 ,4周时阳性明显增强 ,多位于纤维化区域。结论 肥大细胞数量增多并活化脱颗粒可能参与了胰腺纤维化的形成过程 ,该作用可能与其脱颗粒释放细胞因子 ,继而刺激胰腺星状细胞活化有关。
- 吴恺张汝玲王兴鹏
- 关键词：肥大细胞介导作用组织病理学
- 三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠胰腺纤维化的病理学演变被引量：14
- 2002年
- 目的 观察三硝基苯磺酸(TNBS)胰管内注射诱导大鼠慢性胰腺炎胰腺纤维化过程中的病理演变规律,进一步从病理学角度揭示其发生机制。方法 通过胰管内注射含2％TNBS的乙醇磷酸盐缓冲液诱导大鼠慢性胰腺炎模型,对照组仅注射等体积乙醇磷酸盐缓冲液,并于术后72h、3周、4周、5周、6周、7周处死大鼠。应用光镜、电镜观察不同时间点胰腺组织的病理学变化。结果 2％TNBS胰管注射后早期主要以胰腺组织炎症、水肿,腺泡细胞坏死等改变为主;3周后则以纤维化为主,主要表现为胰腺星状细胞活化和成纤维细胞增生,腺泡萎缩及间质内大量纤维沉积。结论 胰管内注射TNBS引起的慢性胰腺炎的病理改变是基于胰腺实质急性损伤而发生的胰腺组织再生与修复,最终形成胰腺纤维化。
- 张汝玲吴恺龚自华王兴鹏
- 关键词：三硝基苯磺酸胰腺纤维化病理学
- 1型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对胰腺星状细胞的影响被引量：2
- 2006年
- 目的探讨1型血管紧张素Ⅱ受体(AT_1)拮抗剂氯沙坦对胰腺星状细胞(PSC)的影响及其可能机制。方法①从胰腺癌患者胰腺组织中分离PSC并检测其AT_1的表达,用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和氯沙坦干预后检测其Ⅰ型胶原的表达情况。②90只雄性SD大鼠均分为正常组、对照组和治疗组。后2组胰管内注射2%三硝基苯磺酸(TNBS)制成大鼠胰腺纤维化模型。治疗组给予氯沙坦灌胃,对照组给予等容积的无菌蒸馏水。于制模后第3、7、14、21和28天分别处死大鼠,留取胰腺组织。电镜下观察胰腺组织超微结构改变；应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰腺组织转化生长因子β_1(TGFβ_1)、Ⅰ型前胶原mRNA表达；应用免疫组化法检测胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGFβ_1蛋白表达；应用Western印迹法检测胰腺组织α-SMA动态表达水平。结果体外研究显示,AT_1表达于人胰腺癌组织PSC,氯沙坦可抑制其Ⅰ型胶原的表达。体内研究表明,氯沙坦可逆转胰腺纤维化大鼠电镜下胰腺细胞异常改变；胰腺纤维化大鼠胰腺组织α-SMA、TGFβ_1和Ⅰ型前胶原表达增加,氯沙坦可下调其表达。结论AT_1拮抗剂通过阻断AT_1途径抑制PSC活化及其促纤维化作用。
- 张汝玲刘文滨王兴鹏吴恺龚自华吴丽颖董育玮
- 关键词：胰腺星状细胞纤维化
- 血管紧张素Ⅱ受体在胰腺纤维化大鼠胰腺组织中的表达及其意义
- 2005年
- 目的动态观察血管紧张素II受体在胰腺纤维化大鼠胰腺组织中的表达并探讨其可能意义。方法采用胰管内注射2%三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠胰腺纤维化模型。制模后第3、21、28、35、42、49天分别处死大鼠,每组6只大鼠。对照组仅行剖腹术而未注射TNBS。应用VanGieson(V-G)染色观察胰腺组织纤维化程度。免疫组化和RT-PCR检测胰腺组织AT1蛋白、血管紧张素II受体mRNA和TNF-αmRNA表达。结果模型组大鼠胰腺组织细胞外基质合成较对照组明显增加。胰腺组织TNF-αmRNA表达逐渐增加并于第五周达峰值。AT1、AT2mRNA表达随时间不同呈不同程度的增加,分别于第28天、第35天达到峰值(382%和314%)。与AT1B受体mRNA相比,AT1受体亚型AT1AmRNA表达水平升高更为明显。免疫组化结果提示,模型组大鼠胰腺组织AT1蛋白表达增加并主要分布于纤维化区域。结论血管紧张素II可能通过AT1、AT2介导的途径参与了TNBS诱导的大鼠胰腺组织纤维化形成过程。
- 张汝玲王兴鹏吴恺吴丽颖董育玮
- 关键词：胰腺纤维化受体MRNA细胞外基质合成TNBS染色观察
- 胰腺星状细胞在胰腺癌组织中的激活及其可能作用被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨胰腺星状细胞在胰腺癌组织中的表达及其可能作用。方法 应用免疫组化观察24例胰腺癌、3例慢性胰腺炎胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）和结蛋白（desmin）表达。结果 24例胰腺癌、3例慢性胰腺炎胰腺组织α-平滑肌肌动蛋白均为阳性表达,且胰腺癌胰腺组织阳性染色均强于慢性胰腺炎胰腺组织。24例胰腺癌胰腺组织结蛋白阳性表达率为83.3％,而在3例慢性胰腺炎胰腺组织为0。结论 胰腺星状细胞可能在胰腺癌的发生、发展中起一定作用。
- 张汝玲王兴鹏吴恺龚自华吴丽颖董育玮谢传高
- 关键词：胰腺星状细胞胰腺癌Α-平滑肌肌动蛋白结蛋白免疫组化法
