国家自然科学基金(30430670)
- 作品数：28 被引量：65H指数：5
- 相关作者：陈孝平张万广张伟梁慧芳董汉华更多>>
- 相关机构：华中科技大学中国人民解放军更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TNF-α和IL-6在卵圆细胞介导的肝再生中的作用被引量：3
- 2007年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)在卵圆细胞介导的肝再生中的作用。方法采用2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluroene,2-AAF)加2/3肝切除建立大鼠肝卵圆细胞介导的肝再生模型,以行2/3肝切除诱导的肝细胞介导的肝再生模型作为对照,采用RT-PCR方法检测TNF-αI、L-6在模型组及对照组肝组织中的表达。结果同正常组相比,术后模型组及对照组TNF-αmRNA表达明显上调,模型组持续至术后第3天(P<0.05),对照组持续至术后第6天(P<0.05)。对照组IL-6 mRNA术后8 h显著升高(P<0.05),而模型组IL-6 mRNA术后无明显变化。结论TNF-α的高表达可能与肝卵圆细胞介导的肝再生过程密切相关。
- 朱言亮陈孝平张万广裘法祖
- 关键词：肝卵圆细胞肿瘤坏死因子-Α白细胞介素-6肝再生
- 肝脏胞外基质成分参与卵圆细胞介导的肝再生被引量：5
- 2009年
- 目的探讨肝再生中肝脏胞外基质成分与卵圆细胞的相互关系及作用。方法采用免疫组化及免疫荧光双标的方法动态观察大鼠卵圆细胞增殖模型中肝脏胞外基质成分（层粘连蛋白和纤维连接蛋白）的定位及与卵圆细胞的关系。结果肝部分切除后第2天,卵圆细胞开始向门静脉周围区域增殖。层粘连蛋白主要出现在门静脉周围的肝窦状隙内,纤维连接蛋白在整个肝小叶内表达显著增加。术后第4～9天,卵圆细胞进一步向肝实质内增殖,门静脉周围纤维连接蛋白表达增加,中央静脉周围表达减少。层粘连蛋白及纤维连接蛋白与卵圆细胞关系紧密。术后第12～15天,随着卵圆细胞分化为小肝细胞结节,大多数层粘连蛋白及纤维连接蛋白位于结节周边,少数出现在结节内。第18天以后,正常的肝小叶结构开始恢复。结论卵圆细胞与肝脏胞外基质成分存在紧密联系;局部肝脏微环境可能通过细胞与基质之间的相互作用在卵圆细胞介导的肝再生中发挥重要的调控作用。
- 张伟陈孝平项帅董汉华张万广
- 关键词：卵圆细胞肝再生胞外基质
- 乙肝病毒X蛋白激活NF-κB信号通路对AFP表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的研究乙肝病毒X蛋白(HBx)通过核因子-κB(NF-κB)信号通路对甲胎蛋白(AFP)的调节作用。方法建立稳定转染HBx基因的L02细胞系(L02-HBx),用特异性的NF-κB信号通路阻断剂PDTC阻断该信号通路,荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察转染前后及加入PDTC前后NF-κB信号通路的激活、失活情况,同时用实时定量PCR和WesternBlot技术检测转染前后及加入PDTC前后AFP在mRNA及蛋白水平上的表达变化。结果以L02细胞为参照,转染HBx基因后的L02-HBx细胞NF-κB信号通路被激活,AFPmRNA和蛋白水平较转染前分别增加(2.78±0.43)倍和(4.72±0.53)倍,差异有统计学意义(P<0.05);PDTC作用24h后L02/HBx细胞NF-κB信号通路阻断,AFPmRNA和蛋白表达分别为(1.40±0.16)倍和(3.12±0.44)倍,与未加入PDTC作用的L02-HBx细胞相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NF-κB信号通路是HBx上调AFP表达的途径之一。
- 任利陈孝平张万广刘利平杨盛力梁慧芳
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白甲胎蛋白核因子-ΚB信号通路肝细胞
- 肝癌干细胞的研究进展被引量：1
- 2008年
- 张伟陈孝平
- 关键词：肝癌癌症干细胞
- 肝卵圆细胞分化调控机制的研究进展被引量：2
- 2007年
- 肝卵圆细胞是存在于肝脏中的一类肝干细胞,目前已证实了它在人及多种动物中存在。卵圆细胞来源并定位于肝内的胆管系统中,具有多向分化潜能,正常时处于静止状态,只有当肝脏发生严重损伤且肝细胞再生障碍时才受到激活并大量增殖,可分化为肝细胞和胆管细胞,以修复重建肝脏组织,恢复生化功能。随着研究的深入,卵圆细胞必将在移植、生物人工肝、各种终末期肝病的治疗等方面开辟新的途径。
- 董汉华陈孝平张伟靖凯张峰
- 关键词：卵圆细胞基因表达调控
- 肝脏微环境对肝脏干细胞调控机制的研究进展被引量：1
- 2009年
- 随着对肝脏干细胞的深入研究，肝脏内存在具有向肝／胆系细胞双向分化潜能的成体肝脏干细胞的观点已经被广泛接受。在肝脏严重受损，成熟肝细胞增殖受抑制或增殖不能满足肝脏代偿时由肝脏成体干细胞增殖分化为成熟肝细胞。而由肝实质细胞，肝脏非实质细胞（肝星状细胞，Kupffer细胞，窦状内皮细胞），细胞外基质及神经系统等组成的肝脏微环境对肝脏干细胞增殖分化有重要作用。现对肝脏微环境对肝脏干细胞增殖分化调控作用的研究进展作一综述。
- 陈琳陈孝平张伟董汉华
- 关键词：肝脏干细胞细胞调控细胞增殖分化KUPFFER细胞成熟肝细胞肝实质细胞
- 硫氧还蛋白2在2-乙酰氨基芴加肝切除诱导的卵圆细胞中的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 目的观察硫氧还蛋白2(Trx2)在2-乙酰氨基芴(2-AAF)加肝切除诱导的卵圆细胞增殖中的表达,并探讨其表达的意义。方法Balb/c小鼠喂饲2-AAF加2/3肝切除方法诱导肝脏卵圆细胞的增殖。经门静脉灌注消化法和等密度离心法分离卵圆细胞,并在体外进行原代培养。免疫荧光和双标法对培养的细胞进行鉴定。免疫组化法检测卵圆细胞的增殖,免疫荧光法检测Trx2在卵圆细胞和肝实质细胞中的表达,TUNEL法检测卵圆细胞和肝实质细胞的凋亡。结果喂饲2-AAF后引起肝脏损伤,与肝切除前相比,肝切除后肝脏损伤明显加重(P<0.01),同时有明显的卵圆细胞增殖。卵圆细胞中Trx2的表达明显高于肝实质细胞,同时其凋亡率明显低于肝实质细胞(P<0.01)。结论喂饲2-AAF加2/3肝切除可以引起严重的肝损伤,促进卵圆细胞增殖,卵圆细胞高表达Trx2可以抑制自身凋亡和损伤,在肝脏功能的恢复过程中起着非常重要的作用。
- 万伟伟张磊梁慧芳陈孝平张万广张伟
- 关键词：卵圆细胞肝损伤
- 大鼠肝癌发生过程中PTEN蛋白在卵圆细胞内的表达及意义
- 2008年
- 目的研究PTEN蛋白在大鼠肝癌发生过程中的表达与肝癌的关系。方法将60只SD大鼠随机分为实验组和对照组。用3’-甲基-4-二甲基氨基偶氮苯(3’-Me-DAB)诱癌,再分别用RT-PCR和Westernblot检测诱癌4～20周的大鼠卵圆细胞中AFPmRNA和PTEN蛋白的表达。结果PTEN表达的下调与癌症的发生过程相关,AFPmRNA的表达相对稳定。结论PTEN在肝癌发生过程中的表达逐渐降低可能与卵圆细胞的癌变相关。
- 靖凯陈孝平董汉华张万广张峰张志伟
- 关键词：肝肿瘤肿瘤抑制蛋白质类
- c-kit在人肝硬化及肝细胞肝癌组织中的表达及意义被引量：1
- 2007年
- 目的探讨肝脏祖细胞标志物c-kit在人肝硬化及肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法对30例肝硬化、40例肝细胞肝癌标本及3例正常组织标本进行常规组织学观察以及c-kit、CD45免疫组化染色,对肿瘤细胞的分化程度及肝硬化组织门静脉炎症程度进行分型和评分,分析c-kit表达与肝硬化及肝细胞肝癌的临床病理特征的联系。结果正常肝脏中c-kit染色阴性。20／30例肝硬化中发现c-kit（＋）细胞,位于门脉周围区域和纤维间隔内,个别阳性细胞整合到成熟胆管,肝硬化结节中没有发现c-kit（＋）细胞。19／40例HCC组织中存在c-kit （＋）肿瘤细胞,在肿瘤细胞之间或肿瘤结节周围分散分布。HBsAg及Anti-HBc在c-kit（＋）与c-kit （-）HCC之间表达有显著性差异（χ^2=5．063,P〈0．05;χ^2=6．667,P〈0．05）。c-kit表达与肿瘤的分化程度紧密相关（χ^2=10．384,P〈0．05）,分化程度越低,c-kit表达越高。结论骨髓来源的肝脏祖细胞参与了部分肝硬化病变过程中的肝再生及HCC的形成和发展,c-kit表达情况对于判断HCC预后有一定意义。
- 张伟陈孝平项帅张峰张万广
- 关键词：肝硬化原癌基因蛋白质C-KIT
- 端粒酶在大鼠肝卵圆细胞中表达的意义被引量：1
- 2009年
- 目的检测大鼠肝卵圆细胞端粒酶活性，探讨端粒酶表达与卵圆细胞增殖分化的关系。方法采用2-AAF／PH模型诱导大鼠卵圆细胞增殖，改良的胶原酶灌注结合密度梯度离心法分离，用细胞免疫荧光和电镜鉴定卵圆细胞。采用免疫组织化学、RT—PCR、荧光定量PCR等方法检测卵圆细胞端粒酶的表达，组间比较采用t检验分析其意义。结果采用2-AAF／PH模型成功诱导大鼠卵圆细胞增殖。分离的卵圆细胞核大，卵圆形，胞质少，呈铺路石样生长。电镜发现细胞核质比大，胞质内细胞器少且发育不成熟。细胞免疫荧光结果表达OV-6、AFP、CK-19、albumin、c-kit。端粒酶逆转录酶（TERT）表达在门静脉周围增殖的卵圆细胞核内，随着卵圆细胞逐渐向肝细胞方向分化，TERT阳性细胞数逐渐减少。大鼠正常肝组织TERT mRNA表达水平最高，为LE-6卵圆细胞的2．27倍；分离的卵圆细胞TERT mRNA表达水平为LE-6卵圆细胞的1．26倍；采用2μg和4μg细胞提取物分析细胞的端粒酶活性，随着LE-6卵圆细胞传代次数的增加，由24代传至40代，端粒酶活性由△A=1．05、1．15降低到△A=0．25、0．45（t=17．74，12．38，P〈0．05）。结论卵圆细胞具有端粒酶活性，端粒酶可能是卵圆细胞维持其增殖能力和多分化潜能的一个必要条件。
- 张伟陈孝平项帅张峰董汉华张磊陈琳张万广
- 关键词：卵圆细胞端粒酶细胞分离
