背景:神经元的培养和细胞转染技术是在体外研究神经元生长发育及生理病理机制的重要手段,但目前原代培养的皮质神经元往往纯度不高、转染效率不高。目的:建立一种简单、高效、稳定的原代神经元培养及转染方法。方法:无菌条件下分离新生1 d SD大鼠大脑皮质,经0.25%的胰蛋白酶消化后离心,制备成单细胞悬液,以5×10~9L^(-1)细胞浓度接种至含神经元专用培养基的24孔细胞培养板进行原代培养,并于倒置显微镜下观察神经元形态的变化,使用神经元特异性标志物Tuj1和MAP2对培养的细胞进行鉴定;利用人工脂质体转染神经元,观察神经元转染效率。结果与结论:(1)体外培养的原代神经元具有较高的纯度,在培养第7天神经元特征明显,突起相互接触形成神经元网络,并表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP2;利用人工脂质体转染神经元,转染效率较高;(2)采用该方法进行原代神经元培养,能够获得稳定的、高纯度的原代神经元;人工脂质体亦可高效率转染原代神经元。
目的:探讨急性血管阻塞性缺血性肠病(Acute Vascular Ischemic Bowel Obstruction, AVIBO)的诊断及治疗方法。方法回顾性分析我院确诊的急性肠系膜上动脉阻塞(Acute Embolism of the Superior Mesenteric Artery, AESMA)所致血管缺血性肠病13例患者临床资料。结果 AESMA是严重的急腹症之一,病情发展迅速,病死率较高,且缺乏特异性的临床表现,早期诊断较困难,常导致误诊,随着近年来发病率的逐渐增高,目前治疗情况并不乐观。结论 AESMA的早期诊断和及时处理非常重要,可以挽救濒临死亡的患者。
