国家重点实验室开放基金(80-9) 作品数:3 被引量:7 H指数:2 相关作者: 王文兵 闻燕 许文荣 朱伟 高广 更多>> 相关机构: 江苏大学 江苏大学附属医院 更多>> 发文基金: 国家重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
一种与细胞周期素A1互作的新基因的克隆和表达 2006年 目的:了解与细胞周期素A1互作的一个EST的组成结构和蛋白质细胞定位。方法:通过酵母双杂交试验获得了一个与细胞周期素A1互作的新EST,进一步获得了全长基因foca1,其读码框长度为666 bp,编码221个氨基酸。将该基因克隆进杆状病毒AcNPV及真核表达质粒pcDNA3中,分别进行了表达和定位。结果:获得了表达该基因的重组杆状病毒和融合了EGFP的真核表达质粒。蛋白印迹试验证明该基因在昆虫Tn5细胞中得到了表达;并发现该基因的产物在COS-7细胞中定向于细胞核内。结论:该蛋白与cyc lin A1(核蛋白)存在互作的可能性。此结果为深入研究foca1基因的功能打下了基础。 张尤历 陈劲频 王文兵关键词:FOCAL 细胞周期素 克隆 杆状病毒 食管癌中高表达的钙结合蛋白1基因的序列分析及意义 被引量:5 2007年 目的:筛选食管癌中差异表达的基因,为进一步了解食管癌发生的分子机制奠定基础。方法:利用荧光差异显示技术(DD-PCR)获得差异片段,对这些片段进行克隆和序列分析。通过在GenBank中同源性检索,查找差异片段相对应的同源基因。利用定量PCR检测验证该基因表达的差异性,并对该基因的结构进行预测和分析。结果:通过DD-PCR得到差异片段中的一个片段对应于人类钙结合蛋白1基因(Cabin1)。荧光定量PCR技术检测结果表明钙结合蛋白1基因在食管癌组织中的表达量高于其对应的癌旁组织,在食管癌细胞株TE1中的表达量高于其他被测试的5种肿瘤细胞株。生物软件分析表明:该基因的读码框长6 663bp,编码2 220个氨基酸,至少有4种剪切方式。结论:Cabin1在食管癌组织及食管癌细胞中异常表达,可能在食管癌发生过程中起着重要的作用。 闻燕 王文兵 高广 许文荣 朱伟 李峰关键词:定量PCR 食管癌 高转移肺癌细胞株95D中特异表达的C3orf1基因分析 被引量:2 2007年 目的进一步了解肺癌转移的分子机制,筛选高转移肺癌中差异表达的基因。方法利用荧光差异显示技术(DD-PCR)获得差异片段,对这些片段进行克隆和序列分析。通过在GenBank中同源性检索,查找差异片段相对应的同源基因。利用定量PCR检测验证该基因表达的差异性,并对该基因的结构进行预测。结果通过DD-PCR得到9个差异片段,其中一个片段对应于C3orf1基因。定量PCR验证的结果表明,C3orf1基因在高转移肺癌中的表达量显著高于其他被测试的5种肿瘤细胞。该基因的读码框长858bp,编码285个氨基酸,分子量约32200。蛋白质结构预测分析发现,该基因含有7个类似表皮生长信号区,N端有一含有24个氨基酸的信号肽,并且还可能有3个2S-2Fe铁氧化还原蛋白铁硫结合信号区,2个维持自身静态平衡的VWFC信号区和2个硫解酶活性区。结论C3orf1基因在高转移肺癌中异常表达,可能是分泌型的生长因子类蛋白,刺激细胞的生长。 闻燕 王文兵 许文荣 朱伟关键词:肺癌细胞 定量PCR