陕西省自然科学基金(2000SM28)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 相关作者：许彦鸣付振虹袁建林武国军王成济更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PTI-1表达载体构建及在大肠杆菌中的高效表达和纯化被引量：2
- 2002年
- 目的 构建表达人前列腺癌诱导基因 1(PTI- 1)蛋白的重组质粒 ,在大肠杆菌中诱导高效表达并纯化 .方法 应用亚克隆 PTI- 1基因的 p U C19/ PTI- 1质粒 ,重新构建表达载体 PTI- 1/ p GEX4T- 1,酶谱分析鉴定出正确的重组质粒 ,诱导表达 ,进行 SDS- PAGE分析 ,应用 GSH树脂纯化表达产物 .结果 筛选出 5个与 p GEX4T- 1正向重组质粒 ,其中一株表达一个 Mr为 6 90 0 0的新蛋白 ,并以包涵体的形式存在 ,蛋白在宿主菌中高效表达 ,表达量为 43.2 %,纯化蛋白得到纯度为 79.72 %的 GST/ PTI- 1融合蛋白 .结论 重组质粒 PTI- 1/PGEX4T- 1的构建和 GST/ PTI- 1融合蛋白高效表达及纯化的成功使简便获得前列腺癌诱导蛋白成为可能 .
- 付振虹王禾武国军许彦鸣袁建林王成济杨安钢
- 关键词：大肠杆菌纯化前列腺肿瘤基因基因表达
- 人前列腺癌细胞系PC-3中PTI-1 cDNA的克隆及序列分析被引量：2
- 2002年
- 为获取人前列腺癌诱导基因家族新成员 ,以人前列腺癌细胞系PC 3的总RNA为模板 ,用RT PCR方法扩增人前列腺癌诱导基因 1(PTI 1) ,将其亚克隆至克隆载体pUC19,进行测序 .将克隆得到的PTI 1基因片段与国外报道的人PTI 1基因编码区cDNA同源性为 99.3% ,但第 72 6、74 6、116 7、12 70、132 6、144 9、16 94和 16 95位碱基分别由A、A、C、C、A、A、T和C替代了文献中的C、C、G、G、G、C、C和T .其中 6个碱基的不同 ,导致了第 36、183、2 17、2 36、2 77和 35 9位密码子代表的氨基酸分别由Lys替代Gln ,Arg替代Gly ,Ala替代Gly ,Ser替代Gly ,Thr替代Pro和Arg替代Cys .将所获得的基因在GenBank登录 ,登录号为AF3974 0 3.结果提示 ,获得了PTI 1家族新成员 ,并且与EF 1α分子的同源性较已报道的PTI 1高 .
- 付振虹王禾许彦鸣武国军袁建林王成济杨安钢
- 关键词：PC-3CDNA克隆
