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甜瓜果实酸性转化酶基因反义表达载体的构建(英文)被引量：5: 2006年; 应用RNA反义技术抑制甜瓜果实发育过程中酸性转化酶活性,促进蔗糖积累,从而为培育优质品种提供了可行的新方法。将已克隆到pMD18-T载体上的甜瓜酸性转化酶基因用BamHⅠ和HincⅡ双酶切,得到该基因编码区1038bp的cDNA片段,将其定向插入到植物表达载体pROK2的BamHⅠ/SmaⅠ克隆位点,构建了甜瓜酸性转化酶cDNA反义表达载体(Anti-MAI1)。采用冻融法将其转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。利用叶盘法转化烟草,经PCR和PCR-Southern杂交检测,证明此基因已整合入烟草的核基因组中。; 于喜艳田红梅樊继德王秀峰; 关键词：甜瓜酸性转化酶基因烟草

厚皮甜瓜高效再生体系及遗传转化体系的研究: 甜瓜是世界上重要的园艺作物之一,随着人们生活水平的不断提高,人们对甜瓜的营养和风味品质要求也越来越高,甜瓜的品质主要决定于可溶性糖的含量和种类。甜瓜果实中糖的积累和组成严格受糖代谢酶的调控,其中酸性转化酶是促进蔗糖水解的...; 田红梅孙丽萍孔庆国于喜艳; 关键词：甜瓜农杆菌介导; 文献传递

甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因正反义表达载体的构建: 2007年; 为了改善甜瓜果实的品质及研究甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的生物学功能,本试验分别构建了甜瓜果实SPS基因的正义及反义表达载体。用PCR方法将克隆到pMD18-T载体上的甜瓜SPS基因用带有KpnⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物扩增,然后将该扩增片段克隆到pMD19-T Simple载体上,再用KpnⅠ和XbaⅠ双酶切,得到该基因编码区3.37 kb的cDNA片段,将其定向插入到植物表达载体pROK2的KpnⅠ/XbaⅠ克隆位点,构建了甜瓜果实SPS基因的正义表达载体。将已克隆到pMD18-T载体上的甜瓜SPS基因用KpnⅠ和HincⅡ双酶切,得到该基因编码区830 bp的cDNA片段,将其定向插入到植物表达载体pROK2的KpnⅠ/SmaⅠ克隆位点,构建了甜瓜果实SPS基因的反义表达载体。; 田红梅樊继德于喜艳; 关键词：甜瓜反义表达载体

子房注射法获得转基因甜瓜植株: 利用子房注射法将反义酸性转化酶基因(MAI)导入甜瓜果实,并对后代进行鉴定,PCR鉴定结果表明,330株甜瓜转化植株中,有2株扩增到了目的片段,转化率为 0．6％。转基因甜瓜生长势减弱,果实约比对照小30％左右,但果实糖...; 樊继德孔庆国张梅于喜艳; 关键词：甜瓜 PCR 转基因; 文献传递

甜瓜反义酸性转化酶基因对甜瓜的遗传转化被引量：16: 2007年; 利用子房注射法将甜瓜反义酸性转化酶基因导入厚皮甜瓜自交系‘01-3’果实,应用PCR和Southern Blot对后代进行分子鉴定。结果表明,330株甜瓜转化植株中,有2株为阳性转基因植株,转化率约为0·6%。进一步研究发现,T0代转基因甜瓜植株生长势减弱,果实比对照小30%左右,但可溶性糖含量比对照提高了52%。PCR和PCR-Southern Blot鉴定表明,T0-1的自交后代没有基因丢失,反义酸性转化酶基因已在转基因植株中稳定遗传。T1代转基因植株生长势也明显减弱,但成熟果实可溶性总糖含量提高了26%,蔗糖含量比对照提高了2·5倍,果糖和葡萄糖含量略有降低,酸性转化酶活性比对照明显降低。这些结果表明,反义酸性转化酶基因通过降低酸性转化酶活性,调控了甜瓜果实蔗糖代谢过程,改变了甜瓜果实糖分组成,同时抑制了植株生长。; 樊继德何启伟王秀峰于喜艳; 关键词：甜瓜转基因 PCR 酸性转化酶

甜瓜蔗糖合成酶基因(CmSS1)反义表达载体的构建及遗传转化被引量：1: 2013年; 以BamHⅠ和SalⅠ双酶切pMD18-T-CmSS1和表达载体pBI121,再用T4 DNA连接酶将回收的目的片段反向与pBI121连接。结果证明,CmSS1反向插入到pBI121中,得到了pBI121-CmSS1的重组质粒;利用农杆菌介导法将反义CmSS1基因转化甜瓜,经PCR检测,得到5株转基因植株。这为以后研究甜瓜蔗糖合成酶的活性调节机制及通过基因工程手段研究甜瓜SS的活性奠定了基础。; 闻小霞赵荷仙刘刚周爱凤张桂梅; 关键词：甜瓜蔗糖合成酶反义表达载体

不同品种厚皮甜瓜果实成熟过程中挥发性物质成分分析被引量：39: 2007年; 采用固相微萃取(SPME)与气相色谱-质谱(GC-MS)联用的方法,对品质差异较大的山农黄金1号、Sweet delight(美国)和Takami(日本)厚皮甜瓜果实成熟过程中挥发性物质进行分析鉴定。结果表明,不同品种厚皮甜瓜果实成熟过程中挥发性物质组成和相对含量不同。山农黄金1号、Sweet delight和Takami果实成熟过程中共分离出156种挥发性物质,主要为酯类、醛类和醇类等化合物。山农黄金1号甜瓜果实未成熟时挥发性物质以醛类物质为主;随着果实的发育,近成熟时醇类、醛类物质含量急剧降低,酯类物质含量迅速升高;果实成熟时挥发性物质以酯类物质为主。Sweet delight果实未成熟时挥发性物质以醛类、醇类物质为主;随着果实的发育,醇类物质含量逐渐降低,醛类、酯类物质含量逐渐升高;果实成熟时挥发性物质以醛类物质为主。Takami果实未成熟时挥发性物质以醇类、醛类物质为主;果实成熟时挥发性物质以酯类、醛类物质为主。; 唐贵敏于喜艳赵登超王利平; 关键词：厚皮甜瓜

甜瓜果实蔗糖磷酸合成酶基因cDNA片段的克隆及表达分析被引量：12: 2007年; 根据在GenBank中登录的番茄、马铃薯等蔗糖磷酸合成酶基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法从甜瓜花后25d的果实总RNA中扩增出目标cDNA片段,克隆到pMD18-T载体中。序列分析表明,该片段与番茄蔗糖磷酸合成酶氨基酸序列同源性为98.9%,GenBank中登记号为DQ355797。通过Northernblot检测其在甜瓜果实不同发育时期的表达变化,结果表明该基因在甜瓜果实花后25d开始表达,随着果实的成熟,表达量升高。; 于喜艳樊继德何启伟; 关键词：甜瓜克隆基因表达

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国家自然科学基金(30471191)