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BmNPV对家蚕BmN细胞周期及周期蛋白基因表达水平的影响被引量：2: 2014年; 【目的】研究家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori Nucleopolyhedroviruses,BmNPV)对家蚕卵巢细胞系(BmN)细胞周期及细胞周期蛋白基因转录水平的影响。【方法】用BmNPV感染家蚕BmN细胞,分别在病毒感染后的不同时间(12,24,36,48h),应用实时荧光定量PCR方法检测细胞周期蛋白基因CyclinA、CyclinB、CyclinE的表达情况,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。【结果】BmNPV感染24h后,BmN细胞出现明显感染症状,变为圆形;48h后细胞核内出现多角体。随着感染时间的延长,CyclinA、CyclinB、CyclinE基因表达量均下降,分别在感染12,24,36h后,表达量降低为0。流式细胞仪检测结果显示,在BmNPV感染后24h左右,抑制于G2/M期的BmN细胞达到68%。【结论】BmNPV感染家蚕BmN细胞后,导致CyclinB、CyclinE基因表达量降低,对CyclinA基因表达量的影响较小;同时BmNPV感染可以将BmN细胞发育抑制于G2/M期。; 刘丽华沈卫德李兵王文兵; 关键词：BMNPV 细胞周期

辛硫磷对家蚕细胞周期蛋白家族基因转录活性的影响被引量：1: 2015年; 【目的】探讨经辛硫磷诱导后,家蚕细胞周期蛋白家族基因(CyclinA、CyclinB、CyclinB3、CyclinE)在5龄幼虫各种组织中的转录活性,为进一步研究有机磷农药对家蚕的损伤机制提供参考。【方法】采用实时荧光定量PCR方法,以饲喂清水浸泡过的桑叶为对照,分析家蚕5龄3d幼虫喂食辛硫磷(4μg/mL)浸泡桑叶24h后,脑、脂肪体、中肠、丝腺、马氏管、精巢及卵巢等7种组织中4种细胞周期蛋白家族基因的转录水平。【结果】与对照组相比,辛硫磷诱导24h后,CyclinA、CyclinB、CyclinB3在各组织中均表达上调,CyclinE在中肠及脂肪体中表达显著下调,在精巢与马氏管中无明显变化,在其他组织中则表达上调。【结论】辛硫磷诱导24h后,家蚕组织中CyclinA、CyclinB及CyclinB3基因表达上调,这可能是家蚕对磷胁迫的响应;CyclinE在中肠及脂肪体中表达显著下调,这与这2种器官是家蚕重要的解毒代谢器官有关。; 刘丽华沈卫德李兵; 关键词：家蚕辛硫磷细胞周期蛋白

细胞周期蛋白家族基因在家蚕胚胎期的表达分析被引量：1: 2016年; 【目的】研究家蚕细胞周期蛋白家族基因（CyclinA、CyclinB、CyclinB3、CyclinE、CyclinLl）在滞育卵与即时浸酸处理的滞育卵发育过程中的转录活性，为家蚕胚胎发育及细胞周期调控机制研究提供参考。【方法】以家蚕品种大造为试材，取产后1-8d的滞育卵及产后20h即时浸酸的非滞育卵，提取其RNA反转录成cDNA，采用实时荧光定量PCR方法分析家蚕Cyclin家族基因在胚胎发育过程中的转录水平。【结果】在即时浸酸处理的家蚕非滞育卵中均能检测到Cyclin家族基因的表达，但不同发育阶段Cyclin家族基因表达量差异很大，在发育开始的1-3d，Cyclin家族基因变化显著，说明此期细胞分裂频繁，正处于组织和器官活跃形成时期。在胚胎发育晚期，除CyclinLl外的其他基因表达量都很低，表明此时幼虫器官发育几近完成，因此细胞分裂迟缓。而滞育卵从蛾体产下经过3d后，细胞分化停滞于G2期，Cyclin家族基因也进入沉默状态。【结论】Cyclin家族基因在家蚕胚胎发育过程中具有重的调控作用。; 刘丽华沈卫德李兵秦佳梅刘涛; 关键词：家蚕细胞周期蛋白胚胎发育基因表达谱

北乌头乙醇提取液对菜青虫体内保护酶活性的影响被引量：4: 2015年; 为探讨北乌头的杀虫作用机理,采用分光光度法测定了北乌头乙醇提取液对菜青虫体内保护酶活性的影响。由结果可知,用北乌头乙醇提取液处理菜青虫后,其体内SOD和CAT酶活性呈现先升高后降低的趋势,都在24 h时达到高峰,而POD酶活性则表现为先下降后上升再下降的趋势;在处理36 h前,3种保护酶处理组都高于对照组,48 h后,均低于对照组。结果说明,北乌头乙醇提取液能有效干扰昆虫体内保护酶系,扰乱其正常的生理代谢,从而起到防治效果。; 刘丽华王双关磊; 关键词：菜青虫保护酶

家蚕细胞cyclinA基因的干涉对家蚕细胞增殖的影响被引量：1: 2015年; [目的]研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对家蚕卵巢细胞系(Bm N)细胞cyclin A基因表达及细胞周期的影响。[方法]通过脂质体转染试剂将针对cyclin A基因的特异性siRNA片段转入家蚕Bm N细胞,采用SYBR荧光定量PCR法检测cyclin A mRNA的表达,流式细胞技术检测细胞周期变化。[结果]转染siRNA-cyclin A可有效下调cyclin A基因的表达,转染48 h后,cyclin A mRNA表达量降低到对照的37.4%;流式细胞仪分析表明:与对照组相比,转染组G0/G1期细胞比例显著增加,细胞周期阻滞于G1期。[结论]靶向cyclin A基因的siRNA片段,通过下调cyclin A基因表达能有效抑制细胞增殖。; 刘丽华沈卫德李兵秦佳梅郁有兰马鹏宇; 关键词：CYCLIN A基因

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吉林省教育厅科研项目(2013493)