国家自然科学基金(81201131)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 自杀基因修饰的内皮祖细胞治疗小鼠原位移植性肝细胞癌
- 2014年
- 目的 :研究自杀基因胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)基因转染的小鼠骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)联合酶前体药物5-氟胞嘧啶(5-l uorocytosine,5-Fc)对小鼠H22细胞原位移植性肝细胞癌的抑制作用。方法 :采用Polybrene技术将含有CD基因的慢病毒重组载体plenti6.3-EGFPCD感染至EPCs,倒置显微镜下观察转染CD基因的EPCs上清液和5-Fc共处理后H22细胞的数目和形态变化。用转染CD基因的EPCs和5-Fc联合治疗H22原位移植肝细胞癌模型小鼠,磁共振扫描监测肿瘤体积变化,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,蛋白质印迹法检测移植瘤组织中CD蛋白表达。结果 :经CD基因转染的EPCs上清液联合5-Fc处理后,H22细胞增殖数量明显减少。转染CD基因的EPCs联合5-Fc治疗组小鼠肿瘤生长抑制率达(47.29±5.81)%,肿瘤细胞凋亡指数为(39.98±5.13)%,均明显高于空载体对照组(P<0.05)。结论 :CD基因修饰的EPCs联合5-Fc给药可有效抑制小鼠原位移植肝细胞癌的细胞增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡。
- 朱洪艳陈蓉姜藻
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶肿瘤移植内皮祖细胞
- 表达内皮抑素基因的内皮祖细胞治疗肝癌的初步研究
- 2016年
- 目的 :观察内皮抑素(endostatin,ES)基因转染的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对小鼠肝癌细胞H22增殖的影响,探讨联合自体EPCs和ES基因治疗肝癌的可行性和有效性。方法:构建表达ES基因的慢病毒载体,培养小鼠骨髓源EPCs,运用q PCR检测培养内皮细胞表面标记CD31、血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)、血管性血友病因子(von Willebrand factor,v WF)表达,电镜观察内皮细胞特征小体。实验分EPCs组、EPCs+LV空病毒载体组、EPCs+ES组。CCK-8法检测各组细胞增殖的情况。同时构建原位肝癌小鼠模型,尾静脉注射3组细胞后不同时间点处死小鼠,测量肿瘤大小并进行统计分析。结果:(1)酶切和测序、PCR鉴定证实成功构建慢病毒载体p Lenti6.3-ES-Monomer-Ds Red;(2)q PCR显示培养细胞表达内皮细胞标志CD31、VEGFR、v WF,透射电镜下在细胞质内可见多个散在内皮细胞特征性WeibelPalade小体(WP小体);(3)慢病毒载体Lenti6.3-ES-Monomer-Ds Red转染小鼠骨髓源性EPCs后荧光显微镜下可见细胞呈红色荧光;EPCs+ES组细胞上清较对照组上清液对小鼠肝癌细胞H22体外增殖具有明显抑制作用,体内实验显示EPCs+ES组肝癌生长速度慢于对照组。结论:小鼠骨髓源单个核细胞体外可以诱导培养为内皮祖细胞,负载ES基因的EPCs体外可以抑制小鼠肝癌细胞H22的增殖,体内可以抑制小鼠肝癌生长。
- 陈蓉余辉安艳丽
- 关键词：内皮祖细胞内皮抑素肝癌
