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重庆市科技攻关计划(2009AB5081)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：杨军张赟毕杨李廷玉陈洁更多>>
相关机构：重庆医科大学重庆大学更多>>
发文基金：重庆市科技攻关计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇人白血病
  • 1篇人白血病K5...
  • 1篇嘌呤
  • 1篇嘌呤霉素
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞株
  • 1篇红色荧光蛋白
  • 1篇白血
  • 1篇白血病
  • 1篇RFP
  • 1篇K562细胞
  • 1篇K562细胞...

机构

  • 1篇重庆大学
  • 1篇重庆医科大学

作者

  • 1篇喻琴
  • 1篇陈洁
  • 1篇李廷玉
  • 1篇毕杨
  • 1篇张赟
  • 1篇杨军

传媒

  • 1篇医学分子生物...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
构建稳定表达RFP及嘌呤霉素抗性的K562细胞株被引量：2
2011年
目的构建稳定表达红色荧光蛋白（red fluorescent protein，RFP）和嘌呤霉素（puromycin）抗性的K562．PM．RFP细胞株，便于慢性粒细胞性白血病研究中K562细胞的观察和筛选。方法采用PCR法获得RFP片段，将其插入到慢病毒pGC-FU-3FLAG-IRES—Puromycin载体中获得pGC—PM—RFP重组质粒，经脂质体转染到293T细胞中获得慢病毒LV—PM—RFP，有限稀释法检测慢病毒在293T细胞中的转染效率，用包装获得的慢病毒感染K562细胞，经嘌呤霉素筛选获得RFP阳性的K562-PM—RFP细胞株。结果PCR及测序结果证实目的基因RFP正确克隆至慢病毒质粒中，经慢病毒LV—PM-RFP感染的K562细胞能在嘌呤霉素抗性培养基中存活，并稳定表达RFP。结论成功构建了慢病毒重组质粒pGC—PM-RFP，并获得了携带RFP及嘌呤霉素抗性基因的K562-PM—RFP细胞株。
喻琴张赟毕杨陈洁杨军李廷玉
关键词：红色荧光蛋白嘌呤霉素人白血病K562细胞
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