江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金(RC2007015)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：张爱华丁桂霞徐康康冯伟静更多>>
- 相关机构：南京医科大学第二附属医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金江苏省自然科学基金更多>>
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- 罗格列酮通过阻断磷酸肌醇-3激酶抑制醛固酮诱导的肾小球系膜细胞增殖的作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对醛固酮诱导的肾小球系膜细胞(MC)增殖的影响及其作用机制。方法体外培养小鼠MC,应用醛固酮刺激或应用罗格列酮预处理后再应用醛固酮刺激,采用3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法和细胞计数测定MC增殖;应用Western blot检测细胞周期素cyclin D1、cyclin A表达及磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)磷酸化。结果1.MC应用100 nmol/L醛固酮刺激后,其3H-TdR掺入量及细胞数分别是基础状态下的2.46倍和2.14倍;PPARγ受体激动剂罗格列酮可呈剂量依赖性抑制醛固酮诱导的MC增殖,抑制率可达80%以上。2.醛固酮刺激12 h后,MCcyclin D1和cyclin A表达。罗格列酮可呈剂量依赖性抑制醛固酮诱导的MC cyclin D1和cyclin A表达。3.醛固酮呈剂量依赖性促进MC PI3K/Akt信号通路活化,100 nmol/L醛固酮刺激60 min,磷酸化PI3K和Akt表达是对照组的3倍以上。4.PI3K抑制剂LY294002或Akt抑制剂显著抑制醛固酮诱导的细胞周期蛋白表达,其抑制率达80%以上。5.罗格列酮显著抑制醛固酮诱导的PI3K/Akt信号通路活化,10μmol/L罗格列酮几乎完全阻断醛固酮诱导的PI3K和Akt活化。结论罗格列酮通过阻断PI3K/Akt信号通路活化而抑制醛固酮诱导的MC增殖。
- 徐康康张爱华丁桂霞
- 关键词：醛固酮肾小球系膜细胞过氧化物酶体增殖物活化受体Γ罗格列酮
- SP600125对血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞转化生长因子-1和纤维连接蛋白表达的影响
- 2009年
- 目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)特异性抑制剂SP600125对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球系膜细胞(MC)转化生长因子-β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法体外分离、培养人MC,应用AngⅡ刺激或应用SP600125预处理后再应用AngⅡ刺激。于实验终点抽提细胞总蛋白或收集培养上清,采用Westernblot检测MCJNK、胞外信号调节激酶(ERK1/2)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性;应用ELISA法检测培养上清中TGF-β1和FN的分泌。结果SP600125可呈剂量依赖性抑制AngⅡ诱导的JNK活化,10μmol/LSP600125对JNK活性的抑制率为75%,而20μmol/LSP600125几乎完全阻断AngⅡ诱导的JNK活化。AngⅡ可促进MCERK1/2和p38活化,而SP600125对AngⅡ诱导的ERK1/2和p38活化无明显影响。AngⅡ显著促进MCTGF-β1和FN分泌,而SP600125则呈时间依赖性和剂量依赖性阻断AngⅡ诱导的MCTGF-β1和FN分泌,20μmol/LSP600125几乎完全抑制了AngⅡ诱导的TGF-β1和FN分泌。结论JNK特异性抑制剂SP600125可阻断AngⅡ诱导的JNK活化及TGF-β1和FN的表达,可能有一定的治疗作用。
- 徐康康张爱华丁桂霞
- 关键词：肾小球系膜细胞C-JUN氨基末端激酶
- 活性氧依赖的表皮生长因子受体磷酸化参与醛固酮诱导的系膜细胞胞外信号调节激酶活化被引量：2
- 2010年
- 目的探讨活性氧(ROS)介导的表皮生长因子受体(EGFR)磷酸化在醛固酮(ALDO)诱导的肾小球系膜细胞胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号通路活化中的作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞,应用ALDO刺激或应用不同阻断剂预处理后再加入ALDO刺激,应用荧光探针2,7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸(DCFDA)检测细胞内ROS的产生;Western blot检测EGFR、Ki-RasA、c-Raf、丝裂原活化蛋白激酶(MEK1/2)和ERK1/2活化。结果 ALDO可呈时间依赖性和剂量依赖性的方式促进肾小球系膜细胞ROS产生,100 nmol.L-1ALDO刺激60 min,系膜细胞ROS的产生是对照组的2.54倍。ALDO可显著活化系膜细胞EGFR,ALDO刺激60 min,EGFR活性是对照组的5.50倍,盐皮质激素受体(MR)抑制剂依普利酮和抗氧化剂乙酰半胱氨酸(NAC)几乎完全阻断ALDO诱导的EGFR磷酸化。ALDO刺激系膜细胞3 h,活化的Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2表达显著增强,分别是对照组的4.05倍、3.62倍、4.52倍和3.40倍。抗氧化剂NAC和EGFR特异性抑制剂AG1478几乎完全阻断ALDO诱导的Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2活化。结论 ALDO可通过ROS依赖的EGFR磷酸化活化Ki-RasA/c-Raf/MEK/ERK信号通路。
- 冯伟静张爱华丁桂霞
- 关键词：肾小球系膜细胞醛固酮胞外信号调节激酶
