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东莞市科技计划项目(2008108101062)
东莞市科技计划项目(2008108101062)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刘新光陈维春袁源刘振杰蒋智文更多>>
- 相关机构：广东医学院广东省中医院更多>>
- 发文基金：东莞市科技计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Prelamin A相互作用蛋白Narf的鉴定和表达分析被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨A型核纤层蛋白前体(prelamin A)在细胞内堆积造成细胞早老的机理,筛选了prelamin A相互作用蛋白并研究其在早老细胞中的表达情况。方法:以prelamin A的C末端区域为诱饵蛋白,采用酵母双杂交方法从人骨骼肌cDNA文库中筛选prelamin A相互作用蛋白。构建了prelamin A识别因子(Narf)与绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-Narf,与红色荧光蛋白-prelamin A融合表达质粒pDsRed-PLA共转染HEK293细胞,激光共聚焦显微观察共定位情况。Western blotting检测Narf在衰老表型HEK293PLA细胞的表达情况。结果:筛选得到包括Narf在内的7个候选相互作用蛋白。Narf与prelamin A能相互作用并共定位于核纤层,在prelamin A过表达的HEK293PLA细胞中Narf表达没有升高。结论:Narf在细胞内与prelamin A相互作用,且表达量不受后者影响。
- 陈维春刘振杰蒋智文彭琪袁源郑慧玲刘新光
- 关键词：酵母双杂交衰老共定位
- HnRNP A/B蛋白D亚群的生物学功能
- 2012年
- 核不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoproteins,hnRNPs)是一类结合DNA和RNA的核蛋白,并能在核质间穿梭.A/B型hnRNPs(heterogeneous nuclear ribonucleoproteins,hnRNP A/B)是hnRNPs中研究最为清楚的一大类别,生物信息学分析hnRNP A/B可以区分成A和D两个亚群,已鉴定的D亚群主要成员包括hnRNP AB,D和DL.hnRNP A/B的D亚群均含有2个保守的RNA结合结构域(RNA binding domain,RBD)和1个Gly富集区(glycine-rich domain,GRD),成员间的主要区别在于N端和C端的长度和序列不同.D亚群与pre-mRNA和其它蛋白质结合成微粒系统,参与pre-mRNA的加工、稳定、核输出以及翻译过程.此外,D亚群也能结合单链和双链DNA,参与转录起始和端粒的稳定.因此,hnRNP A/B的D亚群在各个阶段影响基因的表达,在神经系统发育、肿瘤的发生发展及衰老过程中发挥着多样性的功能.
- 薛传静刘新光陈维春
- 关键词：衰老
- 环指蛋白RING1与A型核纤层蛋白的细胞内相互作用被引量：1
- 2011年
- 环指蛋白RING1能结合DNA并抑制基因的转录.采用酵母双杂交方法从人骨骼肌文库中筛选出了与A型核纤层蛋白(lamin A)结合的RING1蛋白,回复杂交酵母能在缺陷培养基上生长.RING1与绿色荧光蛋白融合载体转染HEK293细胞,激光共聚焦显微观察发现RING1能与带红色荧光蛋白的lamin A蛋白在细胞核周围共定位.免疫共沉淀结果证明RING1与lamin A能够相互作用.结果证明了一个新的lamin A结合蛋白,为揭示lamin A影响基因表达乃至细胞衰老提供了依据.
- 陈维春宋杰刘振杰蒋智文袁源郑慧玲刘新光
- 关键词：相互作用酵母双杂交
- NARF基因siRNA干扰片段的筛选被引量：1
- 2014年
- 目的筛选能有效沉默A型核纤层蛋白前体识别因子(Narf)基因表达的siRNA片段。方法用半定量PCR初步筛选该基因的siRNA干扰片段,用定量PCR和Western blotting进一步检测siRNA的干扰效果。结果筛选到NARF基因的有效干扰片段。结论通过对NARF基因的有效沉默,为该基因功能的相关机制研究奠定基础。
- 袁源刘新光陈维春
- 关键词：SIRNA
