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广东省科技攻关计划(2009B020301001)

作品数：1 被引量：11H指数：1
相关作者：姚冬生谢春芳刘大岭邢克克胡亚冬更多>>
相关机构：广东省生物工程药物重点实验室国家工程研究中心暨南大学更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划广东省科技攻关计划更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇定向进化
  • 1篇易错PCR
  • 1篇体外分子定向...
  • 1篇稳定性
  • 1篇黄曲霉毒素解...
  • 1篇分子定向进化

机构

  • 1篇暨南大学
  • 1篇国家工程研究...
  • 1篇广东省生物工...

作者

  • 1篇张赛
  • 1篇胡亚冬
  • 1篇邢克克
  • 1篇刘大岭
  • 1篇谢春芳
  • 1篇姚冬生

传媒

  • 1篇生物工程学报

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化被引量：11
2011年
运用定向进化-易错PCR方法,提高黄曲霉毒素解毒酶的活力及稳定性,并结合辣根过氧化物酶(HRP)-隐性亮绿(RBG)快速高通量筛选系统,构建了库容约为104的突变体库。经过两轮易错PCR,最终分别获得了耐高温70℃突变酶A1773、pH 4.0稳定性的突变酶A1476,pH 4.0和pH 7.5均表现稳定性的突变酶A2863,其酶活力比野生酶分别提高了6.5倍、21倍和12.6倍。经序列分析表明,发现突变酶A1773发生了Glu127Lys和Gln613Arg突变;突变酶A2863发生了Gly73Ser、Ile307Leu、Val596Ala、Gln613Arg突变;突变酶A1476发生了Ser46Pro、Lys221Gln、Ile307Leu和Asn471Ile突变。结果为进一步了解黄曲霉毒素解毒酶的结构与功能之间的关系提供了参考。
张赛邢克克胡亚冬谢春芳刘大岭姚冬生
关键词：黄曲霉毒素解毒酶稳定性定向进化易错PCR
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