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重组人白细胞介素15融合蛋白的表达、纯化及免疫原性检测被引量：2: 2014年; 目的:以白细胞介素15(IL-15)为靶点,研制类风湿性关节炎免疫治疗蛋白疫苗。方法:将N端融合破伤风类毒素(TT)表位的人IL-15基因克隆至带有His标签的原核表达载体pQE-30上,转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,获得重组人TT-IL-15融合蛋白(简称rtIL-15);目的蛋白经镍柱亲和层析纯化后,用Western印迹和HPLC进行鉴定;将rtIL-15与氢氧化铝佐剂混合,免疫BALB/c小鼠,检测疫苗的免疫原性。结果:双酶切鉴定和核苷酸序列测定结果表明重组融合表达质粒pQE-30-TT-IL-15构建正确,重组蛋白的表达量达到菌体总蛋白的20%,主要以包涵体形式表达,经过纯化、复性后,目的蛋白纯度达到95%以上;蛋白疫苗免疫小鼠后,能诱导高滴度的特异性的IL-15抗体。结论:在大肠杆菌中表达了重组人IL-15融合蛋白疫苗,并具有良好的免疫原性。; 李佳林张存高源郝强王舒宁张伟张伟; 关键词：疫苗原核表达类风湿性关节炎

抗人白细胞介素15中和抗体识别抗原表位的噬菌体肽库筛选与鉴定被引量：2: 2015年; 目的:用噬菌体呈现随机七肽库筛选能与抗人白细胞介素15(h IL-15)中和抗体特异性结合的模拟抗原表位肽,并初步鉴定其免疫原性。方法:以抗h IL-15中和抗体为靶分子,用生物淘洗法从噬菌体呈现线性七肽库中筛选与之结合的噬菌体克隆,用噬菌体ELISA和竞争抑制ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;化学合成筛选得到的多肽,并与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联免疫BALB/c小鼠,检测其免疫原性。结果:经过3轮体外筛选后随机挑取50个阳性噬菌体克隆,ELISA检测结果显示其中15个克隆与抗h IL-15抗体有较强的结合能力,DNA测序结果得到的结构相似群为MTPFWQK、MSPFNQK、MIPYWQK和MIPFHQK;竞争性ELISA结果显示4个序列均能与IL-15竞争性地结合抗IL-15单抗;小鼠免疫实验结果显示4组多肽均能诱导IL-15特异性免疫反应。结论:筛选得到能与抗h IL-15中和抗体特异性结合,且具有免疫原性的模拟抗原7肽序列,为进一步开发h IL-15相关的多肽疫苗提供了依据。; 高源郝强王舒宁张伟张伟; 关键词：噬菌体随机肽库白细胞介素15 单克隆抗体表位

肿瘤相关巨噬细胞的研究进展被引量：4: 2015年; 肿瘤相关巨噬细胞(TAM)是一群具有免疫抑制功能的细胞,作为肿瘤微环境的重要组成成分,TAM以多种方式在肿瘤的发生、发展和转移中发挥着重要的作用。本文总结了TAM的表型,调控TAM在肿瘤组织中富集和分化的因素,TAM在肿瘤生长和转移中的作用以及以TAM为靶点的抗肿瘤策略等方面的研究进展,以期为肿瘤的生物治疗提供新的思路。; 秦鑫张萍张毓飞龚文容; 关键词：肿瘤相关巨噬细胞肿瘤

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国家自然科学基金(81001182)