国家自然科学基金(81001186)
- 作品数：31 被引量：92H指数：5
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- Met抑制剂XL-880对乳腺癌MDA-MB-231细胞的放疗增敏作用
- 2013年
- 目的研究Met抑制剂XL-880对Met阳性乳腺癌MDA—MB-231细胞系放疗增敏作用。方法依照对细胞不同处理设立对照组、单纯放疗组、XL-880单药组和XL-880联合放疗组。流式细胞术检测不同处理组的细胞早期凋亡率及周期变化，克隆形成试验研究不同处理对肿瘤细胞增殖的影响；Westernblot检测细胞周期和凋亡相关蛋白的表达变化和Met通路相关蛋白表达水平的改变。结果对照组、单纯放疗组、XL-880单药组和XL-880联合放疗组各组克隆数目分别为（41．3±8．2）个、（18．6±2．4）个，（10．6±2．9）个和（0．8±0．2）个，联合组与对照组、单纯放疗组及单药组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。XL-880处理的MDA—MB-231细胞放疗后48h，各组G2／M期细胞所占比例分别为（17．3±1．3）％，（20．0±4．0）％，（28．5±3．1）％，（57．0±3．3）％，G2／M期阻滞增加的差异均有统计学意义（均P〈0．05），AnnexinV／PI双染试验中各组细胞的早期凋亡率分别为（7．3±0．9）％、（14．1±0．6）％、（35．5±4．4）％、（48．2±5．3）％，凋亡率明显升高（均P〈0．05）。XL-880抑制了放疗后细胞Met磷酸化水平，同时抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少，凋亡相关蛋白Caspase-3和PARP蛋白剪切增加。结论XL-880可通过抑制Met通路进而影响下游CyclinB1水平而对Met阳性乳腺癌细胞系MDA—MB-231产生放疗增敏作用。
- 耿文文张斌李丹华梁新瑞曹旭晨
- 关键词：乳腺肿瘤放射疗法
- 吉非替尼对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移运动的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察吉非替尼对人表皮生长因子受体（EGFR）高表达的三阴性乳腺癌（TNBC）细胞系MDA．MB-231迁移能力的影响。方法采用Westernblot法检测不同浓度吉非替尼作用MDA-MB-231细胞后EGFR和Akt磷酸化水平；采用划痕实验和Boyden小室趋化实验观察吉非替尼对细胞迁移、趋化能力的影响；采用免疫荧光染色观察吉非替尼对细胞骨架重构及极性变化的影响。结果与对照组（OμmoVL吉非替尼）相比，不同浓度的吉非替尼可有效抑制EGFR及其下游通路关键蛋白的磷酸化水平，呈明显的量效关系。划痕实验24h后，0、0．1、1、10、20μmoL／L吉非替尼组细胞迁移距离分别为（36．3．4-4．0）μm、（30．3±3．8）μm、（26．8±3．3）μm、（17．0±2．6）μm和（11．04-2．5）μm；Boyden小室趋化实验3．5h后，0、0．1、1、10、20Dmol/L吉非替尼组的穿膜细胞数分别为（69．2±7．0）个、（51．8±7．5）个、（43．8±8．7）个、（30．6±4．8）个和（28．4±3．4）个。吉非替尼可明显延长划痕愈合时间，减少趋化穿膜细胞个数，差异有统计学意义（P〈0．05）。吉非替尼可明显减少细胞片状伪足的形成，抑制细胞骨架的重构及极性变化。结论吉非替尼可以通过抑制TNBC细胞系MDA-MB-231中EGFR／P13K／Akt通路的磷酸化水平，抑制细胞骨架蛋白（微丝）的重构及极性改变，从而降低细胞的迁移运动能力。
- 赵洪猛张斌李越张霖张飞宋艳群冯炜红曹文枫曹旭晨
- 关键词：乳腺肿瘤表皮生长因子受体吉非替尼细胞运动
- ZM447439对乳腺癌T47D细胞生长和细胞周期的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:研究Aurora激酶抑制剂ZM447439对体外培养的人乳腺癌细胞T47D生长和细胞周期各时相的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐法测定ZM447439对乳腺癌T47D细胞增殖的影响;克隆形成实验检测ZM447439对T471D细胞增殖的影响;流式细胞术检测ZM447439对乳腺癌T47D细胞周期各时相的影响。Western blot检测ZM447439对Aurora A,p-AuroraA,HistoneH3,p-HistoneH3以及CytlinBl的影响。结果:不同浓度的ZM447439处理T47D细胞24、48、72h明显抑制T47D细胞增殖,IC50分别为(9.604±0.982)Iμmol/L、(3.413±0.533)Iμmol/L、(0.620±0.208)μmol/L;经药物作用24h后,贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落;克隆形成率由(93.00±2.65)%降至0%;流式细胞术显示G_0/G_1期细胞由(50.50±1.71)%降至(6.30±0.17)%,S期细胞由(32.50±2.70)%降至0%,G_2/M期细胞由(17.00±4.39)%升高至(93.70±0.17)%,G_2/M期的阻滞呈现剂量依赖性:Westem blot显示Aurora A、HistoneH3无明显趋势变化,p-AuroraA、p-HistoneH3、CyclinBl随着浓度的增加而减少,都呈现一定的剂量依赖性。结论:ZM447439可抑制T47D细胞生长,产生G_2/M期阻滞。
- 张月张斌冯炜红李媛媛曹旭晨
- 关键词：乳腺癌AURORA增殖
- 黑黄胶囊治疗美菲康所致便秘的临床观察被引量：1
- 2013年
- [目的]探讨黑黄胶囊治疗美菲康所致便秘的临床价值。[方法]72例服用美菲康出现便秘的肿瘤患者随机分为治疗组(36例)和对照组(36例)。治疗组服用黑黄胶囊(药物组成:黑豆、马齿苋、生大黄、肉苁蓉、干芹菜),由天津北辰医院制剂室制成胶囊,每粒含生药0.5 g,每次6粒,每次饭前15 min温开水送服,每日2次。治疗期间停用其他各种通便药。对照组服用麻仁丸9 g,每日早晚口服。14 d为1个疗程,连续服药1个疗程后观察疗效。[结果]在便秘治疗的有效率及便秘伴随临床症状改善情况两方面比较,治疗组明显优于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]黑黄胶囊能够有效治疗美菲康所致便秘,值得临床推广。
- 胡永进杜学明许建辉吴春娃
- 关键词：便秘阿片类药物中医药疗法
- Aurora激酶抑制剂对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：5
- 2012年
- 目的观察Aurora激酶抑制剂VX-680对人乳腺癌MDA—MB-231细胞株增殖和凋亡的影响。方法不同浓度的VX-680处理MDA—MB-231细胞，倒置显微镜下观察细胞形态变化，用噻唑蓝（M1Tr）比色法和克隆形成实验检测乳腺癌细胞增殖，碘化丙锭（PI）单染法榆测细胞周期，免疫荧光观察核和纺锤体形态变化，免疫印迹法检测AuroraA／B蛋白、组蛋白和凋亡相关蛋白表达，Yo—Pro-1荧光染色观察细胞凋亡形态学变化。结果VX-680显著抑制MDA—MB-231增殖，24、48h半数抑制浓度（Ic50）分别为（2．362±0．599）、（0．102±0．556）μmol／L；经药物作用24h后，贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落；克隆形成率由（93．00±0．03）％降至（0．01±0．01）％，G0／G1期细胞由（51．27±0．75）％降至（5．87±0．49）％，G2／M期细胞由（17．67±1．25）％升高至（91．93±1．96）％，荧光染料法显示凋亡细胞数由（4．33±0．03）％增高至（44．00±0．04）％，实验组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；细胞核与纺锤体结构紊乱；免疫印迹检测提示磷酸化AuroraA／B、磷酸化Histone H3表达水平降低，Caspase-3和PARP被剪切。结论VX-680抑制乳腺癌细胞MDA—MB-231增殖、诱导凋亡呈剂量依赖性。
- 张月张斌冯炜红李媛媛刘博文曹旭晨
- 关键词：乳腺癌AURORA增殖脱噬作用
- SB939诱导乳腺癌细胞周期阻滞和凋亡的作用及机制被引量：2
- 2012年
- 目的观察组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂SB939对乳腺癌细胞株T47D和MDA—MB-231增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法不同浓度SB939处理细胞后，用噻唑蓝（MTY）比色法检测对细胞增殖影响；碘化丙锭（PI）染色法检测细胞周期变化；膜联蛋白V（AnnexinV）／PI双染法检测细胞凋亡；Westernblot检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）等蛋白表达水平；实时定量聚合酶链反应（ReM-timePCR）检测p21及细胞周期蛋白（Cyclin）B1mRNA水平。结果SB939明显抑制上述两种细胞增殖，24h半数抑制浓度（IC50）分别为（2．721±0．320）、（5．647±0．470）μmoL／L；1μmoL／L药物作用细胞24h，G2／M期比例增加，分别为（21．20±1．90）％、（28．35±2．25）％，凋亡细胞比例增加，分别为（37．60±1．34）％、（34．40±1．77）％，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；PARP剪切明显增加，bax、p21表达增多，B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）、cdc2、细胞周期蛋白（Cyclin）B1表达减少；p21mRNA水平增加，CyclinB1mRNA水平减少。结论SB939在体外条件下能够明显抑制乳腺癌细胞增殖，诱导细胞周期阻滞及促进细胞凋亡，并呈明显的量效关系。
- 李媛媛张斌张月冯炜红赵洪猛曹旭晨
- 关键词：乳腺肿瘤细胞周期细胞凋亡
- PHA739358抑制乳腺癌细胞增殖、诱导凋亡的分子机制被引量：2
- 2012年
- 目的 研究Aurora激酶抑制剂PHA739358抑制人乳腺癌T47D细胞增殖、诱导凋亡的分子机制.方法 用四甲基偶氮唑盐法（MTT法）评价PHA739358对T47D细胞增殖的影响；免疫荧光法观察染色体、核的变化；流式细胞术检测细胞周期阻滞和凋亡率；Western印迹检测AuroraA、pAurora A、Histone H3、p-Histone H3,周期特异性指标Cyclin B1,周期调节性指标Cdc2、Cdc25c、p-Cdc2、p-Cdc25c,凋亡诱导指标p21、p53,凋亡相关指标PARP、Bcl-2、Bax.结果 不同浓度的PHA739358处理细胞24h、48 h后,明显抑制T47D的增殖,IC50分别为（3.44±0.54） μ,mol/L、（0.21±0.67）μmol/L,核与纺锤体形态发生明显变化,G2/M期阻滞增加呈剂量依赖性,Western印迹显示Aurora A、Histone H3、Cdc2、Cdc25c无明显趋势变化,p-AuroraA、p-Histone H3、CyclinB1、Bcl-2随着浓度的增加而减少,p-Cdc2、p-Cdc25c、P21、P53、Bax、PARP随着浓度的增加而增加.流式细胞术凋亡率由0.31％ ±0.03％增加到40.6％±0.81％.结论 PHA739358抑制乳腺癌细胞T47D增殖、诱导凋亡的分子机制为乳腺癌治疗提供了新思路.
- 张月张斌冯炜红李媛媛曹旭晨
- 关键词：乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡
- 自噬与肿瘤治疗被引量：1
- 2011年
- 自噬是细胞内蛋白、细胞器降解的渐变过程。目前，自噬性细胞死亡被认为是第Ⅱ类程序化细胞死亡。对肿瘤细胞自噬的抑制可导致不同的结果——生存或死亡，因此自噬是细胞死亡机制还是细胞保护机制存在争议。总的来说，对自噬的利用可推动新的肿瘤治疗方法的进展。
- 陈祖锦张斌曹旭晨
- 关键词：自噬肿瘤
- 树突状细胞免疫治疗的新进展
- 2011年
- 树突状细胞（DC）为目前发现的体内最强的专职抗原提呈细胞，但在体内并不能进行充分的交叉提呈。目前可通过在体外制备DC疫苗或者与化疗等促凋亡治疗联用的方法，增强DC的抗原提呈能力，提高机体免疫系统的抗肿瘤作用。
- 刘博文张斌曹旭晨
- 关键词：树突细胞抗肿瘤药免疫疗法
- 芹菜素诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞系非P53依赖性凋亡的研究被引量：9
- 2013年
- 目的:探讨芹菜素(Apigenin)对乳腺癌MDA-MB-231细胞系凋亡的影响。方法:常规培养MDA-MB-231细胞,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法评价芹菜素对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响。荧光染色法观察细胞形态学变化。流式细胞术(FCM)Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。Western blot检测不同浓度芹菜素对Caspase-3,PARP,突变型P53,P73,PIG3,Bax,Bcl-2等凋亡相关蛋白表达的影响。RNA干扰技术检测P73对凋亡及下游靶基因PIG3表达的影响。结果:MTT结果显示,芹菜素10、20及40μM分别处理细胞24 h,发现芹菜素可有效抑制MDA-MB-231细胞增殖,且具有浓度依赖性和时间依赖性,实验组与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),两组组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);荧光染色结果显示,对照组未观察到凋亡细胞,芹菜素10μM、20μM及40μM组细胞中均可见凋亡小体,其数目随芹菜素浓度的增加而逐渐增加,具有浓度依赖性;流式细胞术结果显示,与对照组比较,芹菜素10μM,20μM及40μM组早期凋亡率逐渐增加,呈明显的量效关系,实验组与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,与对照组相比,芹菜素10μM、20μM及40μM组Caspase-3、PARP剪切带含量明显增加,P73、PIG3及Bax表达增加,而突变型P53与Bcl-2表达减少,且具有浓度依赖性。RNA干扰结果显示,与阴性对照组相比,p73-siRNA可有效抑制芹菜素诱导的PIG3表达,Caspase-3和PARP剪切含量也相应降低,实验组与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:芹菜素可通过非P53依赖性凋亡有效抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,其机制可能与下调突变型p53表达,上调P73介导的PIG3表达,以及Bax/Bcl-2比值增加有关。
- 张伟然张斌刘博文曹旭晨
- 关键词：芹菜素乳腺癌凋亡突变型P53
