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国家自然科学基金(30393131): 作品数：32 被引量：137H指数：7; 相关作者：高钰琪高文祥廖卫公孙胜刘福玉更多>>; 相关机构：第三军医大学军事医学科学院中国人民解放军西藏军区总医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学历史地理更多>>

蛋白激酶AMPK的研究进展被引量：14: 2005年; AMP激活的蛋白激酶(AMP-activatedproteinkinase,AMPK)广泛存在于真核细胞中,一旦被激活,即可磷酸化下游靶蛋白,关闭消耗ATP的合成代谢途径,开启产生ATP的分解代谢途径,被称为“细胞能量调节器”。许多新的下游靶蛋白的发现也为AMPK生物学效应的阐明提供了新思路。; 符庆瑛高钰琪; 关键词：AMPK 能量代谢 AMP

缺氧诱导因子1与PI3K/Akt/mTOR信号转导通路被引量：19: 2005年; 缺氧诱导因子1(HIF-1)是参与缺氧调节的核心因子,可调控一系列缺氧诱导基因的表达,与机体许多生理和病理过程也密切相关。尽管一些研究显示缺氧和非缺氧性刺激可通过PI3K/Akt/mTOR信号途径诱导HIF-1的表达和活性,PI3K信号途径是否参与对HIF-1的调节仍然是个有争议的研究热点。明确HIF-1和PI3K的相互作用关系,能进一步为肿瘤等相关疾病的防治提供新的思路和方法。本文主要就HIF-1和PI3K/Akt/mTOR关系作一简要综述。; 孙胜高钰琪高文祥范明; 关键词：缺氧诱导因子1 P13K AKT MTOR 信号转导

26例健康汉族人线粒体DNA region V 9 bp缺失多态性的检测被引量：2: 2007年; 目的测定中国汉族人线粒体DNAregionV9bp缺失多态性频率。方法抽取26例健康无血缘关系汉族人静脉血,提取总DNA,扩增线粒体DNAregionV,并测序,测序结果与剑桥修正序列比对。结果中国汉族人线粒体DNAregionV9bp缺失多态性出现频率为19.23%。结论汉族人线粒体DNAregionV9bp缺失多态性出现频率高于文献报道的维吾尔族人和蒙古族人该多态性出现频率。; 罗勇军高文祥高钰琪陈建谭小玲刘昕; 关键词：中国汉族人线粒体DNA 多态性

低氧调节大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体非协同性表达被引量：5: 2008年; 目的观察慢性低氧时大鼠线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白表达变化并讨论其病理生理学意义。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为慢性低氧(4500m,30d)组和对照组,取双侧腓肠肌,分离线粒体,用Clark氧电极法检测线粒体Ⅲ态呼吸(state3,ST3)、Ⅳ态呼吸(state4,ST4)和呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR),用Western blot检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白的表达。结果慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体ST3和RCR显著低于对照组(P<0.05)。慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体复合体Ⅰ30×103亚基、复合体Ⅱ70×103亚基、复合体Ⅴα亚基蛋白表达量显著低对照组(P<0.05)。2组线粒体ST4和复合体Ⅲ核心亚基2蛋白表达无显著性差异(P>0.05)。结论低氧可调节大鼠骨骼机线粒体复合体蛋白非协同性表达,导致线粒体氧化磷酸化功能下降。; 高文祥黄缄高钰琪谭小玲刘福玉蔡明春陈建; 关键词：线粒体骨骼肌 WESTERN BLOT

缺氧对大鼠中性粒细胞趋化能力的影响被引量：2: 2008年; 目的:研究急、慢性缺氧对大鼠中性粒细胞(PMNs)趋化能力的影响。方法:应用细胞微管吸吮实验技术,从单细胞角度研究在血清趋化作用下不同缺氧状态PMNs伪足生长的变化。结果:自身血清作趋化剂,急性、慢性缺氧组PMNs伪足长度分别为(1.200±0.178)μm和(1.094±0.164)μm,显著大于常氧对照组(0.914±0.156)μm(P<0.05);常氧、急性缺氧和慢性缺氧血清作用于常氧PMNs时,急、慢性缺氧血清作用下PMNs伪足长度分别为(1.059±0.179)μm和(1.041±0.175)μm,显著大于常氧血清作用(P<0.05);常氧血清作用于常氧、急性和慢性缺氧PMNs时,急性、慢性缺氧PMNs伪足长度分别为(1.058±0.163)μm和(1.118±0.126)μm,显著大于常氧对照组(P<0.05)。结论:急、慢性缺氧促进了大鼠PMNs趋化能力,缺氧后血液微环境的变化和PMNs响应能力的变化是其重要原因。; 张钢高钰琪; 关键词：缺氧趋化作用中性白细胞

神经细胞化学缺氧预处理模型的建立被引量：3: 2007年; 目的建立体外培养神经细胞的化学缺氧预处理实验模型。方法分化的SH-SY5Y细胞分为对照组、化学缺氧组、化学缺氧预处理组。用MTT法筛选合适的化学缺氧预处理和化学缺氧浓度。然后,分化的SH-SY5Y细胞随机分为对照组、化学缺氧组(250μmol/LCoCl2,24h)、化学缺氧预处理组(75μmol/LCoCl2,1.5h,常氧3h后,250μmol/LCoCl2,24h)。实验终点测乳酸脱氢酶释放率,并用MTT法检测细胞活力,以此来评价化学预缺氧对神经细胞化学缺氧的保护作用。结果化学缺氧预处理组细胞较化学缺氧组细胞存活率高、乳酸脱氢酶释放率减少,说明用CoCl2化学预缺氧可保护神经细胞对化学缺氧产生耐受。结论建立了简单易行、重复性好,可进一步应用于阐明缺氧预处理保护机制的神经细胞化学缺氧预处理实验模型。; 孙胜高文祥廖卫公高钰琪; 关键词：缺氧预处理化学缺氧人神经母细胞瘤

缺氧对高原藏族、汉族人脐静脉内皮细胞VEGF、iNOS和eNOS mRNA表达影响的比较被引量：3: 2005年; 目的比较缺氧对世居高原藏族人和移居高原汉族人脐静脉内皮细胞(UVECs)血管内皮生长因子(VEGF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达的影响。方法分离脐静脉内皮细胞,体外原代培养,分为①世居高原藏族组和②移居高原汉族组两组,每组包括常氧对照和缺氧(0.5%O2)2h、4h、12h和24h时点。分离细胞总RNA,分别用RT-PCR检测VEGF、iNOS和eNOSmRNA表达。结果缺氧可以诱导世居高原藏族人UVECs表达iNOS和VEGFmRNA表达增加,同时抑制eNOSmRNA表达。移居高原汉族人UVECs表达上述基因mRNA的特点与世居高原藏族人相似。结论缺氧时世居高原藏族人UVECsVEGF、iNOS和eNOSmRNA表达特点与移居高原汉族人相似,提示上述基因表达的改变可能是缺氧反应机制的共同过程。; 高文祥高钰琪李素芝张国斌宋玲孙秉庸史景泉; 关键词：缺氧内皮生长因子

低压缺氧延迟预适应小鼠海马差异表达基因的筛选及鉴定研究被引量：3: 2006年; 目的:探索低压缺氧延迟预适应小鼠海马差异表达基因。方法:将近交系Babl/c小鼠放入减压舱,模拟海拔7000m高度减压2·5h/d,连续3d。第3次减压毕36h后,提取海马总RNA,SMARTPCR合成cDNA,经抑制消减杂交,建立消减cDNA文库。随机挑取文库单克隆,用反向Northern杂交,分别对来自于正、反向文库的452个和74个克隆进行了筛选。结果:用消减探针筛选时,217个基因片段的杂交信号在延迟预适应海马增加2倍以上,85个基因片段的杂交信号则降低66%以下。用未消减探针筛选时,135个基因片段的杂交信号在延迟预适应海马增加2倍以上,44个基因片段的杂交信号则降低66%以下。对部分基因片段测序显示,小鼠线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1、线粒体NADH脱氢酶亚单位1和6、小鼠DSS1和克隆号为IMAGE:3582855的基因在延迟预适应海马表达增加。克隆号为IMAGE:3593193的基因、与成年雄性小鼠嗅脑的一个cDNA高度相似的基因及与小鼠bladder RCB-0544MBT-2cDNA高度相似的基因在延迟预适应海马表达降低。结论:小鼠海马低压缺氧延迟预适应多种基因表达发生改变,它们可能是产生低压缺氧延迟预适应的重要机制之一。; 范有明高钰琪黄缄廖卫公蔡明春; 关键词：小鼠海马抑制消减杂交

Altofrequency SNPs of mitochondrial DNA in 26 Han Chinese: 2007年; Objective: To explore the possible mitochondrial DNA (mtDNA) polymorphism in Han Chinese. Methods: The complete mitochondrial genome of 26 unrelated healthy Han Chinese were extracted and sequenced. Results:The mtDNA nucleotide sites (2 706, 7 028, 8 860, 11 719, and 15 326) were found totally different from the Revised Cambridge Reference Sequence (rCRS). These single nucleotide polymorphisms (SNPs) were 2 706 A→G, 7 028 C→T, 8 860 A→G, 11 719 G→A, 15 326 A→G. Conclusion: These findings provide new insights into the characteristics of Han Chinese mitochondrial genetic diversity.; 罗勇军高文祥高钰琪陈建谭小玲刘昕陈海华; 关键词：汉族中国人线粒体DNA 单核苷酸多态性 SNPS

低压低氧延迟预适应小鼠海马差异表达蛋白的分离及鉴定研究: 2006年; 目的:探索低压低氧延迟预适应(HHDP)小鼠海马差异表达蛋白。方法:建立小鼠海马HHDP动物模型后,用含尿素的细胞裂解液提取海马总蛋白质。经等电聚焦、SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝R250染色,比较对照组及HHDP组双向电泳图谱上蛋白质点的差异。切取HHDP组表达增高的蛋白质点,经脱色、胰蛋白酶酶切、提取肽片段,进行MALDI-TOF-MS检测。结果:在正常对照组和HHDP组海马总蛋白双向电泳图谱上,分别检测到481±38和477±21个点,匹配点为169±6个。其中HHDP组比对照组增高大于2倍的有33±10个点,降低大于2倍的有21±12个点。电泳图谱平均相关系数为0.7748±0.0267。有12个点在HHDP组显著增高(P<0.05,n=4),对其进行了肽质量指纹图谱分析,其中8个蛋白点得到相应的肽质量指纹图谱。数据库检索显示其中一个为果糖二磷酸醛缩酶A。3个在蛋白质数据库中没有检索到与之相匹配的任何蛋白,可能为新蛋白。另外4个可找到与其有部分匹配的氨基酸序列,但分子量和等电点与对应蛋白相差悬殊,它们可能具有同源性。结论:小鼠海马HHDP时,果糖二磷酸醛缩酶A等多种蛋白表达发生改变,可能是产生HHDP的重要机制之一。; 范有明高钰琪黄缄陈健蔡明春; 关键词：低压低氧延迟预适应小鼠海马双向电泳

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