国家科技重大专项(2009ZX08007-003B)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：黄英许淼蔡琳琳曲立娟朱怡文更多>>
- 相关机构：上海市儿童医院卫生部上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 优化反向PCR法对hTF转基因小鼠整合位点旁侧序列分析
- 2011年
- 自1982年世界上首次通过转基因动物技术获得＂巨鼠＂[1]以来,转基因动物的研究发展迅速。随着多种转基因动物的成功获得,研究者设想利用动物表达外源基因,以动物个体作为一个反应器来生产有价值的蛋白质。
- 谢俊许淼龚秀丽曲立娟颜景斌黄英
- 关键词：转基因小鼠整合位点转基因动物技术外源基因
- 不同方法处理供核细胞对细胞周期和重构胚发育的影响被引量：2
- 2012年
- 利用流式细胞仪和细胞染色体核型分析技术,比较奶牛的转基因体细胞和正常细胞经血清饥饿、抑制培养周期同步化处理后的G0/G1期细胞比例;并将同步化处理的核供体细胞进行核移植,然后统计囊胚发育率.结果表明,血清饥饿和抑制培养均能获得较高比例的G0/G1期细胞,两组间差异不显著(P>0.05),但均显著高于未处理对照组(P<0.05);血清饥饿组的囊胚率显著高于抑制培养组和非处理对照组(P<0.05);但细胞同步化处理6 d后细胞染色体核型异常率增加.因此,要获得正常核型的G0/G1核移植供体细胞和较高的囊胚率,同步化处理时间以不超过4 d为宜.
- 蔡琳琳阮井玲王娟曲立娟李华黄英
- 关键词：供核细胞同步化体细胞核移植
- 应用实时荧光定量PCR测定牛体细胞端粒长度被引量：2
- 2010年
- 本研究为了验证应用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative PCR,Q-PCR)测定牛基因组端粒长度的可行性,选取18个不同来源牛耳成纤维细胞抽提基因组DNA为样本,对Q-PCR和经典的Southern印迹法进行了相关性分析。结果显示,Q-PCR测定端粒长度相对T/S为1.16±0.24,Southern印迹法测量端粒平均TRF值为16.99 kb±0.85 kb,两种方法获得的结果相关性分析R2=0.5612(P<0.01),因此实时荧光定量PCR是一种测定牛基因组端粒长度的可靠的方法。
- 吕昆林丹许淼朱怡文黄英
- 关键词：荧光定量聚合酶链式反应印迹法牛体细胞端粒长度
- 外源基因转染山羊体细胞的整合效率研究被引量：1
- 2013年
- 为了探讨影响山羊体细胞中外源基因整合效率的因素,采集胎羊和小羊皮肤并制备成纤维细胞,采用"Lipofectamine LTX"脂质体转染试剂包埋外源基因,分别导入上述细胞中,比较同一种外源基因载体(人凝血因子Ⅸ)转染至不同个体和类型的羊细胞,以及不同载体(人凝血因子Ⅸ、人转铁蛋白和牛催乳素)转染至同一个体羊细胞的整合效率的差异.通过药物筛选得到单细胞簇,经定量PCR计算外源基因的整合效率.同一种外源目的基因载体转染小羊成纤维细胞的整合效率显著高于胎羊成纤维细胞(P<0.05);而不同目的基因载体转染同一个体羊细胞,其细胞的整合效率与转染载体的片段大小有关.由此可知,小羊成纤维细胞外源基因整合频率优于胎羊细胞,且载体片段的大小影响外源基因转染的整合频率.
- 蔡琳琳蔡勤许淼黄英
- 关键词：基因转染体细胞核移植技术
