上海市自然科学基金(08ZR1416800)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王艳栾晓玲陶丹英更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 唾液链球菌尿素酶结构亚基的克隆和表达被引量：1
- 2011年
- 目的:克隆和表达唾液链球菌尿素酶结构亚基UreA、UreB、UreC。方法:用已构建的含唾液链球菌57.I尿素酶基因簇的重组质粒为模板,分别克隆、双酶切、连接、转化,构建含结构基因的表达质粒,IPTG诱导表达,亲和层析纯化蛋白。结果:成功构建表达质粒,经诱导、亲和层析,获得高纯度、高浓度的UreA、UreB、UreC 3种目的蛋白。结论:成功诱导纯化唾液链球菌尿素酶的结构亚基,为今后各亚基的酶活分析和抗体制备等研究奠定基础。
- 栾晓玲王艳冯希平
- 关键词：克隆尿素酶
- 口腔细菌尿素酶的检测被引量：2
- 2011年
- 尿素可以持续地从健康人的唾液和龈沟液中分泌出来,被口腔细菌尿素酶快速水解,产生的氨能够升高口腔环境的pH值,引起菌斑生物膜的改变,从而减少龋齿的发生。由于尿素水解作用对口腔环境中微生物致病机制的重要影响,所以对尿素酶及其活性的检测对预防和治疗龋齿可能具有很大的帮助。现分别从定性检测、半定量检测、定量检测3个不同层面,将近年来报道的口腔细菌尿素酶的检测方法作一综述。
- 栾晓玲王艳冯希平
- 关键词：口腔细菌尿素酶龋齿
- 唾液链球菌尿素酶基因ureIABCEFGD活性表达与镍离子的关系被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆唾液链球菌57.Ⅰ的尿素酶基因ureIABCEFGD转化大肠杆菌,检测重组菌株的尿素分解活性与外源性镍离子浓度的关系。方法:将目的基因分成前、后2段分别克隆,再酶切、连接并测序鉴定,得到的尿素酶基因ureIABCEFGD质粒转化感受态大肠杆菌TG-1,分别添加不同浓度的NiCl2,经Nessler试剂盒检测其分解尿素的产氨量,采用SPSS17.0软件包对产氨量和NiCl2浓度进行线性相关分析。结果:克隆的尿素酶基因ureIABCEFGD序列正确,该克隆转化大肠杆菌后,随着外源性NiCl2浓度增高,重组菌株的产氨量迅速增高,呈正相关(r=0.9714,P<0.01);当NiCl2浓度增加到50μmol/L时,产氨量趋于峰值,不再随NiCl2的浓度而增加。结论:唾液链球菌尿素酶基因ureIABCEFGD尿素分解活性的表达在一定浓度范围内与外源性镍离子的添加呈正相关,该克隆可用于进一步研究尿素分解活性的调控机制和方法。
- 王艳李存荣陶丹英冯希平
- 关键词：链球菌尿素酶龋病
