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福建省科技厅青年人才基金(2006F3033)
作品数:
3
被引量:2
H指数:1
相关作者:
严茂林
王耀东
周松强
陈忠
游燊
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吲哚胺
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严茂林
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2011
1篇
2010
1篇
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表达IDO的Kupffer细胞对小鼠移植皮片存活的影响
2009年
目的:探讨表达吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)的KC对同种异体小鼠移植皮片存活时间的影响及其机制。方法:构建BABL/c→C57BL/6的皮肤移植模型,分别于移植术后第2、7、14天输注KC,于移植术后第7天每组各取2只皮瓣行HE染色和TUNEL以检测淋巴细胞浸润和凋亡情况。Kaplan-Meier对数秩检验对各组进行生存分析。结果:输入表达IDO和FasL的KC能明显延长BABL/c→C57BL/6皮肤移植模型中皮肤移植物的存活时间,1-甲基色氨酸能阻断此效应。IFN-γ组皮瓣浸润淋巴细胞的凋亡率较高(P<0.05)。结论:表达IDO和FasL的KC在体内能明显延长同种异体小鼠皮片的存活时间,IDO在KC维持外周免疫耐受中发挥重要作用。
严茂林
关键词:
KUPFFER细胞
吲哚胺2,3-二氧化酶
皮肤移植
小鼠
表达吲哚胺2,3-二氧化酶的Kupffer细胞在体外对同种异体T淋巴细胞的凋亡作用
被引量:1
2011年
目的探讨表达吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)的Kupffer细胞(KC)在体外对小鼠同种异体T淋巴细胞(TC)增殖的抑制作用。方法用实时荧光定量PCR检测经IFN-γ处理或未处理的KC表达IDOmRNA和FasLmRNA的情况。用高压液相色谱仪分析IDO对色氨酸的分解作用以了解其活性。用3H嵌入增殖试验检测KC对同种异体TC增殖抑制情况。用流式细胞仪分析KC对同种异体TC细胞周期的影响和凋亡作用。结果实时荧光定量PCR显示:经IFN-γ处理后小鼠KC表达IDO和FasL并且其表达在6h后均达到高峰。IDO能降低培养基中色氨酸的浓度,提高其代谢产物犬尿氨酸浓度。表达IDO的KC能明显抑制同种异体TC的增殖,但1-甲基色氨酸和抗FasL抗体能部分阻断其增殖抑制作用,且存在剂量依赖关系。表达IDO和FasL的KC能阻滞同种异体TC于G1中期,诱导其凋亡。结论除了FasL/Fas途径,IDO可能是KC抑制同种异体TC的增殖并诱导其凋亡的另一机制。
严茂林
王耀东
田毅峰
赖智德
邱福南
周松强
游燊
陈忠
关键词:
KUPFFER细胞
IDO
FASL
免疫耐受
携带白蛋白启动子和IDO基因重组腺病毒的构建
被引量:1
2010年
目的构建携带小鼠白蛋白启动子和IDO基因的重组腺病毒载体,研究肝脏Hepa 1-6细胞的IDO基因mRNA及蛋白表达情况。方法酶切含有小鼠全长IDO cDNA的IDO质粒,亚克隆至穿梭载体pAdTrack-ALB上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,生成并筛选阳性克隆,测序、鉴定正确后,转染AD-293细胞进行包装、扩增,检测病毒滴度,RT—PCR和荧光显微镜鉴定重组腺病毒转染AD-293细胞后IDO的表达。重组腺病毒进一步感染Hepa 1-6细胞,RT—PCR和Western Blot法分别检测IDO基因在细胞内表达情况。结果经酶切及测序证实携带白蛋白启动子和IDO基因重组腺病毒载体构建成功,RT—PCR检测到转染后AD-293细胞内IDO的表达,病毒感染滴度为2.9×10^6pfu/ml。感染Hepa 1-6细胞后,RT—PCR和Western Blot可以检测到IDO mRNA水平和蛋白水平表达。结论构建了携带白蛋白启动子和IDO基因的重组腺病毒载体。
白燕南
严茂林
王耀东
李德华
关键词:
白蛋白类
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